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邻苯三酚自氧化法适于测定SOD活性吗? 被引量:8
1
作者 廖展如 陈文学 +3 位作者 艾常春 万平 刘合力 汪明 《华中师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期59-64,共6页
用邻苯三酚自氧化法测定了Cu-ZnSOD(Superoxidedismutase,SOD)及根据天然超氧化物歧化酶活性部位结构设计、合成的一些模型化合物(themodelsofSOD,MSOD)活性.测试结果表明:Cu-ZnSOD和含Cu( )、Fe( )、Mn( 、 )的SOD模型化合物随浓度升高... 用邻苯三酚自氧化法测定了Cu-ZnSOD(Superoxidedismutase,SOD)及根据天然超氧化物歧化酶活性部位结构设计、合成的一些模型化合物(themodelsofSOD,MSOD)活性.测试结果表明:Cu-ZnSOD和含Cu( )、Fe( )、Mn( 、 )的SOD模型化合物随浓度升高,有的对邻苯三酚氧化表现为负抑制(即促进邻苯三酚氧化);另一部分化合物在较低浓度表现为抑制,较高浓度表现为负抑制的交替变化;或抑制率的无规则变化.本文对出现负抑制的内在根源进行了探讨,鉴于邻苯三酚自氧化的复杂反应机理;含Cu( )、Fe( )、Mn( 、 )SOD模型化合物的多酚氧化酶活性和Fenton反应催化活性,及MSOD中金属离子的Lewis酸性,不宜采用邻苯三酚自氧化法测定SOD活性. 展开更多
关键词 SOD 邻苯三酚自氧化法 超氧化物坡化酶 多酚氧化酶 活性检测 酶活性 催化活性
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亚血红素的合成和纯化方法的改进 被引量:12
2
作者 刘亚丽 郭莉莉 +2 位作者 RogerRoeske 罗贵民 李惟 《吉林大学自然科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期91-92,共2页
以血红素为原料 ,用间苯二酚作还原剂 ,将血红素还原为亚血红素 ,并用硅胶柱分离纯化 ,得到纯品亚血红素 .此种分离纯化方法简单 ,快速 ,得到的亚血红素纯度较高 。
关键词 血红素 亚血红素 间苯二酚 硅胶柱 分离纯化 过氧化物酶 合成 TLC检测
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增强辣根过氧化物酶催化鲁米诺化学发光反应的新型增强剂四苯硼钠 被引量:13
3
作者 张文艳 周延秀 +1 位作者 李峰 朱果逸 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1998年第1期100-102,共3页
报道了新型增强剂四苯硼钠对过氧化物酶催化鲁米诺-过氧化氢发光反应的增强作用,建立了流动注射化学发光测定或辣过氧化物酶(HRP)的新体系。用该体系测定HRP线性范围为1.0×10-12×1.2×10-13m... 报道了新型增强剂四苯硼钠对过氧化物酶催化鲁米诺-过氧化氢发光反应的增强作用,建立了流动注射化学发光测定或辣过氧化物酶(HRP)的新体系。用该体系测定HRP线性范围为1.0×10-12×1.2×10-13mol/L;检测限为0.6×10-13mol/L。对0.6×10-13mmol/L的 HRP进行11次平行测定,相对标准偏差为 1. 5%。 展开更多
关键词 化学发光 辣根过氧化物酶 四苯硼钠 HRP 增强剂
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硒代β-环糊精模拟谷胱甘肽过氧化物酶的研究——6-位硒桥联β-环糊精的合成、性质及表征 被引量:24
4
作者 刘俊秋 沈家骢 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1998年第9期1446-1448,共3页
谷胱甘肽过氧化物酶(GPX,Ec1.11.1.9)属抗氧化应激酶系,它以还原型谷胱甘肽为底物,催化还原氢过氧化物[1].它能消除体内自由基,防止脂质过氧化,对治疗和预防克山病、心血管病、炎症及癌症等有明显效果.随着对... 谷胱甘肽过氧化物酶(GPX,Ec1.11.1.9)属抗氧化应激酶系,它以还原型谷胱甘肽为底物,催化还原氢过氧化物[1].它能消除体内自由基,防止脂质过氧化,对治疗和预防克山病、心血管病、炎症及癌症等有明显效果.随着对GPX催化机制及活性部位结构的深入... 展开更多
关键词 环糊精 模拟酶 谷胱甘肽 过氧化物酶 GPX
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猪血过氧化氢酶的纯化及其某些性质研究 被引量:11
5
作者 张尔贤 吴丹奇 +2 位作者 俞丽君 吴涛 曾斌 《药物生物技术》 CAS CSCD 1994年第2期5-8,共4页
本研究采用CM-23及sephadexG-100层析和硫酸铵盐析法纯化了猪血过氧化氢酶。通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测得亚基分子量为55,000daltons,酶蛋白分子量为220,000daltons。该酶紫外吸... 本研究采用CM-23及sephadexG-100层析和硫酸铵盐析法纯化了猪血过氧化氢酶。通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测得亚基分子量为55,000daltons,酶蛋白分子量为220,000daltons。该酶紫外吸收峰为278nm,可见光吸收峰为406nm。 展开更多
关键词 过氧化氢酶 凝胶过滤 紫外吸收光谱 纯化
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一种鉴定过氧化氢酶活性的铁染色法 被引量:28
6
作者 董泗建 刘昌玲 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1996年第1期86-88,共3页
采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)技术,建立了一种新的鉴定过氧化氢酶活性的方法──铁染色法.结果表明,细菌过氧化氢酶及牛肝过氧化氢酶显示单一的酶活性带.该方法操作简单、快速。
关键词 过氧化氢酶 铁染色法 鉴定 方法技术
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微胶囊固定化过氧化氢酶的制取及对H_2O_2的分解作用 被引量:20
7
作者 刘持标 黄葵 +2 位作者 佘益民 单永奎 王玉洁 《生物化学杂志》 CSCD 1997年第4期478-482,共5页
以乙基纤维素为膜材,用溶液干燥法制取了微胶囊固定化过氧化氢酶,探讨了制取过程中明胶的加入对微胶囊产率及固定化过氧化氢酶活性的影响,同时论述了存放时间、温度以及环境pH值对微胶囊固定化过氧化氢酶稳定性的影响.深入研究了... 以乙基纤维素为膜材,用溶液干燥法制取了微胶囊固定化过氧化氢酶,探讨了制取过程中明胶的加入对微胶囊产率及固定化过氧化氢酶活性的影响,同时论述了存放时间、温度以及环境pH值对微胶囊固定化过氧化氢酶稳定性的影响.深入研究了微胶囊固定化过氧化氢酶对H2O2的分解作用。 展开更多
关键词 微胶囊 过氧化氢酶 过氧化氢 分解
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牦牛血超氧化物歧化酶电泳多谱带现象研究 被引量:6
8
作者 唐双焱 邹国林 金建明 《动物学报》 SCIE CAS CSCD 2000年第4期422-430,共9页
采用聚丙烯酰胺凝胶电泳、SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳、线性梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳、制备电泳、等电聚焦电泳以及不同试剂处理等多种方法对牦牛血铜锌超氧化物歧化酶电泳多谱带现象进行了研究。结果表明在不同的实验条件下 ,各带会发生相... 采用聚丙烯酰胺凝胶电泳、SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳、线性梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳、制备电泳、等电聚焦电泳以及不同试剂处理等多种方法对牦牛血铜锌超氧化物歧化酶电泳多谱带现象进行了研究。结果表明在不同的实验条件下 ,各带会发生相互转化。 展开更多
关键词 牦牛血红细胞 超氧化物歧化酶 电泳图谱 多谱带 聚合 构象异构体
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辣根过氧化物酶的分离制备和纯化 被引量:5
9
作者 范军 李纯 +2 位作者 稽跃琴 程备久 蒋立科 《安徽农业大学学报》 CAS CSCD 1998年第3期313-316,共4页
从辣根块茎分离和纯化了辣根过氧化物酶(HRP),纯化程序包括匀浆、加热、硫酸铵分级沉淀、丙酮分级沉淀和CM-23阴离子交换层析。纯化的HRP的K4值为2.5×105,RZ值是3.00,酶的比活406U/mg蛋白。... 从辣根块茎分离和纯化了辣根过氧化物酶(HRP),纯化程序包括匀浆、加热、硫酸铵分级沉淀、丙酮分级沉淀和CM-23阴离子交换层析。纯化的HRP的K4值为2.5×105,RZ值是3.00,酶的比活406U/mg蛋白。它的SDS-PAGE显示一条带,酶亚基分子量为40KD,等电聚焦电泳呈现三条带,酶活性染色呈现多条带,表明有同工酶存在。对酶的分离纯化作了一些改进,如加氨水保持pH值,加入5mmol/L的硫酸铁溶液,改变洗脱缓冲液的成分等。 展开更多
关键词 辣根过氧化物酶 分离 制备 纯化
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联苯胺-H_2O_2-HRP偶合反应伏安酶联免疫分析新体系测定HRP的研究 被引量:5
10
作者 牛淑妍 焦奎 苏贻勋 《分析试验室》 CAS CSCD 1998年第3期12-15,共4页
提出了联苯胺-H2O2-HRP偶合反应伏安酶联免疫分析新体系测定HRP的方法。通过测定HRP催化H2O2氧化联苯胺的产物间接测定HRP的浓度。偶合反应产物在pH5.2的BR支持电解质中,在-0.62V(SCE)附近产... 提出了联苯胺-H2O2-HRP偶合反应伏安酶联免疫分析新体系测定HRP的方法。通过测定HRP催化H2O2氧化联苯胺的产物间接测定HRP的浓度。偶合反应产物在pH5.2的BR支持电解质中,在-0.62V(SCE)附近产生一灵敏的极谱波,在选定的最佳条件下,测定HRP的线性范围是5.0×10-8~1.0×10-4g/L,检出限可达7.2×10-9g/L。用于测定游离的HRP和HRP的标记物,灵敏度都比经典的ELISA法高。 展开更多
关键词 辣根过氧化物酶 HRP 免疫分析 测定 分析
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化学修饰单克隆抗体模拟谷胱甘肽过氧化物酶 被引量:2
11
作者 丁兰 朱振齐 +4 位作者 罗贵民 邢辉 刘仔 杨同书 沈家骢 《生物化学杂志》 CAS CSCD 1996年第5期553-558,共6页
化学修饰具有底物谷胱甘肽(GSH)结合部位的单克隆抗体(4A4),使其结合部位上的丝氨酸(Ser)转变成谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)的催化基团硒代半胱氨酸(Se-Cys),因而产生高活力的含硒抗体酶(Se-abzym... 化学修饰具有底物谷胱甘肽(GSH)结合部位的单克隆抗体(4A4),使其结合部位上的丝氨酸(Ser)转变成谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)的催化基团硒代半胱氨酸(Se-Cys),因而产生高活力的含硒抗体酶(Se-abzyme).突变的4A4(m4A4)的GPX活力达到了天然酶活力的19%,并对m4A4的酶学性质和动力学性质进行了研究;硒代谷胱甘肽(GSeH)连到4A4结合部位,其GPX活力由3.86U/μmol提高到598.9U/μmol用黄嘌呤氧化酶/次黄嘌呤为中心的心肌线粒体自由基损伤模型证明Se-abzyme(m4A4)可减轻活性氧对线粒体的损伤。 展开更多
关键词 谷胱甘肽 过氧化物酶 化学修饰 单克隆抗体
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人肝谷胱甘肽过氧化物酶纯化及性质研究 被引量:5
12
作者 徐蘅 裘奇 +1 位作者 胡梅清 魏涌 《生物化学杂志》 CSCD 1995年第2期210-213,共4页
经硫酸铵分级沉淀,离子交换层析和凝胶过滤等步骤,从人肝中获得了PAGE单一条带的谷胱甘肽过氧化物酶,比活提高120倍,得率为25%。凝胶过滤法测得分子量为90980,SDS-PAGE测定亚基分子量为22423.原子吸... 经硫酸铵分级沉淀,离子交换层析和凝胶过滤等步骤,从人肝中获得了PAGE单一条带的谷胱甘肽过氧化物酶,比活提高120倍,得率为25%。凝胶过滤法测得分子量为90980,SDS-PAGE测定亚基分子量为22423.原子吸收法测得每分子酶含有四个硒原子。等电聚焦显示该酶等电点为5.0.酶活力的最适pH为8.5,最适温度为37℃。动力学实验提示该酶作用机理属于乒乓机制型。 展开更多
关键词 谷胱甘肽 过氧化物酶 性质 提纯
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木素过氧化物酶合成的部分影响因素 被引量:6
13
作者 丁佐龙 邢邦启 《合肥工业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 1998年第6期131-134,共4页
研究了黄孢原毛平革菌(Phanerochaetechrysosporium)在以0.4%微晶纤维素为碳源、20mMNH+4氮源的富碳富氮液体振荡培养条件下,木素过氧化物酶与起始pH值、诱导剂、孢子年龄、添加吐温及碳源... 研究了黄孢原毛平革菌(Phanerochaetechrysosporium)在以0.4%微晶纤维素为碳源、20mMNH+4氮源的富碳富氮液体振荡培养条件下,木素过氧化物酶与起始pH值、诱导剂、孢子年龄、添加吐温及碳源设置的关系。试验结果显示,起始pH值6.0所得酶活最高,黎芦醇诱导效果明显。添加吐温、少量单糖可明显提高酶产量。 展开更多
关键词 黄孢原毛平革菌 木素过氧化物酶 合成
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乙基纤维素微胶囊对过氧化氢酶固定化的研究 被引量:5
14
作者 王玉洁 刘持标 +3 位作者 白光月 褚莹 吴子生 张河哲 《生物化学杂志》 CSCD 1995年第2期201-204,共4页
以乙基纤维素作膜材,用液中干燥法使过氧化氢酶微胶囊化。研究了微胶囊化操作条件对酶活性的影响。通过测定微胶囊化酶的释放曲线,证明微胶囊膜对过氧化氢酶具有较好的固定性能力。固定化酶用于催化底物过氧化氢分解,测定米氏常数为... 以乙基纤维素作膜材,用液中干燥法使过氧化氢酶微胶囊化。研究了微胶囊化操作条件对酶活性的影响。通过测定微胶囊化酶的释放曲线,证明微胶囊膜对过氧化氢酶具有较好的固定性能力。固定化酶用于催化底物过氧化氢分解,测定米氏常数为0.55mol/L。 展开更多
关键词 微胶囊 过氧化氢酶 固定化酶
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具有谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)活力的抗体酶研究──单克隆抗体的制备及化学诱变 被引量:2
15
作者 刘子 朱振奇 +4 位作者 丁兰 冯书章 罗贵民 杨同书 沈家骢 《细胞与分子免疫学杂志》 CSCD 1996年第3期30-33,共4页
将2,4-二硝基氯苯(DNCB)专一地与底物谷胱甘肽(GSH)巯基反应,合成了半抗原GSH-S-DNP;通过蛋白质连接技术(戊二醛法)将此半抗原偶联到牛血清白蛋白(BSA)上,制备出全抗原。用吸收光谱测得每个BSA分... 将2,4-二硝基氯苯(DNCB)专一地与底物谷胱甘肽(GSH)巯基反应,合成了半抗原GSH-S-DNP;通过蛋白质连接技术(戊二醛法)将此半抗原偶联到牛血清白蛋白(BSA)上,制备出全抗原。用吸收光谱测得每个BSA分子上平均连接33个半抗原。用全抗原免疫BALB/c小鼠,通过淋巴细胞杂交瘤技术,制备出抗GSH的单克隆抗体杂交瘤细胞系4A4、6A6、1C8和4G3等。将其中的4A4培养上清经50%(NH4)2SO4沉淀、DEAE-52纤维素离子交换柱层析和BiogelP-200凝胶过滤分离得到4A4IgG抗体,经SDS-PAGE检验纯度大于90%。4A4IgG可变区中的丝氨酸(Ser)经苯甲基磺酰氟(PMSF)活化,再用硒化氢(H2Se)处理,则Ser转变成硒代半胱氨酸(SeCys),使4A4IgG引入该催化基因。化学诱变后的4A4IgG具有谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)活性,其活力是世界上最好的GPX模拟物PZ51的1100倍,是游离SeCys的2.2×104倍,已达到天然酶活力的数量级水平。经初步应用,该抗体酶可防止自由基对心肌线粒体的损伤。 展开更多
关键词 单克隆抗体 化学诱变 谷胱甘肽 过氧化物酶
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大鼠肝细胞过氧化物酶体的提取 被引量:2
16
作者 骆子生 王敏彦 姜玲玲 《氨基酸和生物资源》 CAS 2000年第1期20-22,共3页
:采用蔗糖密度梯度离心法 ( 950 0 0× g,2 h)提取大鼠肝细胞过氧化物酶体 ,所得过氧化物酶体形态完整 ,纯度与肝匀浆相比提高了 2 6倍 ,仅有少量 ( 0 .5%~ 0 .9%)的微粒体和线粒体污染 ,回收率为 1 2 %。为研究过氧化物酶体提供... :采用蔗糖密度梯度离心法 ( 950 0 0× g,2 h)提取大鼠肝细胞过氧化物酶体 ,所得过氧化物酶体形态完整 ,纯度与肝匀浆相比提高了 2 6倍 ,仅有少量 ( 0 .5%~ 0 .9%)的微粒体和线粒体污染 ,回收率为 1 2 %。为研究过氧化物酶体提供了有效的分离方法。此法还可将过氧化物酶体、微粒体、线粒体同时进行分离。 展开更多
关键词 过氧化物酶体 提取 蔗糖密度梯度离心法
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新鲜蚕豆超氧化物歧化酶的分离纯化 被引量:5
17
作者 王惠珍 程牛亮 +1 位作者 郑国平 牛勃 《山西医学院学报》 1996年第2期92-93,共2页
将本地产新鲜蚕豆用组织捣碎机打成匀浆,采用冷丙酮分段沉淀,SephacrylS-200层析,分离纯化出一种超氧化物歧化酶(superoxidedismutaes,SOD),经聚丙烯酰胺凝胶电泳呈现一条区带,该酶的比活... 将本地产新鲜蚕豆用组织捣碎机打成匀浆,采用冷丙酮分段沉淀,SephacrylS-200层析,分离纯化出一种超氧化物歧化酶(superoxidedismutaes,SOD),经聚丙烯酰胺凝胶电泳呈现一条区带,该酶的比活304.1(U/mg蛋白),活力回收33.4%,提纯倍数23. 展开更多
关键词 蚕豆 超氧化物歧化酶类 色谱法
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鸡蛋中超氧化物歧化酶的分离与提纯 被引量:1
18
作者 程涛 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 1999年第9期25-28,共4页
鸡蛋中的超氧化物歧化酶(SOD)可以抑制氮蓝四唑(NBT)的光化还原,可以根据SOD对NBT光化还原的抑制作为酶活性的定量测定。鸡蛋中的SOD活性均可被H2O2抑制,表明鸡蛋中提纯的SOD为CuZn-SOD。蛋清、蛋黄的精提液、透析液、过柱液经... 鸡蛋中的超氧化物歧化酶(SOD)可以抑制氮蓝四唑(NBT)的光化还原,可以根据SOD对NBT光化还原的抑制作为酶活性的定量测定。鸡蛋中的SOD活性均可被H2O2抑制,表明鸡蛋中提纯的SOD为CuZn-SOD。蛋清、蛋黄的精提液、透析液、过柱液经聚丙烯酸胺凝胶电泳及NBT酶活性染色,在蓝色背景上有相似的但有区别的无色透明同工酶谱带。经光谱分析波长图谱显示,蛋清SOD最大吸收波长在可见光区为620nm处,紫外光区为274nm处,蛋黄SOD最大吸收波长在可见区为610nm处,紫外光区为280nm处。 展开更多
关键词 鸡蛋 SOD 超氧化物歧化酶 分离 提纯
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羊血铜锌超氧化物歧化酶的提取 被引量:6
19
作者 姚澍晖 李辉 《宁夏农林科技》 2000年第4期33-34,共2页
用低浓度氯化钠与羊血浆匀浆 ,采用 75℃加热 ,硫酸铵分级沉淀、透析 ,柱层析等方法 ,从羊血中提取铜锌超氧化物歧化酶 (Cu·Zn -SOD) ,其比活性为 4 6 32U/mgpr,紫外吸收峰在 2 6 0nm。实验还表明 ,硫酸钾缓冲液浓度对Cu·Zn -... 用低浓度氯化钠与羊血浆匀浆 ,采用 75℃加热 ,硫酸铵分级沉淀、透析 ,柱层析等方法 ,从羊血中提取铜锌超氧化物歧化酶 (Cu·Zn -SOD) ,其比活性为 4 6 32U/mgpr,紫外吸收峰在 2 6 0nm。实验还表明 ,硫酸钾缓冲液浓度对Cu·Zn -SOD活性有显著影响。 展开更多
关键词 铜锌超氧化物歧化酶 羊血 提取
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红细胞过氧化氢酶测定的改良法 被引量:2
20
作者 沈望珍 郭建清 张玉林 《新疆医学院学报》 1991年第2期105-107,共3页
过氧化氢酶广泛存在于动植物组织中,其主要作用是分解过氧化氢。作者对Sinha过氧化氢酶测定法进行了改良,建立了红细胞过氧化氢酶活性测定法。该法具有显色稳定、重复性好、简便、快速等优点。
关键词 红细胞 过氧化氢酶 分光光度法
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