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昆虫抗菌肽及其研究进展 被引量:60
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作者 卢晓风 杨星勇 +1 位作者 程惊秋 裴炎 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期156-160,共5页
昆虫是世界上最大的生物种群,据估计其种类多于106,个体数量超过1018,占整个动物数量的90%。除海洋外,其余所有的生态环境都有昆虫的分布[1],这表明昆虫有极强的适应能力和防御能力。但研究发现,昆虫并不具有高等动... 昆虫是世界上最大的生物种群,据估计其种类多于106,个体数量超过1018,占整个动物数量的90%。除海洋外,其余所有的生态环境都有昆虫的分布[1],这表明昆虫有极强的适应能力和防御能力。但研究发现,昆虫并不具有高等动物那样高度专一的免疫体系,即昆虫缺... 展开更多
关键词 昆虫 抗菌肽 抗生素 研究
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家蝇蛆抗菌肽提取工艺研究 被引量:24
2
作者 陆婕 钟雅 +2 位作者 柳林 付康 陈正望 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期106-112,共7页
蝇蛆抗菌肽多有广谱抗菌、抗癌等功能,是很好的天然抗菌药物来源,但由于得率较低,目前对其产品开发的研究较少。以家蝇Musca domestica干蝇蛆为原料,利用加热.层析法和海藻酸吸附法2种工艺提取蝇蛆抗菌肽。结果表明:加热.层析法快速、简... 蝇蛆抗菌肽多有广谱抗菌、抗癌等功能,是很好的天然抗菌药物来源,但由于得率较低,目前对其产品开发的研究较少。以家蝇Musca domestica干蝇蛆为原料,利用加热.层析法和海藻酸吸附法2种工艺提取蝇蛆抗菌肽。结果表明:加热.层析法快速、简便,抗菌肽提取得率达0.26%,是海藻酸吸附法提取抗菌肽得率的5.2倍。提取的家蝇抗菌肽主要是分子量6.2—17.2kD、等电点5.59—5.91的弱酸性小分子多肽,其热稳定性高,能杀灭枯草杆菌Bacillus subtilis等多种革兰氏阳性菌。加热.层析法能有效去除外源性蛋白酶,保证肽类产品的稳定性,同时还能提取出非蛋白类的抗菌成分,提示其对开发具有高附加值的抗菌产品将会有良好的应用前景。 展开更多
关键词 家蝇 抗菌肽 提取工艺 资源利用 抗菌产品
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瑞士乳杆菌发酵法制备乳清蛋白源性ACE抑制肽的研究 被引量:15
3
作者 郭宇星 陈庆森 +1 位作者 赵林森 杨晓威 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第6期151-154,共4页
利用益生菌发酵法制备ACE抑制肽(AngiotensinI-ConvertingEnzyme(ACE)inhibitorypeptides)已成为近年来研究的新热点,对于功能性食品的开发具有十分重要的意义。本文以瑞士乳杆菌(Lactobacillushelveticus)为发酵菌种,研究了其水解乳清... 利用益生菌发酵法制备ACE抑制肽(AngiotensinI-ConvertingEnzyme(ACE)inhibitorypeptides)已成为近年来研究的新热点,对于功能性食品的开发具有十分重要的意义。本文以瑞士乳杆菌(Lactobacillushelveticus)为发酵菌种,研究了其水解乳清蛋白的能力及发酵产物的ACE抑制活性。研究发现发酵产品在瑞士乳杆菌对数生长期收获时为最佳,16h收获时ACE抑制率达到44.17%,活菌数为107CFU/ml。发酵产品超滤结果显示,用10000D分子量膜超滤后,其ACE抑制活性比未超滤前提高2.5倍,IC50达到19.63μg/ml。最后对发酵产品进行喷雾干燥和冷冻干燥,发现这两种干燥方法对产品ACE抑制活性没有影响,冷冻干燥的方法产率比较高,可达到106.08g/L,且IC50为50.28μg/ml。 展开更多
关键词 瑞士乳杆菌 乳清蛋白 蛋白水解能力 ACE抑制活性
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牡蛎活性肽的分离及其免疫抑制作用的实验研究 被引量:15
4
作者 李超柱 陈艳华 +2 位作者 陈艳辉 张艳秋 方怀义 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期52-56,共5页
采用动物蛋白酶对牡蛎蛋白质进行酶解,获得牡蛎活性肽,将分子质量小于3 kD的活性肽分别采用MTT法、体外抑制小鼠脾淋巴细胞增殖试验和小鼠体外脾混合淋巴细胞增殖活性实验,并通过ELISA法检测牡蛎活性肽作用后小鼠脾脏淋巴细胞上清中分... 采用动物蛋白酶对牡蛎蛋白质进行酶解,获得牡蛎活性肽,将分子质量小于3 kD的活性肽分别采用MTT法、体外抑制小鼠脾淋巴细胞增殖试验和小鼠体外脾混合淋巴细胞增殖活性实验,并通过ELISA法检测牡蛎活性肽作用后小鼠脾脏淋巴细胞上清中分泌的细胞因子IL-2、IFN-γ的变化。试验结果表明,牡蛎活性肽对小鼠脾淋巴细胞增殖具有一定的免疫抑制作用,经牡蛎活性肽作用后的小鼠脾脏淋巴细胞上清中细胞因子IL-2、IFN-γ分泌减少。 展开更多
关键词 牡蛎活性肽 免疫抑制作用 淋巴细胞增殖
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食品中的呈味肽及其呈味机理研究进展 被引量:55
5
作者 张梅秀 王锡昌 刘源 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第7期320-326,共7页
呈味肽因其不同链长度和结构序列具有不同的滋味特征,包括甜味、苦味、酸味、咸味和鲜味。目前国内对于呈味肽的研究主要集中在其种类和数量的发掘阶段,关于呈味肽与味觉感受器相互作用而呈味的机理还不是十分清晰;而国外对于呈味肽的... 呈味肽因其不同链长度和结构序列具有不同的滋味特征,包括甜味、苦味、酸味、咸味和鲜味。目前国内对于呈味肽的研究主要集中在其种类和数量的发掘阶段,关于呈味肽与味觉感受器相互作用而呈味的机理还不是十分清晰;而国外对于呈味肽的降血压、降血糖等生物活性功能以及5类呈味肽的相应呈味机理研究有相关新报道。本文阐述了食品中的呈味肽以及其在食品中的作用,并综述了其呈味机理的研究新进展,以期为食品风味研究及调味品的开发提供参考依据。 展开更多
关键词 呈味肽 特征滋味 呈味机理
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栉孔扇贝(Chlamys farreri)中抗氧化肽的分离纯化及性质研究 被引量:24
6
作者 胡文婷 孙谧 王跃军 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期14-19,共6页
以栉孔扇贝内脏团为原料,对其中抗氧化肽的制备、纯化及性质进行了研究。首先采用硫酸铵沉淀、DEAE-Sephadex A-50阴离子交换层析的方法,进行了扇贝提取蛋白的制备,其次采用海洋蛋白酶YS-80水解、SephadexG-25凝胶层析的方法,进行扇贝... 以栉孔扇贝内脏团为原料,对其中抗氧化肽的制备、纯化及性质进行了研究。首先采用硫酸铵沉淀、DEAE-Sephadex A-50阴离子交换层析的方法,进行了扇贝提取蛋白的制备,其次采用海洋蛋白酶YS-80水解、SephadexG-25凝胶层析的方法,进行扇贝抗氧化肽的制备,获得多肽粗品(海洋肽,PCF),并进一步采用CM Sepharose阳离子交换层析和反相高效液相色谱的方法,对扇贝抗氧化肽进行了纯化,结果得到组分PCF-3A,反相高效液相显示为单一峰。采用茚三酮反应、Sephadex G-15凝胶层析和AccQ.Tag氨基酸分析柱,进行了PCF-3A的理化性质研究。结果表明,茚三酮反应呈阳性;分子量约为794D;由7种氨基酸组成,分别为天冬氨酸、甘氨酸、苏氨酸、丙氨酸、缬氨酸、赖氨酸和脯氨酸。采用邻苯三酚自氧化体系和Fenton反应体系对PCF-3A的抗氧化活性进行了研究,发现该肽可有效清除羟自由基和超氧阴离子,半抑制浓度(IC50)分别为0.39mg/ml和2.85mg/ml,具有明显的抗氧化、抗衰老作用。 展开更多
关键词 栉孔扇贝 抗氧化肽 分离纯化 性质
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固态发酵生产菜籽肽及其清除自由基能力的研究 被引量:14
7
作者 何荣 鞠兴荣 +1 位作者 袁建 王立峰 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第19期259-262,共4页
以菜籽粕为原料,氮溶解指数、氨基酸态氮、肽含量、蛋白酶活力为评价指标,研究枯草芽孢杆菌固态发酵生产菜籽肽的动态效果,探讨菜籽肽清除自由基的能力。结果显示,随着发酵时间的延长,蛋白酶活力、氮溶解指数和多肽含量呈先升高后降低趋... 以菜籽粕为原料,氮溶解指数、氨基酸态氮、肽含量、蛋白酶活力为评价指标,研究枯草芽孢杆菌固态发酵生产菜籽肽的动态效果,探讨菜籽肽清除自由基的能力。结果显示,随着发酵时间的延长,蛋白酶活力、氮溶解指数和多肽含量呈先升高后降低趋势,在发酵中期(3d)达到最大值,分别为1840U/ml、70%和7.5mg/ml;菜籽肽清除自由基的能力与菜籽肽的浓度呈正相关,7.5mg/ml的菜籽肽对DPPH.、超氧阴离子自由基和羟基自由基的清除率分别为88.5%、71.2%和83.1%;凝胶过滤色谱分析结果表明,随着发酵的进行,产生了许多小分子质量菜籽肽,并且分子量越小的菜籽肽清除自由基的能力越强。 展开更多
关键词 固态发酵 菜籽肽 清除自由基能力
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抗菌肽琼脂糖孔穴扩散法与比浊法测活比较及其相关性 被引量:12
8
作者 李秀兰 戴祝英 张双全 《南京师大学报(自然科学版)》 CAS CSCD 1998年第2期81-83,共3页
以大肠杆菌K12D31为标准菌株,采用琼脂糖孔穴扩散法和比浊法相结合,对抗菌肽活力进行测定.通过细菌浓度的变化和抑菌圈大小来确定样品的活力单位.生物统计结果表明:活力单位(u)与抑菌圈直径(d)两者之间存在定量的正相... 以大肠杆菌K12D31为标准菌株,采用琼脂糖孔穴扩散法和比浊法相结合,对抗菌肽活力进行测定.通过细菌浓度的变化和抑菌圈大小来确定样品的活力单位.生物统计结果表明:活力单位(u)与抑菌圈直径(d)两者之间存在定量的正相关(u=0.06d). 展开更多
关键词 抗菌肽 琼脂糖 孔穴扩散法 比浊法 活性 测定
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修饰合成冬鲽抗冻肽基因的设计和克隆 被引量:5
9
作者 达来 朱晔荣 +2 位作者 马振毅 王非 阚锐 《内蒙古大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 2000年第2期216-222,共7页
:动物界和植物界密码子使用频率不同 .冬鲽抗冻肽中丙氨酸占 60 %而且偏爱GCC ,3 8个Ala密码子中 2 3个为GCC .我们设计合成抗冻肽基因时采用了植物基因常用密码子 .用甘薯(Ipomoeabatatas)信号肽序列取代了抗冻肽的pre序列 ,省略了Pro... :动物界和植物界密码子使用频率不同 .冬鲽抗冻肽中丙氨酸占 60 %而且偏爱GCC ,3 8个Ala密码子中 2 3个为GCC .我们设计合成抗冻肽基因时采用了植物基因常用密码子 .用甘薯(Ipomoeabatatas)信号肽序列取代了抗冻肽的pre序列 ,省略了Pro序列 ,并构建了信号肽下游二、四、八拷贝正向串联的成熟肽的修饰基因 ,经测序证实与设计完全一致 .利用QIA表达系统 ,在大肠杆菌中实现了DHFR 展开更多
关键词 抗冻肽 合成基因 冬Die 修饰基因 设计 克隆
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饲喂蝇蛆抗菌肽对白痢鸡血液生化指标的影响 被引量:13
10
作者 申红 王俊刚 +5 位作者 秦文彬 衡建胜 乔书培 周刚 赵博 贾斌 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 2011年第5期566-569,共4页
为了测定蝇蛆抗菌肽对白痢鸡血液生化指标的影响,选用75只白痢三黄肉仔鸡,随机分为5个组,用蝇蛆抗菌肽替换抗生素治疗白痢鸡,比较分析添加未经处理蝇蛆组、灭活沙门氏菌处理蝇蛆组、蝇蛆中粗提抗菌肽组、抗生素组与对照组(不加抗生素和... 为了测定蝇蛆抗菌肽对白痢鸡血液生化指标的影响,选用75只白痢三黄肉仔鸡,随机分为5个组,用蝇蛆抗菌肽替换抗生素治疗白痢鸡,比较分析添加未经处理蝇蛆组、灭活沙门氏菌处理蝇蛆组、蝇蛆中粗提抗菌肽组、抗生素组与对照组(不加抗生素和抗菌肽)中白痢鸡各项生理生化指标的变化情况。结果显示,白痢鸡饲喂抗菌肽后红细胞数(RBC)与对照组相比显著增多(P<0.05),白细胞(WBC)数量显著减少(P<0.05),血液中总蛋白、白蛋白、球蛋白含量均显著高于对照组(P<0.05),并降低了白痢鸡血清总脂的含量(P<0.05),血清中转氨酶含量有所降低,但差异不显著(P>0.05)。 展开更多
关键词 抗菌肽 生化指标 血清
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鲎抗菌肽对隐球菌、枯草杆菌、变形杆菌的抑菌作用 被引量:9
11
作者 刘慧明 汪亚君 +1 位作者 丁航 张海涛 《海南医学院学报》 CAS 2008年第1期4-5,共2页
目的:利用鲎试剂生产废料中提取的鲎抗菌肽,了解鲎抗菌肽对隐球菌、枯草杆菌、变形杆菌的抑菌作用。方法:采用酸处理法和SephdexG-50凝胶层析法从鲎试剂生产废料中提纯鲎抗菌肽,然后把鲎抗菌肽加入菌液培养,24 h后观察结果。结果:鲎抗... 目的:利用鲎试剂生产废料中提取的鲎抗菌肽,了解鲎抗菌肽对隐球菌、枯草杆菌、变形杆菌的抑菌作用。方法:采用酸处理法和SephdexG-50凝胶层析法从鲎试剂生产废料中提纯鲎抗菌肽,然后把鲎抗菌肽加入菌液培养,24 h后观察结果。结果:鲎抗菌肽对隐球菌,枯草杆菌具有一定的抗菌作用,对变形杆菌无效。24 h隐球菌,枯草杆菌的最小抑制浓度分别为2.28μL/mL和45μL/mL。结论:说明鲎抗菌肽具有一定的抗菌作用,可作为新一代的抗菌药物的开发研究。 展开更多
关键词 抗生素类 凝胶层析法
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鲜味肽的研究进展 被引量:14
12
作者 刘义 赵钺沁 +5 位作者 周怡梅 肖钧木 米粱波 黄金龙 陈祥贵 孙伟峰 《西华大学学报(自然科学版)》 CAS 2016年第3期21-25,共5页
鲜味肽是新型活性肽类鲜味剂,其风味醇厚鲜美,可作为前体物参与美拉德反应形成特殊芳香气味,具有强烈的增鲜、增香作用。目前对鲜味肽的研究多集中在提取工艺及其美拉德反应工艺,关于鲜味肽呈味机制、鲜味肽资源开发等研究仍亟待加强。... 鲜味肽是新型活性肽类鲜味剂,其风味醇厚鲜美,可作为前体物参与美拉德反应形成特殊芳香气味,具有强烈的增鲜、增香作用。目前对鲜味肽的研究多集中在提取工艺及其美拉德反应工艺,关于鲜味肽呈味机制、鲜味肽资源开发等研究仍亟待加强。文章阐述鲜味肽的特点、加工特性,并对其呈鲜机制、构效关系及其生产工艺等领域的研究新进展进行综述,以期为其在调味品中的开发利用提供依据。 展开更多
关键词 鲜味肽 呈鲜机制 构效关系
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大豆抗氧化活性肽研究进展 被引量:11
13
作者 刘明 倪辉 吴永沛 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第12期897-901,共5页
自由基能够引起机体衰老、肿瘤等一系列疾病的发生,大豆抗氧化活性肽具有清除羟自由基、清除超氧阴离子自由基、抑制脂肪氧合酶活力和抑制脂质过氧化链式反应等功效。本文综述了自由基的形成、大豆抗氧化活性肽的抗氧化防御机理、制备... 自由基能够引起机体衰老、肿瘤等一系列疾病的发生,大豆抗氧化活性肽具有清除羟自由基、清除超氧阴离子自由基、抑制脂肪氧合酶活力和抑制脂质过氧化链式反应等功效。本文综述了自由基的形成、大豆抗氧化活性肽的抗氧化防御机理、制备方法和发展前景等方面近年来的研究概况。 展开更多
关键词 大豆抗氧化肽 抗氧化活性 酶解 水解度
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生物活性肽降血糖功能的研究进展 被引量:20
14
作者 王莹 徐秀林 朱乃硕 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第9期341-344,共4页
糖尿病严重危害着人类的健康,全球患病人数已超过2亿。近年来,人们从动植物、昆虫以及人体中提取得到具有降血糖活性的多肽类物质,与传统治疗糖尿病的药物相比,其生物活性高,副作用小,有望开发成为预防或治疗糖尿病的功能食品或药物。... 糖尿病严重危害着人类的健康,全球患病人数已超过2亿。近年来,人们从动植物、昆虫以及人体中提取得到具有降血糖活性的多肽类物质,与传统治疗糖尿病的药物相比,其生物活性高,副作用小,有望开发成为预防或治疗糖尿病的功能食品或药物。本文分类介绍一些具有降血糖功能的生物活性肽,以及国内外的研究进展和应用。 展开更多
关键词 生物活性肽 糖尿病 降血糖功能
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肌肽对蛋白氧化和糖化修饰的作用研究 被引量:5
15
作者 韩立强 杨国宇 +1 位作者 王艳玲 郭爽 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第1期44-46,共3页
肌肽是一种发现于肌肉中的二肽,具有抗氧化性。采用铁氰化钾还原法及牛血清白蛋白(BSA)氧化和糖化体系来研究肌肽的抗氧化作用。结果表明:肌肽具有还原能力;随浓度增加肌肽能够显著减少蛋白质羰基的生成(p<0.01),抑制BSA的氧化修饰;... 肌肽是一种发现于肌肉中的二肽,具有抗氧化性。采用铁氰化钾还原法及牛血清白蛋白(BSA)氧化和糖化体系来研究肌肽的抗氧化作用。结果表明:肌肽具有还原能力;随浓度增加肌肽能够显著减少蛋白质羰基的生成(p<0.01),抑制BSA的氧化修饰;肌肽能被葡萄糖糖化修饰,随其浓度增加糖化产物的含量显著增加(p<0.01)。 展开更多
关键词 肌肽 还原能力 BSA 氧化 葡萄糖 糖化
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脱色素玉米活性肽对小鼠抗运动性疲劳的影响 被引量:8
16
作者 陈红漫 杜国丰 +1 位作者 田秀艳 阚国仕 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2009年第3期592-595,共4页
以小白鼠为试验动物,建立小鼠疲劳模型,探讨脱色素玉米活性肽缓解疲劳的细胞生化机制。根据脱色素活性肽的药理作用,采用运动训练学方法研究了脱色素玉米活性肽对小鼠耐力及抗疲劳能力的影响。结果表明,脱色素玉米活性肽高剂量组(0.075 ... 以小白鼠为试验动物,建立小鼠疲劳模型,探讨脱色素玉米活性肽缓解疲劳的细胞生化机制。根据脱色素活性肽的药理作用,采用运动训练学方法研究了脱色素玉米活性肽对小鼠耐力及抗疲劳能力的影响。结果表明,脱色素玉米活性肽高剂量组(0.075 g/ml)能显著增强小鼠游泳时间、延长爬杆时间及常压耐缺氧时间(P<0.01),增加肝糖原、肌糖原含量(P<0.01),降低血清和肝组织中血清尿素氮(BUN)浓度、乳酸脱氢酶(LDH)活力(P<0.01)。说明脱色素玉米活性肽对增强机体负荷的适应能力、抵抗疲劳产生和加速消除疲劳等方面具有明显作用。 展开更多
关键词 玉米活性肽 机制 小鼠 抗疲劳
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大豆多肽Alcalase酶解法制备工艺研究及应用 被引量:7
17
作者 邵伟 乐超银 +1 位作者 陈菽 朱姜维 《中国酿造》 CAS 北大核心 2008年第8期69-71,共3页
以大豆分离蛋白为原料,选用Alcalase酶,分别从底物浓度、酶解温度、加酶量、酶解pH值和酶解时间等因素来研究Alcalase酶对酶解大豆分离蛋白水解度的影响,并通过正交试验优化了酶解条件,其最佳酶解条件为,底物浓度3%、酶解pH8.0、加酶量... 以大豆分离蛋白为原料,选用Alcalase酶,分别从底物浓度、酶解温度、加酶量、酶解pH值和酶解时间等因素来研究Alcalase酶对酶解大豆分离蛋白水解度的影响,并通过正交试验优化了酶解条件,其最佳酶解条件为,底物浓度3%、酶解pH8.0、加酶量5%,酶解温度55℃,酶解时间6h,所得的大豆多肽口感好,含量高。 展开更多
关键词 大豆分离蛋白 ALCALASE 水解度 大豆多肽
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鹿茸活性多肽软胶囊对大鼠免疫功效的初步研究 被引量:8
18
作者 罗翔丹 孙威 +2 位作者 周玉 张铁华 潘风光 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第11期554-557,共4页
观察梅花鹿鹿茸活性多肽(pilose antler active polypeptide,PAAP)软胶囊对主动免疫的大鼠免疫功能的影响。饲喂基础日粮的Wistar大鼠,每组20只,分别连续灌喂蒸馏水、白酒和鹿茸活性多肽软胶囊15d。测定并计算胸腺、脾脏指数和免疫功能... 观察梅花鹿鹿茸活性多肽(pilose antler active polypeptide,PAAP)软胶囊对主动免疫的大鼠免疫功能的影响。饲喂基础日粮的Wistar大鼠,每组20只,分别连续灌喂蒸馏水、白酒和鹿茸活性多肽软胶囊15d。测定并计算胸腺、脾脏指数和免疫功能。结果显示:P A A P可以减轻由酒精引起的免疫抑制,减轻胸腺萎缩,提高胸腺和脾脏指数,提高外周血中性粒细胞的吞噬功能,提高外周血T淋巴细胞百分率及分泌功能,提高血清中抗体水平,并提高支气管肺泡灌洗液中肺泡巨噬细胞的吞噬功能及T淋巴细胞百分率。 展开更多
关键词 鹿茸 活性多肽 免疫功效
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生物活性肽分离纯化技术研究进展 被引量:6
19
作者 王元秀 蒋竹青 +2 位作者 李萍 丁天伦 杨新超 《济南大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2014年第5期321-325,共5页
综述生物活性肽分离常用的电泳技术、层析技术、膜离技术、融合表达载体分离技术、探针分离技术及联合运用上述方法进行分离等生物活性肽制备中的分离纯化技术,分析这些技术的原理、特点、应用范围及其最新研究进展,并对生物活性肽分离... 综述生物活性肽分离常用的电泳技术、层析技术、膜离技术、融合表达载体分离技术、探针分离技术及联合运用上述方法进行分离等生物活性肽制备中的分离纯化技术,分析这些技术的原理、特点、应用范围及其最新研究进展,并对生物活性肽分离纯化技术进行展望。 展开更多
关键词 生物活性肽 分离 纯化 高效毛细管电泳 层析 膜分离
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一种新穿膜肽的构建、表达及其活性检测 被引量:7
20
作者 王怡 蔡绍晖 +1 位作者 姜丽娟 李校堃 《药物生物技术》 CAS CSCD 2007年第2期79-84,共6页
通过对穿膜肽TAT-PTD构效关系的分析和结构改造,构建能有效进入血脑屏障且低毒的新穿膜肽。该研究用分子克隆技术构建出表达型载体pET28a-T1-GFP,重组质粒在大肠杆菌E.coliBL21(DE3)中表达融合蛋白His-T1-GFP,经组氨酸亲和层析纯化后,... 通过对穿膜肽TAT-PTD构效关系的分析和结构改造,构建能有效进入血脑屏障且低毒的新穿膜肽。该研究用分子克隆技术构建出表达型载体pET28a-T1-GFP,重组质粒在大肠杆菌E.coliBL21(DE3)中表达融合蛋白His-T1-GFP,经组氨酸亲和层析纯化后,用荧光显微镜和免疫组化的方法来检测His-T1-GFP在活体动物小白鼠体内的跨膜递送作用。经测序证实成功构建了表达型载体pET28a-T1-GFP,融合蛋白His-T1-GFP在大肠杆菌E.coliBL21(DE3)中表达率为20%。经组氨酸亲和纯化,得到纯度达85%的融合蛋白。SDS-PAGE和Western Blotting显示纯化蛋白为His-T1-GFP,动物实验表明融合蛋白His-T1-GFP能够有效跨过血脑屏障,主要分布在大脑皮层和海马回。该研究成功地构建了一种新的穿膜肽-T1,为其携带有生物活性的大分子物质到达脑部进行蛋白治疗奠定了基础。 展开更多
关键词 穿膜肽 绿色荧光蛋白 血脑屏障 跨膜效率
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