人参果多酚氧化酶的酶学特性及纯化 被引量：3

1

作者 祁立波 褚津 +2 位作者 郑皎皎 姜鹏飞 朱蓓薇 《大连工业大学学报》 CAS 北大核心 2013年第6期391-394,共4页

以邻苯二酚为底物，采用分光光度法测定了人参果果肉多酚氧化酶的活性，研究了温度、pH对其活性的影响，并建立了酶促褐变反应动力学方程。人参果果肉多酚氧化酶的最适反应pH为6．8，最适反应温度为30℃；在pH6．4～7．2、20～40℃酶活... 以邻苯二酚为底物，采用分光光度法测定了人参果果肉多酚氧化酶的活性，研究了温度、pH对其活性的影响，并建立了酶促褐变反应动力学方程。人参果果肉多酚氧化酶的最适反应pH为6．8，最适反应温度为30℃；在pH6．4～7．2、20～40℃酶活力比较稳定；其酶促褐变反应动力学方程为V=2ooo[S]／（4．4＋Es]）。分别采用丙酮沉淀法和硫酸铵沉淀法对人参果果肉多酚氧化酶进行初步纯化结果表明，丙酮和硫酸铵均在饱和度为50％时对人参果果肉多酚氧化酶的纯化效果最好。丙酮沉淀法的纯化倍数为3．49，得率为2．26％，硫酸铵沉淀法的纯化倍数为4．26，得率为8．92％。 展开更多

关键词 人参果 多酚氧化酶 酶学特性 纯化

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乙醇对聚半乳糖醛酸酶的活力及荧光光谱、CD光谱的影响 被引量：4

2

作者 张应玖 李爽 +1 位作者 吴柏南 刘兰英 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第2期85-87,共3页

乙醇对PG短时间（不超过36h）的作用可使PG激活，最佳的作用时间是24h，否则乙醇导致PG失活。同时测得乙醇的浓度直接影响PG的活力。在作用时间为24h时，在20％乙醇浓度下，酶的活力最高。乙醇的作用时间及其浓度均影响PG的荧光光谱和C... 乙醇对PG短时间（不超过36h）的作用可使PG激活，最佳的作用时间是24h，否则乙醇导致PG失活。同时测得乙醇的浓度直接影响PG的活力。在作用时间为24h时，在20％乙醇浓度下，酶的活力最高。乙醇的作用时间及其浓度均影响PG的荧光光谱和CD光谱。这些光谱的变化与酶的活力变化显示了一致性。 展开更多

关键词 乙醇 聚半乳糖醛酸酶 活力 光谱

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丙酮酸羧化酶在胃腺癌中的表达及临床意义 被引量：2

3

作者 康建琴 汤善宏 +4 位作者 赵国宏 徐光辉 王飙落 梁树辉 丁杰 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期85-88,共4页

目的检测丙酮酸羧化酶(PC)在胃腺癌组织中的表达并分析其临床意义。方法应用免疫组织化学方法及Westernblot法检测PC蛋白在胃腺癌及其对应癌旁组织的表达情况,分析其在肿瘤中表达水平与患者年龄、性别、TNM分期及病理分级等临床病理资... 目的检测丙酮酸羧化酶(PC)在胃腺癌组织中的表达并分析其临床意义。方法应用免疫组织化学方法及Westernblot法检测PC蛋白在胃腺癌及其对应癌旁组织的表达情况,分析其在肿瘤中表达水平与患者年龄、性别、TNM分期及病理分级等临床病理资料之间的关系,并用Western blot法检测PC蛋白在不同分化胃癌细胞系及永生化胃黏膜上皮细胞系的表达情况。结果免疫组化及Western blot法均显示PC在胃腺癌组织表达水平显著高于其对应癌旁组织(P<0.01)。PC高表达与患者TNM分期及病理分级显著相关(P<0.05),而与患者性别、年龄无明显相关性(P>0.05)。Western blot法显示PC在不同分化胃癌细胞系表达水平显著高于永生化胃黏膜上皮细胞(P<0.01)。结论 PC高表达与肿瘤的恶性进展密切相关,提示PC有可能作为胃癌生物治疗的潜在靶点。 展开更多

关键词 丙酮酸羧化酶 胃腺癌 免疫组织化学 WESTERN BLOT TNM分期

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苏尼替尼对HeLa细胞增殖及3-磷酸甘油醛脱氢酶表达和活性的影响 被引量：1

4

作者 展瑞岩 杨红 +4 位作者 张元新 葛雅琨 李世军 施维 郑昆 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2013年第3期385-387,共3页

目的探讨苏尼替尼(Sutent)对HeLa细胞增殖及3-磷酸甘油醛脱氢酶(Glyceraldehyde-3-phosphate dehydro-genase,GAPDH)表达和活性的影响。方法用不同浓度的Sutent作用于HeLa细胞,采用MTT法检测Sutent对HeLa细胞增殖活力的影响;Western blo... 目的探讨苏尼替尼(Sutent)对HeLa细胞增殖及3-磷酸甘油醛脱氢酶(Glyceraldehyde-3-phosphate dehydro-genase,GAPDH)表达和活性的影响。方法用不同浓度的Sutent作用于HeLa细胞,采用MTT法检测Sutent对HeLa细胞增殖活力的影响;Western blot检测HeLa细胞中GAPDH蛋白表达的变化;GENMED细胞GAPDH活性终点比色法定量检测了GAPDH的活力。结果经Sutent处理24 h后,HeLa细胞的增殖受到明显抑制,且呈浓度依赖性,半数抑制浓度(IC50)为10.283μmol/L;Sutent可明显降低HeLa细胞中GAPDH蛋白的表达量,并能直接抑制GAPDH的活力。结论 Sutent可抑制HeLa细胞的增殖,降低GAPDH蛋白的表达量及活力,显示了其作为多靶点药物的重要研究价值。 展开更多

关键词 苏尼替尼 HeLo细胞 细胞增殖 3-磷酸甘油醛脱氢酶 酶活力

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醛酮还原酶及其在不对称合成手性醇中的应用 被引量：2

5

作者 李凌凌 吕早生 +3 位作者 吴敏 袁向利 关海燕 张敏 《化学与生物工程》 CAS 2009年第11期62-67,90,共7页

醛酮还原酶是氧化还原酶家族成员之一,能对很多羰基底物进行氧化还原。综述了醛酮还原酶家族的命名、结构、保守氨基酸序列、催化机制、结合辅酶方式和结合底物的特异性;阐述了醛酮还原酶生理作用的研究方法;介绍了醛酮还原酶在手性醇... 醛酮还原酶是氧化还原酶家族成员之一,能对很多羰基底物进行氧化还原。综述了醛酮还原酶家族的命名、结构、保守氨基酸序列、催化机制、结合辅酶方式和结合底物的特异性;阐述了醛酮还原酶生理作用的研究方法;介绍了醛酮还原酶在手性醇合成方面的应用。 展开更多

关键词 醛酮还原酶家族 辅酶 底物特异性 手性醇 不对称合成

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磁场影响葡萄糖氧化酶活性的研究 被引量：6

6

作者 颜流水 魏洽 +3 位作者 史蓉蓉 张平 朱元保 何双娥 《南昌航空工业学院学报》 CAS 1996年第2期10-15,共6页

以尼龙网作载体，用戊二醛交联将葡萄糖氧化酶（ＧＯＤ）固定装成酶柱并联结于流动体系中，采用流动注射分光光度法研究磁场对固定化ＧＯＤ催化活性的影响。结果表明，在０℃、５℃、４５℃下以１．０×１０－２ｍｏｌ·Ｌ－１... 以尼龙网作载体，用戊二醛交联将葡萄糖氧化酶（ＧＯＤ）固定装成酶柱并联结于流动体系中，采用流动注射分光光度法研究磁场对固定化ＧＯＤ催化活性的影响。结果表明，在０℃、５℃、４５℃下以１．０×１０－２ｍｏｌ·Ｌ－１的葡萄糖为底物及５５℃下以０．１ｍｏｌ·Ｌ－１的葡萄糖为底物时，０．２２Ｔ静磁场能显著提高固定化ＧＯＤ的反应速度，且磁场效应与底物浓度及磁场作用时间有关。用动力学方法考察了不同强度的磁场对溶解ＧＯＤ反应进程的影响，未发现磁场效应。 展开更多

关键词 葡萄糖 氧化酶 磁场效应

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细菌3-脱氧葡糖醛酮代谢酶的纯化及性质研究 被引量：1

7

作者 梁智群 粟桂娇 +2 位作者 李湘萍 莫柏立 梁静娟 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2000年第2期192-196,共5页

细菌Bacillussp 2粗酶液通过 (NH4 ) 2 SO4 分级分离、QSepharoseFF、SephadexG 10 0 (Ⅰ )、Hydroxyapatite和SephadexG 10 0 (Ⅱ )柱层析分离 ,纯化了一种以NADPH为辅酶的 3 脱氧葡糖醛酮 (3 DG)代谢酶 ,定性为2 羰基醛还原酶 .纯化... 细菌Bacillussp 2粗酶液通过 (NH4 ) 2 SO4 分级分离、QSepharoseFF、SephadexG 10 0 (Ⅰ )、Hydroxyapatite和SephadexG 10 0 (Ⅱ )柱层析分离 ,纯化了一种以NADPH为辅酶的 3 脱氧葡糖醛酮 (3 DG)代谢酶 ,定性为2 羰基醛还原酶 .纯化酶的比活力为 6 3 75U/mg ,在SDS 聚丙烯酰胺凝胶上显示一条蛋白质带 .该酶分子质量约为 32ku ,酶反应最适 pH约为 6 2 ,在 pH 5～ 8,温度 2 5～ 30℃之间酶保持稳定 ;该酶对 3 DG的Km 为2 3mmol/L .添加适量的EDTA、巯基乙醇或二硫苏糖醇能明显提高酶的活性 ;而碘乙酸、N 展开更多

关键词 美拉德反应 3-脱氧葡糖醛酮 2-羰基醛还原酶

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一氧化氮合酶及其调节 被引量：4

8

作者 于宝生 《国外医学（生理病理科学与临床分册）》 北大核心 1996年第4期220-222,共3页

一氧化氮合酶（ＮＯＳ）包括内皮细胞性、神经原性和诱生性三种，其基因分别位于人第７、１２和１７号染色体上。ＮＯＳ是高度保守性蛋白，种属间同一ＮＯＳ的氨基酸同源性大于８０％，但不同ＮＯＳ间仅５０％左右。业已证明ＮＯＳ是非... 一氧化氮合酶（ＮＯＳ）包括内皮细胞性、神经原性和诱生性三种，其基因分别位于人第７、１２和１７号染色体上。ＮＯＳ是高度保守性蛋白，种属间同一ＮＯＳ的氨基酸同源性大于８０％，但不同ＮＯＳ间仅５０％左右。业已证明ＮＯＳ是非均一性酶，同一酶可存在于不同细胞，而一种细胞可有一种以上的酶。ＮＯＳ的活性受基因转录、翻译、翻译后修饰等多环节调控。 展开更多

关键词 一氧化氮 一氧化氮合酶 氧化还原酶

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高山花椰菜多酚氧化酶活性影响因素的研究 被引量：1

9

作者 赵玉宏 《湖北民族学院学报（自然科学版）》 CAS 2006年第4期328-330,共3页

研究了几种还原剂对高山花椰菜多酚氧化酶(PPO)活性的影响.结果表明:150 mg/L的L-半胱氨酸、200 mg/L的抗坏血酸、150mg/L的亚硫酸钠可分别抑制PPO活性的91.7%、79.2%和83.2%,其中L-半胱氨酸是对PPO抑制效果最好的还原剂,L-半胱氨酸的... 研究了几种还原剂对高山花椰菜多酚氧化酶(PPO)活性的影响.结果表明:150 mg/L的L-半胱氨酸、200 mg/L的抗坏血酸、150mg/L的亚硫酸钠可分别抑制PPO活性的91.7%、79.2%和83.2%,其中L-半胱氨酸是对PPO抑制效果最好的还原剂,L-半胱氨酸的添加量应以500mg/L为宜. 展开更多

关键词 花椰菜 多酚氧化酶活性 还原剂

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丙酮酸氧化酶激活机制的研究——α-肽与磷脂囊的结合 被引量：1

10

作者 张庭芳 L.P.Hager 《生物化学杂志》 CSCD 1990年第1期52-56,共5页

丙酮酸氧化酶既能被两性脂类激活,也能被蛋白酶从羧基端切下一个23肽(称α-肽)激活,而且这两种激活方式相互排斥。本文用分离纯化的α-肽,通过测定色氨酸荧光能量转移的方法,证明α-肽能与磷脂囊(vesicle)结合。我们选用两种不同类型的... 丙酮酸氧化酶既能被两性脂类激活,也能被蛋白酶从羧基端切下一个23肽(称α-肽)激活,而且这两种激活方式相互排斥。本文用分离纯化的α-肽,通过测定色氨酸荧光能量转移的方法,证明α-肽能与磷脂囊(vesicle)结合。我们选用两种不同类型的荧光探针,发现α-肽对它们表现不同的色氨酸能量转移效率。α-肽对Dan-syl-DPPE为7.4±1.0％对Dansyl-UAPC为12.5±2.0％。由此推测α-肽的色氨酸残基易与磷脂双层内部疏水区结合,说明α-肽是一种较为疏水的肽。我们推测α-肽在这种外膜酶的激活过程中,提供了与膜结合的部位,在生理过程中起着重要作用。 展开更多

关键词 丙酮酸氧化酶 α-肽 磷脂囊

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人G6PD在大肠埃希菌中的表达及体外抑制剂筛选模型的建立

11

作者 金科华 游云悠 +4 位作者 魏友煜 左越 柯志强 尧青 刘洁 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2022年第8期1289-1293,共5页

目的表达人6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G6PD)并建立其体外抑制剂筛选模型。方法设计一对5′端分别带NdeⅠ、XhoⅠ位点的引物,PCR扩增G6PD cDNA。将cDNA和质粒pET-28a经NdeⅠ+XhoⅠ酶切后连接,连接产物转化大肠杆菌Top10。将鉴定的重组质粒转化... 目的表达人6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G6PD)并建立其体外抑制剂筛选模型。方法设计一对5′端分别带NdeⅠ、XhoⅠ位点的引物,PCR扩增G6PD cDNA。将cDNA和质粒pET-28a经NdeⅠ+XhoⅠ酶切后连接,连接产物转化大肠杆菌Top10。将鉴定的重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),用0.4 mmol/L IPTG诱导G6PD表达,镍离子亲和层析柱纯化G6PD。以6-磷酸葡萄糖(G6P)和烟酰胺腺嘌呤核苷二磷酸(NADP+)为G6PD的底物和辅因子,检测340 nm波长处光吸收值(A_(340))的变化,确定G6PD及其抑制剂脱氢表雄酮(DHEA)的最佳浓度,计算模型的可靠性指数—Z′因子。结果构建了重组质粒pET-28a-G6PD,重组菌BL21(DE3)-pET-28a-G6PD经IPTG诱导后,可溶性G6PD表达量为2.5 mg/L,G6PD、DHEA的最适浓度分别为900μg/L、20μmol/L,筛选模型的Z′因子为0.88。结论在大肠杆菌中表达了有活性的G6PD,建立了可靠的体外抑制剂筛选模型。 展开更多

关键词 6-磷酸葡萄糖脱氢酶 抑制剂 筛选模型

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人胎盘醛还原酶的动力学和热力学性质

12

作者 宋惠萍 《湖南医科大学学报》 CSCD 1989年第1期1-5,共5页

本实验条件下,醛还原酶的最适反应温度为40℃。在25—45℃范围内,K_(iNADPH)随温度上升而增大,K_(mD-)葡萄糖醛酸(K_(mD-Glu))随温度上升而减小,25℃时K_(mNADPH)值最小,反应的活化能为4521±653Cal/mol。温度越高,Alr1的ΔG~≠越大... 本实验条件下,醛还原酶的最适反应温度为40℃。在25—45℃范围内,K_(iNADPH)随温度上升而增大,K_(mD-)葡萄糖醛酸(K_(mD-Glu))随温度上升而减小,25℃时K_(mNADPH)值最小,反应的活化能为4521±653Cal/mol。温度越高,Alr1的ΔG~≠越大,约3/4的ΔG~≠用以维持过渡态酶一底物复合物的空间构象,以增加分子的有序程度。 展开更多

关键词 醛氧化还原酶 热力学 胎盘

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磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶的光调节

13

作者 马力耕 《河北师范大学学报（自然科学版）》 CAS 1996年第2期94-98,共5页

就光对磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶的光调节作用做一综述。

关键词 PEP羧化酶 光调节

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醛酮还原酶AKR1C3基因的原核表达及其生物学活性 被引量：3

14

作者 牛莹莹 刘传志 +4 位作者 李艳红 陈元安 杨惠宇 武成 于源华 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2015年第5期461-467,共7页

目的原核表达醛酮还原酶AKR1C3基因,并探讨其生物学活性。方法经人工合成醛酮还原酶AKR1C3基因,克隆至质粒p ET-15b中,构建重组表达质粒p ET-15b-AKR1C3,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,表达产物经亲和层析镍柱纯化。采用荧光分光... 目的原核表达醛酮还原酶AKR1C3基因,并探讨其生物学活性。方法经人工合成醛酮还原酶AKR1C3基因,克隆至质粒p ET-15b中,构建重组表达质粒p ET-15b-AKR1C3,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,表达产物经亲和层析镍柱纯化。采用荧光分光法检测酶活性,确定AKR1C3的最适底物,并检测金属离子对酶活的影响。用纯化蛋白分别免疫BALB/c小鼠和新西兰大耳白兔,ELISA法检测动物血清中抗体水平,并对免疫后的兔进行血常规和生化检验,对兔和小鼠进行病理学检查。采用MTT法进行细胞毒理试验。结果重组质粒p ET-15b-AKR1C3经双酶切及PCR鉴定证明构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约36 000,可溶性蛋白占菌体总蛋白的27%,纯化后纯度达95%以上。睾丸酮为AKR1C3最适底物,酶活为100.086 U;金属离子Cu2+、K+可提高AKR1C3酶活;小鼠血清中最高效价为5×104,兔血清中最高效价为6.25×104。AKR1C3对动物肝、肾等器官均有损害。AKR1C3对癌细胞生长抑制作用低于正常细胞。结论醛酮还原酶AKR1C3在E.coli BL21(DE3)中成功表达,并获得高纯度、高活性的酶,对细胞生长有抑制作用,对动物肝、肾等器官均有损害,为诊断及治疗多种癌症提供实验依据。 展开更多

关键词 醛酮还原酶AKR1C3 原核细胞 基因表达 生物学活性

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大肠杆菌中1,3-丙二醇氧化还原酶的表达与纯化 被引量：3

15

作者 刘海平 郝健 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期19-23,共5页

目的:在大肠杆菌中表达1,3-丙二醇氧化还原酶(PDOR),并对PDOR进行纯化。方法:从克雷伯氏肺炎杆菌(Kleb-siella pneumoniae)基因组中,克隆PDOR基因dhaT。构建表达载体pDK-dhaT,在E.coli DH5α中利用IPTG诱导进行表达。细胞裂解液利用硫... 目的:在大肠杆菌中表达1,3-丙二醇氧化还原酶(PDOR),并对PDOR进行纯化。方法:从克雷伯氏肺炎杆菌(Kleb-siella pneumoniae)基因组中,克隆PDOR基因dhaT。构建表达载体pDK-dhaT,在E.coli DH5α中利用IPTG诱导进行表达。细胞裂解液利用硫酸铵盐析、Sephadex G-200凝胶层析和DE23 Cellulose阴离子交换层析,进行酶蛋白分离提纯。结果:用SDS-PAGE分析表明胞内PDOR占可溶性蛋白的39.8%,酶活为14.5U/ml。纯化后酶液比酶活提高3.94倍,回收率为15.5%。结论:成功地构建了PDOR高效表达载体,并且得到了高纯度的PDOR。 展开更多

关键词 1 3-丙二醇氧化还原酶 克隆 表达 纯化

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醛糖还原酶抑制剂对糖尿病大鼠肾小球蛋白激酶C活性的影响

16

作者 杨君 《海军总医院学报》 2003年第1期11-13,共3页

目的探讨醛糖还原酶抑制剂Sorbinil对糖尿病大鼠肾小球蛋白激酶C活性的影响。方法 采用腹腔内注射链脲菌素法制作糖尿病大鼠模型,将大鼠分为模型组、Sorbinil组、格列喹酮+苯那普利组和正常对照组。8周后处死大鼠,分离肾小球,分别测定... 目的探讨醛糖还原酶抑制剂Sorbinil对糖尿病大鼠肾小球蛋白激酶C活性的影响。方法 采用腹腔内注射链脲菌素法制作糖尿病大鼠模型,将大鼠分为模型组、Sorbinil组、格列喹酮+苯那普利组和正常对照组。8周后处死大鼠,分离肾小球,分别测定各组肾小球细胞浆和细胞膜蛋白激酶C活性。结果糠尿病模型组细胞浆蛋白激酶C活性显著降低,细胞膜蛋白激酶C活性显著升高。用两组西药治疗后,苯那普利+格列奎酮组无明显改善,而Sorbinil组可显著提高细胞浆蛋白激酶C活性、降低细胞膜蛋白激酶C活性。结论Sorbinil可通过改善多元醇代谢而降低蛋白激酶C活性,同时,亦或存在其他途径如直接对蛋白激酶C的抑制作用等等。Sorbinil通过调节多元醇代谢等途径间接或直接降低蛋白激酶C活性,是其治疗糖尿病肾病的作用机理之一。 展开更多

关键词 Sorbinil 蛋白激酶C 糖尿病肾病

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一氧化氮的发现引起的思考——评1998年诺贝尔医学奖 被引量：2

17

作者 杨挚鹰 禹宽平 《医学与哲学》 1999年第2期34-35,共2页

１９９８年１０月１２日上午１１点３０分（中欧时间）Ｋａｒｏｌｉｎｓｋａ医学院的诺贝尔委员会宣布将本年度的诺贝尔生理学或医学奖分别授予三位药理学家：纽约州立大学ＳＵＮＹ健康科学中心的荣休教授ＲｏｂｅｒｔＦ．Ｆｕｒｃｈｇ... １９９８年１０月１２日上午１１点３０分（中欧时间）Ｋａｒｏｌｉｎｓｋａ医学院的诺贝尔委员会宣布将本年度的诺贝尔生理学或医学奖分别授予三位药理学家：纽约州立大学ＳＵＮＹ健康科学中心的荣休教授ＲｏｂｅｒｔＦ．Ｆｕｒｃｈｇｏｔ博士，洛杉矶加州大学医学院的Ｌ... 展开更多

关键词 一氧化氮 发现 诺贝尔医学奖

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脂多糖对血管平滑肌细胞一氧化氮合酶基因表达的影响 被引量：1

18

作者 曾丽苹 韩梅 温进坤 《河北医科大学学报》 CAS 1999年第3期137-139,共3页

目的探讨脂多糖（ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ，ＬＰＳ）对大鼠血管平滑肌细胞（ｖａｓｃｕｌａｒｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅｃｅｌｓ，ＶＳＭＣ）诱导型一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）基因表达及一氧化氮（ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄ... 目的探讨脂多糖（ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ，ＬＰＳ）对大鼠血管平滑肌细胞（ｖａｓｃｕｌａｒｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅｃｅｌｓ，ＶＳＭＣ）诱导型一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）基因表达及一氧化氮（ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅ，ＮＯ）合成的影响。方法细胞培养、ＲＮＡ印迹分析和亚硝酸盐含量测定。结果ＬＰＳ是ｉＮＯＳ的强效诱导物，可在转录水平上诱导ＶＳＭＣｉＮＯＳｍＲＮＡ表达，促进ＮＯ的合成，其作用强度与ＬＰＳ剂量呈正相关；刺激１２ｈ后，ＶＳＭＣｉＮＯＳ的表达活性最高，２４ｈ开始下降。结论ＬＰＳ对ｉＮＯＳ表达的诱导作用与其浓度和作用时间有关。 展开更多

关键词 脂多糖 代谢 血管平滑肌细胞 一氧化氮合酶

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海洋细菌Bacillus sp.2-羰基还原酶的纯化和性质 被引量：1

19

作者 李湘萍 罗虹 +2 位作者 庞宗文 黄时海 梁智群 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期463-468,共6页

从一株海洋细菌Bacillussp .中通过硫酸铵分级盐析、QSepharoseFF阴离子交换层析、Hydroxyapatite柱层析和SephadexG 1 0 0凝胶过滤 ,分离纯化出一种 3 脱氧葡糖醛酮代谢酶 ,定性为 2 羰基醛还原酶。以粗酶液作起始 ,所获样品纯度提高 ... 从一株海洋细菌Bacillussp .中通过硫酸铵分级盐析、QSepharoseFF阴离子交换层析、Hydroxyapatite柱层析和SephadexG 1 0 0凝胶过滤 ,分离纯化出一种 3 脱氧葡糖醛酮代谢酶 ,定性为 2 羰基醛还原酶。以粗酶液作起始 ,所获样品纯度提高 1 41 4倍 ,活力回收率 1 1 4%。 2 羰基醛化合物对该酶是特异性很好的底物 ,该酶对 3 脱氧葡糖醛酮的Km为 2 5mmol L ,分子量约为 33kD ,反应最适pH为 6 2 ,在pH5 0～ 8 0 ,温度 30℃以下酶活保持稳定。适量的ED TA、巯基乙醇或二硫苏糖醇能提高酶的活性 ,碘乙酸、N 乙基顺丁烯二酰亚胺均造成酶部分失活。 展开更多

关键词 美拉德反应 3-脱氧葡糖醛酮 2-羧基醛还原酶 纯化 海洋细菌

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利用生物传感分析仪快速测定葡萄糖氧化酶的酶活 被引量：3

20

作者 周清华 王卫军 +1 位作者 钱伟 魏胜华 《安徽工程大学学报》 CAS 2017年第5期1-4,50,共5页

建立了采用生物传感分析仪快速测定葡萄糖氧化酶酶活的新方法.通过外加过氧化氢酶去除酶反应液中的过氧化氢,排除了其对测定的干扰;酶活测定的最佳条件:取质量浓度为15mg/mL的葡萄糖氧化酶稀释液0.5mL加入5mL质量浓度为3mg/mL的葡萄糖... 建立了采用生物传感分析仪快速测定葡萄糖氧化酶酶活的新方法.通过外加过氧化氢酶去除酶反应液中的过氧化氢,排除了其对测定的干扰;酶活测定的最佳条件:取质量浓度为15mg/mL的葡萄糖氧化酶稀释液0.5mL加入5mL质量浓度为3mg/mL的葡萄糖溶液中,在36℃的水浴中反应10min,然后加入过氧化氢酶去除H_2O_2.在此条件下同一批样品测定8次,其RSD为1.14%,与液相色谱法测定的结果相比较,相对误差为1.65%,较其他几种方法更为快捷、精确. 展开更多

关键词 生物传感分析仪 葡萄糖氧化酶 酶活 测定

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