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大豆根瘤菌Q7-3菌株分离鉴定及特性分析 被引量:1
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作者 朱加楠 毕宇 +4 位作者 潘钰 姜超 于冲 王玉霞 刘春燕 《生物技术》 CAS 2024年第6期722-727,共6页
[目的]分离筛选黑龙江省齐农7号大豆株系根瘤菌,探究其基本特性及对齐农7号大豆生长结瘤的影响。[方法]组织分离法分离筛选根瘤菌,进行系统发育分析,明确其种属关系。回接盆栽试验确定根瘤菌对寄主结瘤能力的影响。液体培养测定根瘤菌... [目的]分离筛选黑龙江省齐农7号大豆株系根瘤菌,探究其基本特性及对齐农7号大豆生长结瘤的影响。[方法]组织分离法分离筛选根瘤菌,进行系统发育分析,明确其种属关系。回接盆栽试验确定根瘤菌对寄主结瘤能力的影响。液体培养测定根瘤菌耐盐碱能力,分析其对唯一碳氮源的利用能力。[结果]从齐农7号大豆中分离出1株根瘤菌Q7-3,经系统发育分析鉴定为快生型贾氏根瘤菌(Rhizobium giardinii)。将根瘤菌Q7-3回接到齐农7号大豆后,与对照相比,其叶绿素含量为29.37±0.53(SPAD值),提高了29.21%;氮素含量为(12.87±0.53)mg/g,提高了30.93%;根瘤数、根瘤鲜重分别为(17±5.72)个、(0.13±0.01)g。基本特性分析发现根瘤菌Q7-3不耐盐胁迫。当培养环境pH值≤10.31时,根瘤菌Q7-3在碱性环境中生长繁殖能力较强,pH值≥10.92时根瘤菌Q7-3几乎不生长。碳氮源利用测定发现,根瘤菌Q7-3能以蔗糖作为唯一碳源。以硫酸铵、胰蛋白胨和尿素为唯一氮源时,根瘤菌Q7-3几乎不生长或繁殖能力较弱。[结论]根瘤菌Q7-3为快生型贾氏根瘤菌且可促进齐农7号大豆结瘤,有耐碱特性,能以蔗糖为唯一碳源生长繁殖。 展开更多
关键词 大豆 根瘤菌 共生 结瘤 耐盐性 耐碱性 碳源 氮源
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Thermotoga sp.RQ7内切纤维素酶TsCel12A蛋白的酶学性质和晶体学研究 被引量:1
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作者 李媛 张丽 +1 位作者 陈安琪 季朝能 《复旦学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期489-496,共8页
纤维素作为丰富的可再生资源,可以通过水解制取乙醇、低聚糖等多类产品,在能源与食品等领域有广泛应用,生物酶法降解因为高效环保而成为纤维素的工业应用的主要途径.内切纤维素酶可以通过水解β-1,4糖苷键将纤维素转变为短片段多糖,是... 纤维素作为丰富的可再生资源,可以通过水解制取乙醇、低聚糖等多类产品,在能源与食品等领域有广泛应用,生物酶法降解因为高效环保而成为纤维素的工业应用的主要途径.内切纤维素酶可以通过水解β-1,4糖苷键将纤维素转变为短片段多糖,是起始纤维素水解的关键酶,稳定高效的内切纤维素酶是纤维素生物酶解的关键.本文成功表达、纯化了来源于嗜热菌Thermotoga sp.RQ7的内切纤维素酶TsCel12A,酶学性质实验结果显示其最适反应温度为95℃、最适反应pH为9.0,K m为(0.3602±0.0343)mmol/L,Kcat为(4.58±0.1211)s^-1,且于5 mol/LNaCl盐溶液中不失活,说明该酶具备在高温、高盐及碱性环境下工业应用的潜力.通过结晶和优化筛选到高质量晶体,X-衍射数据分析获得了分辨率为2.36?,所属空间群P622,晶胞参数为a=184.974,b=184.974,c=49.873,α=90°,β=90°,γ=120°的晶体数据,为此酶三维结构的测定及其催化机制的阐明和酶性质的改造提供了结构基础. 展开更多
关键词 糖苷酶 内切纤维素酶 热稳定性 工业应用
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外泌体递送CRISPR/Cas系统在靶细胞内可实现基因编辑
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作者 王白燕 杨树 +5 位作者 王弋鸣 吴梦晴 肖瑀 郭梓璇 张博艺 冯书营 《中国组织工程研究》 北大核心 2026年第7期1839-1849,共11页
背景:CRISPR/Cas基因编辑系统具有精准基因编辑、靶向设计简单、低成本以及高效率等特性,已被广泛应用于科学研究和相关临床治疗。然而,CRISPR/Cas系统如何更安全、更高效、更精准地递送到靶细胞内,仍是一个急需解决的难题。目的:从递送... 背景:CRISPR/Cas基因编辑系统具有精准基因编辑、靶向设计简单、低成本以及高效率等特性,已被广泛应用于科学研究和相关临床治疗。然而,CRISPR/Cas系统如何更安全、更高效、更精准地递送到靶细胞内,仍是一个急需解决的难题。目的:从递送CRISPR/Cas系统的外泌体来源及工程化策略、外泌体对CRISPR/Cas系统的装载方法、CRISPR/Cas系统的生物形式及其在细胞内的作用途径等方面进行全方面综述,为该领域的研究者提供更直观、更系统的视角。方法:以“exosome,drug delivery systems,delivery,CRISPR/Cas,gene editing,engineered exosomes,targeting”为英文检索词,以“外泌体,药物递送,CRISPR/Cas,工程化”为中文检索词,分别检索Pub Med数据库及中国知网,检索时限为2014-2024年。通过仔细阅读文献的标题和摘要进行初步筛选,排除研究内容相关性差及内容重复的文献,最终纳入了78篇文献进行归纳和探讨。结果与结论:(1)外泌体是一种直径30-150 nm的脂质囊泡,具有循环半衰期长、靶向组织的内在能力、良好的生物相容性以及较小的固有毒性等优势,显现出强大的靶向递送能力;(2)CRISPR/Cas系统虽是一种强大的基因编辑工具,然而现有的CRISPR/Cas系统递送载体各有利弊,无法完全满足需求;(3)递送CRISPR/Cas系统的外泌体主要来源于高产外泌体的细胞或组织,但研究者们依然需要根据研究所需进行选择或进一步工程化;(4)递送CRISPR/Cas系统的外泌体主要通过基因工程修饰、化学修饰、外泌体-脂质体杂交等策略实现工程化;(5)外泌体装载CRISPR/Cas系统的方法包括电穿孔、孵育、转染和主动装载途径等,选择合适的装载方法取决于CRISPR/Cas系统的理化性质;(6)外泌体递送CRISPR/Cas系统的生物形式包括质粒和核糖核蛋白复合体,两种形式各具特点,成功递送的CRISPR/Cas系统在靶细胞内实现基因编辑。 展开更多
关键词 外泌体 CRISPR/Cas系统 基因编辑 药物负载 靶向递送 工程化
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白肉灵芝的研究进展 被引量:1
4
作者 张梅娟 于政良 钱朋智 《高师理科学刊》 2025年第4期84-90,106,共8页
白肉灵芝(Ganoderma leucocontextum)是在我国西藏地区发现的一种珍贵食药用菌,富含多糖、三萜等有效活性成分,具有抗癌、抗肿瘤、保护神经、免疫调节等多种功效。通过对白肉灵芝的分类鉴定、全基因组、生长栽培、液体发酵和活性成分作... 白肉灵芝(Ganoderma leucocontextum)是在我国西藏地区发现的一种珍贵食药用菌,富含多糖、三萜等有效活性成分,具有抗癌、抗肿瘤、保护神经、免疫调节等多种功效。通过对白肉灵芝的分类鉴定、全基因组、生长栽培、液体发酵和活性成分作用等方面研究情况进行综述,为白肉灵芝的进一步开发与利用提供参考。 展开更多
关键词 白肉灵芝 分类鉴定 液体发酵 活性成分作用 研究进展
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无缝克隆技术在国家级一流本科课程《分子生物学实验》中的应用实例
5
作者 骆静 李雅楠 +4 位作者 王一迪 杨冬 佟丽 沈虹宇 尹燕霞 《中国生物化学与分子生物学报》 北大核心 2025年第10期1552-1558,共7页
无缝克隆技术作为一种革命性的和高效的分子生物学工具,已经应用到了基础生物学、生物技术和生物医药等多个研究领域。本文介绍一项适合本科生《分子生物学实验》课程的教学改革项目,即利用无缝克隆技术构建碱性磷酸酶突变体基因的原核... 无缝克隆技术作为一种革命性的和高效的分子生物学工具,已经应用到了基础生物学、生物技术和生物医药等多个研究领域。本文介绍一项适合本科生《分子生物学实验》课程的教学改革项目,即利用无缝克隆技术构建碱性磷酸酶突变体基因的原核表达载体,并将其引入国家级一流本科课程《分子生物学实验》中。通过具体的教学案例,本文对实验项目的设计与实施进行了系统化探索,并着重分析了该教学内容的重点和难点。本文的教学实践发现,该教改项目的实施在提升学生的生物学核心素养、生物信息学技能、科研思维和创新能力方面取得了非常好的教学效果;同时该技术的应用能够显著提升实验教学的质量,为推进国家级一流实验课程的改革创新提供了新的思路与实践参考。 展开更多
关键词 无缝克隆 限制性内切酶克隆 碱性磷酸酶基因 突变体 国家级一流课程
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基因转染技术与组织纤维化修复
6
作者 吴显元 张霓霓 黄桂林 《中国组织工程研究》 北大核心 2026年第13期3424-3434,共11页
背景:近年来研究发现外泌体在组织损伤修复领域具有巨大潜力,作为天然纳米级囊泡载体,外泌体具有低免疫原性与较好的生物相容性等优点,在细胞间通讯中发挥重要作用,基因工程化细胞通过旁分泌作用发挥组织修复功能已成为目前研究者们关... 背景:近年来研究发现外泌体在组织损伤修复领域具有巨大潜力,作为天然纳米级囊泡载体,外泌体具有低免疫原性与较好的生物相容性等优点,在细胞间通讯中发挥重要作用,基因工程化细胞通过旁分泌作用发挥组织修复功能已成为目前研究者们关注的重点。目的:总结基因转染技术在肺、肝、心脏、肾、唾液腺纤维化修复中的作用,展望工程化外泌体的未来研究方向与发展趋势。方法:在PubMed数据库中以“gene transfection,gene therapy,transfection,tissue fibrosis,mechanism of fibrosis,radiation-induced salivary gland injury,repair”为关键词进行检索,在CNKI数据库中以“基因转染,基因治疗,组织纤维化,纤维化的机制,放射性唾液腺损伤,组织修复”为关键词进行检索,通过快速浏览文章题目及摘要进行筛选,排除与主题关系不密切的文章,最终筛选出80篇文献进行综述。结果与结论:①通过基因工程化干细胞、基因工程化干细胞衍生外泌体将外源基因导入目的细胞可以发挥抗细胞凋亡、抗炎、抗纤维化等作用,在修复肺、肝、心脏、肾、唾液腺纤维化损伤疾病中发挥重要作用;②外泌体作为一种天然的纳米级细胞间通讯载体,因其优异的生物相容性、低免疫原性和高效的细胞摄取能力,逐渐成为基因治疗的新型载体;基因工程化干细胞衍生外泌体克服了传统干细胞移植过程中细胞寿命有限、细胞植入效率低以及细胞移植可能带来的免疫排斥反应和肿瘤形成风险等,具有更高的安全性和更有效的靶向递送能力;③通过基因工程、化学修饰等手段增强外泌体的靶向性,并结合基于微流控的分离技术和跨学科治疗策略进一步提高了治疗效果;但目前运用基因工程化细胞并使其通过旁分泌作用发挥组织修复作用的研究较少,且多数为体外实验研究或小动物模型研究,缺乏大动物模型和长期安全性评估数据,未来仍需加强临床转化研究进一步验证其治疗安全性和长期有效性。 展开更多
关键词 纤维化 肌成纤维细胞 基因治疗 基因转染 组织修复 外泌体 旁分泌 外泌体靶向修饰
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单细胞与空间组学的技术前沿、计算范式及新兴挑战
7
作者 林贯川 潘星华 《中国生物化学与分子生物学报》 北大核心 2025年第11期1559-1565,共7页
单细胞与空间组学技术正在引领生命科学领域一场深刻的范式变革,推动研究视角实现双重跃升:从“群体细胞平均”走向“单细胞精度”,从“细胞组成”回归“组织空间结构”。这一转变极大深化了我们对生命复杂系统及其运行机制的理解。在... 单细胞与空间组学技术正在引领生命科学领域一场深刻的范式变革,推动研究视角实现双重跃升:从“群体细胞平均”走向“单细胞精度”,从“细胞组成”回归“组织空间结构”。这一转变极大深化了我们对生命复杂系统及其运行机制的理解。在技术层面,单细胞研究已由早期的单一转录物组检测,发展为可同步获取多组学信息的整合分析体系;而空间组学的兴起则基于转录物特征成功再现了细胞在原生组织中的空间位置信息或微生态,进一步拓展至空间表观遗传乃至空间多组学维度。在计算方法上,人工智能与机器学习已成为核心引擎,贯穿数据整合、空间区域解析、细胞通讯及其他功能推断乃至基础大模型构建等多个环节,不仅有效应对海量数据的处理及其与历史数据的整合难题,更成为发现生物学新规律的重要工具。这些技术进步催生了重要的理论框架创新。在临床转化方面,该技术体系尤其在精准肿瘤学中展现出变革性潜力——通过揭示肿瘤异质性和免疫微环境的空间构象,并借助单细胞数据开展反卷积建模,为疾病诊断、预后评估和个性化治疗开辟了新路径。尽管当前在技术通量、算法效率和临床转化等方面仍存在挑战,但单细胞与空间组学和人工智能等前沿领域的深度融合,必将持续推动生命科学基础研究迈向机制化和预测性的新阶段,最终为精准医学的实践注入强劲动力。 展开更多
关键词 单细胞测序 空间组学 多组学整合 人工智能 计算分析 肿瘤微环境 精准医学
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RNA特异性腺苷脱氨酶在无脊椎动物中的功能研究进展
8
作者 李红岩 张依 《中国海洋大学学报(自然科学版)》 北大核心 2026年第1期125-133,共9页
RNA特异性腺苷脱氨酶(Adenosine deaminases acting on RNA,ADAR)蛋白家族广泛分布于脊椎动物与无脊椎动物中。目前,脊椎动物ADAR的功能研究已较为系统和深入,诸多研究指出了其在免疫调控、病毒防御、癌症治疗以及神经发育等多个领域发... RNA特异性腺苷脱氨酶(Adenosine deaminases acting on RNA,ADAR)蛋白家族广泛分布于脊椎动物与无脊椎动物中。目前,脊椎动物ADAR的功能研究已较为系统和深入,诸多研究指出了其在免疫调控、病毒防御、癌症治疗以及神经发育等多个领域发挥的关键作用。本文归纳了无脊椎动物ADAR研究中的关键问题,重点聚焦于其结构特征、表达模式、RNA编辑情况,以及在免疫和神经发育方面的功能。分析表明,无脊椎动物ADAR与脊椎动物ADAR具有相似的功能,这充分体现了ADAR在无脊椎与脊椎动物之间功能的高度保守性。在此基础上,本文对无脊椎动物ADAR的系统演化规律及其在跨物种适应性中的分子机制研究前景进行了展望,以期为深入解析ADAR家族的进化保守性与功能多样性提供理论参考。 展开更多
关键词 RNA特异性腺苷脱氨酶蛋白 无脊椎动物 RNA编辑 先天免疫 神经系统
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黄烷酮-3-羟化酶在植物中的研究进展 被引量:1
9
作者 张梅娟 胡艺馨 《高师理科学刊》 2025年第5期76-82,共7页
黄烷酮-3-羟化酶(flavanone 3-hydroxylase,F3H)作为类黄酮生物合成途径上的一个关键酶,能够催化黄烷酮生成二氢黄酮醇,进而影响花青素、黄酮醇等多种类黄酮物质的合成,在植物的生长发育、逆境响应及次生代谢调控中发挥重要作用。对植物... 黄烷酮-3-羟化酶(flavanone 3-hydroxylase,F3H)作为类黄酮生物合成途径上的一个关键酶,能够催化黄烷酮生成二氢黄酮醇,进而影响花青素、黄酮醇等多种类黄酮物质的合成,在植物的生长发育、逆境响应及次生代谢调控中发挥重要作用。对植物F3H的克隆、结构与进化过程进行了介绍,并对植物中F3H参与生物胁迫及非生物胁迫响应的研究进展进行了综述,期望为深入研究植物F3H在逆境条件下的生物学功能提供参考依据。 展开更多
关键词 类黄酮化合物 F3H 生物胁迫 非生物胁迫
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水环境病原菌污染特性及qPCR检测技术应用
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作者 尹红果 刘霜 李亚军 《科技创新与生产力》 2025年第8期57-60,共4页
文章归纳了环境水体中常见致病菌和侵染特征,介绍了实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time Polymerase Chain Reaction,qPCR)技术的基本理论和在水环境检测中的应用,指出其与传统检测方法相比具有灵敏度高、操作简便、可实现定量检测... 文章归纳了环境水体中常见致病菌和侵染特征,介绍了实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time Polymerase Chain Reaction,qPCR)技术的基本理论和在水环境检测中的应用,指出其与传统检测方法相比具有灵敏度高、操作简便、可实现定量检测、污染小等优势,以期促进该技术在水环境病原菌检测中的推广应用。 展开更多
关键词 水环境 病原菌 污染特性 qPCR
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A bacterial type-II toxin-antitoxin-mediated gene amplification system in Saccharomyces cerevisiae
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作者 Samuel Evans Zeyu Lu +12 位作者 Liam McDonnell Will Anderson Francisco Peralta Tyson Watkins Hafna Ahmed Carlos Horacio Luna-Flores Thomas Loan Laura Navone Matt Trau Colin Scott Robert E*Speight Claudia E*Vickers Bingyin Peng 《Life Research》 2026年第1期5-16,共12页
Background:Tandem gene repeats naturally occur as important genomic features and determine many traits in living organisms,like human diseases and microbial productivities of target bioproducts.Methods:Here,we develop... Background:Tandem gene repeats naturally occur as important genomic features and determine many traits in living organisms,like human diseases and microbial productivities of target bioproducts.Methods:Here,we developed a bacterial type-II toxin-antitoxin-mediated method to manipulate genomic integration of tandem gene repeats in Saccharomyces cerevisiae and further visualised the evolutionary trajectories of gene repeats.We designed a tri-vector system to introduce toxin-antitoxin-driven gene amplification modules.Results:This system delivered multi-copy gene integration in the form of tandem gene repeats spontaneously and independently from toxin-antitoxin-mediated selection.Inducing the toxin(RelE)expressing via a copper(II)-inducible CUP1 promoter successfully drove the in-situ gene amplification of the antitoxin(RelB)module,resulting in~40 copies of a green fluorescence reporter gene per copy of genome.Copy-number changes,copy-number increase and copy-number decrease,and stable maintenance were visualised using the green fluorescence protein and blue chromoprotein AeBlue as reporters.Copy-number increases happened spontaneously and independent on a selection pressure.Increased copy number was quickly enriched through toxin-antitoxin-mediated selection.Conclusion:In summary,the bacterial toxin-antitoxin systems provide a flexible mechanism to manipulate gene copy number in eukaryotic cells and can be exploited for synthetic biology and metabolic engineering applications. 展开更多
关键词 tandem repeats gene amplification TOXIN-ANTITOXIN genetic dosage genome evolution
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蛋白质去乙酰化酶介导的表观修饰在基因组稳定性维持中的双重调节机制
12
作者 刘锦 《医学研究前沿》 2026年第1期40-42,共3页
基因组稳定性是细胞正常生命活动的核心保障,其失衡会诱发肿瘤、衰老等多种重大疾病。蛋白质去乙酰化酶作为表观遗传调控的关键酶类,可通过修饰组蛋白与非组蛋白底物,在染色质构象重塑、DNA损伤应答、复制叉保护等过程中发挥作用。近年... 基因组稳定性是细胞正常生命活动的核心保障,其失衡会诱发肿瘤、衰老等多种重大疾病。蛋白质去乙酰化酶作为表观遗传调控的关键酶类,可通过修饰组蛋白与非组蛋白底物,在染色质构象重塑、DNA损伤应答、复制叉保护等过程中发挥作用。近年来研究发现,该类酶对基因组稳定性的调控并非单向,而是呈现出保护性与破坏性并存的双重调节特征。本文系统梳理了去乙酰化酶的生物学基础及表观调控功能,阐明其维持基因组稳定性的核心调控路径,并深入解析其双重调节的分子机制,同时展望该领域的研究前景,为靶向去乙酰化酶的疾病干预策略提供理论支撑。 展开更多
关键词 蛋白质去乙酰化酶 表观修饰 基因组稳定性 DNA损伤修复
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海洋弧菌Vibrio sp.L2褐藻胶裂解酶AlgL3199的表达及酶学性质研究 被引量:2
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作者 王海英 陈志芳 +3 位作者 朱甜甜 孙晶晶 王伟 郝建华 《食品与发酵工业》 北大核心 2025年第15期174-184,共11页
褐藻胶通过生物降解法可制备低分子质量的褐藻寡糖,以克服褐藻胶生物利用度低的缺点,广泛应用于医疗、食品、化妆品等行业。该研究克隆表达了一株海洋弧菌Vibrio sp.L2中的褐藻胶裂解酶基因AlgL3199,并对其酶学性质和降解产物进行研究。... 褐藻胶通过生物降解法可制备低分子质量的褐藻寡糖,以克服褐藻胶生物利用度低的缺点,广泛应用于医疗、食品、化妆品等行业。该研究克隆表达了一株海洋弧菌Vibrio sp.L2中的褐藻胶裂解酶基因AlgL3199,并对其酶学性质和降解产物进行研究。以Vibrio sp.L2基因组为模板,克隆褐藻胶裂解酶基因,构建重组质粒pET-24a(+)/AlgL3199进行异源表达,经HisTrap^(TM)HP柱亲和层析纯化后进行酶学性质及降解产物的研究。结果表明,重组酶AlgL3199最适温度为40℃,在10~35℃下保温1 h可保留80%以上的活性;最适pH值为10,在pH 8~10孵育12 h可保留70%以上的活性;金属离子终浓度为1 mmol/L时,Cu^(2+)、Mn^(2+)、Co^(2+)对重组酶AlgL3199有明显促进作用,十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfate,SDS)及EDTA完全抑制酶的活性;NaCl终浓度为1.125 mol/L时对重组酶AlgL3199激活效应最强;根据底物特异性及薄层层析结果表明,重组酶AlgL3199酶解PolyM、PolyG及褐藻酸钠的主产物均为二糖至四糖,是一种具有G偏好性的内切型双功能酶。以上结果表明,AlgL3199已成功在大肠杆菌中实现了异源表达,在低温和弱碱性环境下比较稳定,是一种双功能褐藻胶裂解酶,这为褐藻胶的降解提供了一种新型工具酶,有利于褐藻工业生物技术的发展和应用。 展开更多
关键词 褐藻胶裂解酶 褐藻寡糖 酶学性质 异源表达
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锚蛋白在植物生长发育及非生物胁迫响应中的研究进展
14
作者 张梅娟 秦旭洋 《高师理科学刊》 2025年第3期66-71,共6页
锚蛋白广泛存在于生物体中,可参与蛋白质分子间的相互作用,其主要特征是含有锚蛋白重复序列串联结合形成的锚蛋白结构域.除锚蛋白结构域外,大多数锚蛋白还包含其他一些结构域,根据所包含结构域的差异可分为16个类别.该蛋白质家族广泛参... 锚蛋白广泛存在于生物体中,可参与蛋白质分子间的相互作用,其主要特征是含有锚蛋白重复序列串联结合形成的锚蛋白结构域.除锚蛋白结构域外,大多数锚蛋白还包含其他一些结构域,根据所包含结构域的差异可分为16个类别.该蛋白质家族广泛参与植物的生长发育及非生物胁迫的响应.介绍了植物中锚蛋白的结构和分类,综述了植物中锚蛋白参与生长发育及非生物胁迫响应的研究进展,并对后续的研究方向提出了展望,以期为锚蛋白的深入研究提供参考. 展开更多
关键词 植物 锚蛋白 生长发育 非生物胁迫
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翻白叶树叶绿体基因组及特征分析
15
作者 陆叶 翁禹豪 +2 位作者 郑雪燕 李勇 叶代全 《江苏林业科技》 2025年第4期1-7,29,共8页
翻白叶树是中国南方的常绿树种,具有重要的经济和药用价值。通过Illumina HiSeq X ten高通量测序平台,对翻白叶树叶绿体基因组进行测序、组装和注释,分析翻白叶树的叶绿体基因组特征及系统发育关系。结果表明,翻白叶树叶绿体全基因组具... 翻白叶树是中国南方的常绿树种,具有重要的经济和药用价值。通过Illumina HiSeq X ten高通量测序平台,对翻白叶树叶绿体基因组进行测序、组装和注释,分析翻白叶树的叶绿体基因组特征及系统发育关系。结果表明,翻白叶树叶绿体全基因组具有典型的四分体结构,全长为162843 bp,共注释126个基因,其中包括81个蛋白编码基因、37个tRNA和8个rRNA。密码子偏好性分析表明,翻白叶树的密码子使用模式偏向以A或U结尾,亮氨酸(Leu)密码子使用频率最高,半胱氨酸(Cys)使用率最低。重复序列分析共检测到284个SSR位点,其中单碱基重复的SSR位点最多,有171个,6碱基重复最少,仅有2个。翅子树属叶绿体基因组比较分析显示,反向重复区域的位置和边界区域的基因分布存在收缩与扩张的现象。系统发育分析表明,翻白叶树与景东翅子树、勐仑翅子树、截裂翅子树和蚬木亲缘关系较近。该研究为翻白叶树的分子标记开发、物种鉴定以及遗传多样性评估等研究提供重要的理论依据。 展开更多
关键词 翻白叶树 叶绿体基因组 密码子偏好性 系统发育分析
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WRKY转录因子调控植物次生代谢物研究进展 被引量:4
16
作者 罗贵 朱历勇 +5 位作者 谷雷 王洪程 杜旭烨 朱斌 曾拓 王彩云 《陕西师范大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第3期115-128,共14页
植物次生代谢物是植物在生长过程中通过次生代谢途径合成的一类具有生理活性的有机化合物,其并不是植物生长发育的必需成分,但在植物生存、环境适应、抗逆性等方面发挥着关键作用。WRKY转录因子家族因具有特征性的保守核心序列WRKYGQK... 植物次生代谢物是植物在生长过程中通过次生代谢途径合成的一类具有生理活性的有机化合物,其并不是植物生长发育的必需成分,但在植物生存、环境适应、抗逆性等方面发挥着关键作用。WRKY转录因子家族因具有特征性的保守核心序列WRKYGQK结构域而得名,是高等植物中规模最大且功能最为多样化的转录因子家族之一,在植物界广泛分布。WRKY转录因子通过调控次生代谢产物合成参与植物的生长发育、环境应答和化学防御等多种生理过程。文章综述了WRKY转录因子的结构特征与分类,并重点讨论了其在调控植物次生代谢产物(如萜类、酚类和生物碱)合成中的研究进展。未来研究应进一步探索WRKY转录因子在植物次生代谢调控网络中的作用机制,以及在增强植物抗逆性和改良次生代谢产物品质方面的潜在应用,以期为农业生物技术的发展和植物功能性改良提供理论与实践支持。 展开更多
关键词 WRKY转录因子 植物次生代谢物 萜类 酚类 生物碱
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单碱基突变检测方法及应用的研究进展 被引量:1
17
作者 刘华 宋洁 +2 位作者 曾海娟 王金斌 钱韻芳 《生物技术通报》 北大核心 2025年第6期61-70,共10页
单碱基突变是指在基因组序列中由于单个核苷酸发生改变的一种基因突变类型,已被证明是造成生物体遗传性状、疾病易感性和耐药性的重要原因之一,在遗传学、疾病诊断及生物进化等众多领域具有重要研究意义。随着核酸检测技术的不断发展,... 单碱基突变是指在基因组序列中由于单个核苷酸发生改变的一种基因突变类型,已被证明是造成生物体遗传性状、疾病易感性和耐药性的重要原因之一,在遗传学、疾病诊断及生物进化等众多领域具有重要研究意义。随着核酸检测技术的不断发展,单碱基突变检测技术为辅助动植物育种、检测疾病或微生物相关突变位点及指导治疗药物使用提供关键助力。本文综述了几种常见的单碱基突变检测方法,简要介绍了各种方法的原理、优势及局限性,列举了该技术在遗传性状、疾病诊断、病毒检测、食品掺假、动植物育种以及微生物耐药性检测等方面的应用情况。重点描述了基于CRISPR/Cas系统的单碱基突变快速检测策略,依据精准识别靶标类型不同,对该系统在不同领域的应用进行阐述,同时结合无核酸扩增技术进行分析,并对未来单碱基突变检测技术的应用及发展趋势进行了探讨,以期为开发快速且经济的单碱基突变检测技术提供思路。 展开更多
关键词 单碱基突变 快速检测 多场景应用 CRISPR-Cas
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Agrin/Rapsyn对脊髓损伤大鼠小胶质细胞抑炎作用的实验研究 被引量:2
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作者 王晓陆 尹宗生 《华中科技大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第1期60-66,共7页
目的研究聚集蛋白(Agrin)、支架蛋白(Rapsyn)激活α4β2尼古丁乙酰胆碱受体(α4β2 nAChR)抑制SD大鼠的损伤脊髓组织中小胶质细胞与巨噬细胞的炎性作用。方法以4周龄SD大鼠制作脊髓损伤模型,巨噬细胞培养后以Agrin与Rapsyn孵育,流式细... 目的研究聚集蛋白(Agrin)、支架蛋白(Rapsyn)激活α4β2尼古丁乙酰胆碱受体(α4β2 nAChR)抑制SD大鼠的损伤脊髓组织中小胶质细胞与巨噬细胞的炎性作用。方法以4周龄SD大鼠制作脊髓损伤模型,巨噬细胞培养后以Agrin与Rapsyn孵育,流式细胞术检测小胶质细胞与巨噬细胞标记物的变化及免疫共沉淀(Co-IP)检测两种蛋白的互作,慢病毒注射脊髓损伤(SCI)模型后qRT-PCR、免疫组织化学(IHC)检测脊髓组织中炎性细胞标记物的变化。结果脊髓损伤后1~14 d小胶质细胞与巨噬细胞呈增高趋势(均P<0.01),3~7 d增长最快;经qRT-PCR分析得出SCI后炎性小胶质细胞因子(CD68)和可溶性炎性因子(IL-1β和CCL3)上调。经过鞘内注射Agrin和Rapsyn过表达的慢病毒,在0~1周的观察中,A组和R组有轻度减弱这些标记物的上调,而A/R组显著减弱了这些标记的上调(均P<0.01);经IHC分析可见,在A/R组比A组和R组小胶质细胞标记细胞数量明显减少(均P<0.01)。结论SCI后Agrin、Rapsyn激活α4β2 nAChR而产生对小胶质细胞及炎性巨噬细胞的抑制作用,从而可能阻断或减缓脊髓损伤的进展。 展开更多
关键词 脊髓损伤 AGRIN RAPSYN 小胶质细胞 抑炎作用
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假蜜环菌醛酮还原酶AtAKR297克隆表达及对AFB_(1)转化作用 被引量:1
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作者 谢春芳 李菲菲 +1 位作者 蒋天扬 姚冬生 《微生物学通报》 北大核心 2025年第5期2203-2215,共13页
【背景】黄曲霉毒素B_(1)(aflatoxin B_(1),AFB_(1))是迄今为止发现的毒性最强的生物毒素之一,它通过污染花生、玉米、棉花和辣椒等不同作物,对人类和动物健康造成严重威胁。由于醛酮还原酶能够将多种醛酮类物质还原为毒性更小的醇类物... 【背景】黄曲霉毒素B_(1)(aflatoxin B_(1),AFB_(1))是迄今为止发现的毒性最强的生物毒素之一,它通过污染花生、玉米、棉花和辣椒等不同作物,对人类和动物健康造成严重威胁。由于醛酮还原酶能够将多种醛酮类物质还原为毒性更小的醇类物质从而发挥解毒作用,所以推测醛酮还原酶可能具有转化AFB_(1)的可能。【目的】克隆了假蜜环菌(Armillariella tabescens)中的醛酮还原酶AtAKR297,以研究醛酮还原酶AtAKR297对AFB_(1)的转化作用。【方法】使用TRIzol法提取假蜜环菌的总RNA,根据蛋白质谱获取的肽段信息及c DNA末端快速克隆(rapid-amplification of cDNA ends,RACE)技术获取醛酮还原酶AtAKR297基因全长序列;构建醛酮还原酶AtAKR297的表达系统,用亲和层析对蛋白进行纯化,并进行酶活力检测及酶学性质分析。在p H 8.0缓冲体系中,将醛酮还原酶AtAKR297与AFB_(1)反应12 h,用高效液相色谱仪对残余的AFB_(1)进行检测,并用高分辨率液相色谱-质谱仪对转化产物进行鉴定。【结果】成功克隆出假蜜环菌的全长AtAKR297基因,基因长度为894 bp,共编码297个氨基酸;p ET28a(+)-AtAKR297质粒转入大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)宿主菌中,实现诱导表达并对酶学性质进行分析。AtAKR297的最适反应温度为20℃,最适反应p H值为8.0;在15-50℃具有较好的稳定性,孵育30 min酶活可维持60%以上;在pH 5.0-8.0具有较好的稳定性,孵育2 h酶活可维持75%以上。醛酮还原酶AtAKR297与AFB_(1)的相互作用质谱鉴定结果显示AtAKR297能作用于AFB_(1)(依赖NADPH),将AFB_(1)还原为毒性降低的黄曲霉毒醇(aflatoxicol,AFL),该产物分子式为C17H14O6。【结论】成功从假蜜环菌中克隆出醛酮还原酶基因AtAKR297,并构建了具有醛酮还原酶活性的AtAKR297的原核表达系统。AtAKR297在NADPH的存在下能将AFB_(1)还原为毒性降低的AFL。 展开更多
关键词 醛酮还原酶 黄曲霉毒素 转化产物
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基于“桂芯一号”液相芯片的南丹瑶鸡鸡冠性状全基因组关联分析 被引量:1
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作者 杨祝良 罗锦堂 +3 位作者 张珍 黎剑能 李福球 杨秀荣 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第4期1716-1728,共13页
【目的】筛选影响南丹瑶鸡鸡冠性状的候选基因和分子标记,以期为南丹瑶鸡鸡冠性状的选育工作提供技术支撑。【方法】本研究收集了464只南丹瑶鸡在7、10、15、18、22、26周龄的鸡冠表型,同时采集试验鸡血样提取DNA,并通过“桂芯一号”液... 【目的】筛选影响南丹瑶鸡鸡冠性状的候选基因和分子标记,以期为南丹瑶鸡鸡冠性状的选育工作提供技术支撑。【方法】本研究收集了464只南丹瑶鸡在7、10、15、18、22、26周龄的鸡冠表型,同时采集试验鸡血样提取DNA,并通过“桂芯一号”液相芯片进行分型。使用GEMMA软件的单变量混合线性模型对不同周龄南丹瑶鸡鸡冠的高度、长度、厚度和面积进行全基因组关联分析(GWAS)。利用ANNOVAR对关联的单核苷酸多态性(SNP)位点进行注释,并对注释到的基因进行GO功能及KEGG通路富集分析。【结果】南丹瑶鸡鸡冠面积、鸡冠高度、鸡冠长度、鸡冠厚度4个表型指标分别关联到7、8、21和10个SNPs位点,共注释到37个基因,通过相关生物信息学分析及功能注释,最终筛选出7个与南丹瑶鸡鸡冠性状相关的候选基因:CELF2、MAP7、MAP3K5、AKT3、IFNGR1、IL20RA和MANBA。【结论】本研究鉴定了39个与南丹瑶鸡鸡冠性状潜在相关的SNPs,并筛选出7个可能影响鸡冠大小的候选基因。研究结果为南丹瑶鸡鸡冠性状的选育提供了有效分子标记,为培育优良地方品种提供了重要理论基础。 展开更多
关键词 南丹瑶鸡 鸡冠 “桂芯一号”液相芯片 全基因组关联分析
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