密码子优化的牛精蛋白基因在大肠杆菌中的表达 被引量：16

1

作者 张雅丽 杨国庆 +1 位作者 郭英 陈永福 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2002年第4期42-46,共5页

以PCR的方法得到牛精蛋白基因组基因 ,去其内含子 ,得到牛精蛋白cDNA ,克隆入原核表达载体 pGEX 2T中 ,组装成表达载体 pGEX 2T PE。利用大肠杆菌偏好的编码精氨酸的密码子CGT将野生型牛精蛋白基因中编码精氨酸的稀有密码子 (AGA或A... 以PCR的方法得到牛精蛋白基因组基因 ,去其内含子 ,得到牛精蛋白cDNA ,克隆入原核表达载体 pGEX 2T中 ,组装成表达载体 pGEX 2T PE。利用大肠杆菌偏好的编码精氨酸的密码子CGT将野生型牛精蛋白基因中编码精氨酸的稀有密码子 (AGA或AGG)替换掉 ,通过基因合成得到密码子优化的牛精蛋白基因 ,将其克隆入原核表达载体pGEX 2T ,组装成表达载体pGEX 2T PS。将这两个表达载体分别转化入大肠杆菌表达菌株BL2 1中 ,经IPTG诱导 ,同样条件下 ,野生型牛精蛋白基因无法得到表达 ,密码子优化的牛精蛋白基因能够得到良好的表达 ,表达产物约占细菌总蛋白的 18%。将表达蛋白纯化 ,进行DNA—蛋白结合实验 ,发现其能与DNA发生非特异性的结合。 展开更多

关键词 密码子优化 牛精蛋白 大肠杆菌 基因表达 编码精氨酸 非特异性结合

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鱿鱼鱼精蛋白的抑菌作用及在保鲜中的应用 被引量：18

2

作者 李燕 汪之和 +1 位作者 王麟 宋倩禺 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第10期80-84,共5页

以鱿鱼精巢组织为原料,从中分离提取鱼精蛋白。确定其对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度(MIC)后,将其添加到新鲜的鱼糜制品中,研究了pH值、无机成分、有机成分和其他化学物质对鱼精蛋白抑菌活性的影响。结果表明,鱼精蛋白是一... 以鱿鱼精巢组织为原料,从中分离提取鱼精蛋白。确定其对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度(MIC)后,将其添加到新鲜的鱼糜制品中,研究了pH值、无机成分、有机成分和其他化学物质对鱼精蛋白抑菌活性的影响。结果表明,鱼精蛋白是一种有效的天然食品防腐剂。 展开更多

关键词 鱼精蛋白 最低抑菌浓度 抑菌作用

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鱼精蛋白对黑曲霉细胞内的琥珀酸脱氢酶和苹果酸脱氢酶的影响 被引量：17

3

作者 徐明生 陈锦屏 上官新晨 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第4期48-51,共4页

鱼精蛋白是一种多聚阳离子天然肽类,它是一种碱性蛋白质。为探讨其抑菌作用,我们研究了鱼精蛋白对黑曲霉细胞内的琥珀酸脱氢酶和苹果酸脱氢酶的影响。结果表明,鱼精蛋白具有抑制琥珀酸脱氢酶和苹果酸脱氢酶的活性(p<0.01),但效果低... 鱼精蛋白是一种多聚阳离子天然肽类,它是一种碱性蛋白质。为探讨其抑菌作用,我们研究了鱼精蛋白对黑曲霉细胞内的琥珀酸脱氢酶和苹果酸脱氢酶的影响。结果表明,鱼精蛋白具有抑制琥珀酸脱氢酶和苹果酸脱氢酶的活性(p<0.01),但效果低于纳他霉素。提示鱼精蛋白用作食品防腐剂具有很大的潜力。 展开更多

关键词 鱼精蛋白 纳他霉素 琥珀酸脱氢酶(SDH) 苹果酸脱氢酶(MDH) 黑曲霉

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二维电泳分离牛精子蛋白技术 被引量：8

4

作者 王振玲 王栋 +5 位作者 朱化彬 程金华 李玉冰 郝海生 杜卫华 沙里金 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期61-66,共6页

二维电泳是蛋白质分离技术并可用于对精子蛋白的分离。旨在通过对双向电泳条件的研究摸索出一种适用于分离牛精子蛋白的二维电泳技术，并利用其对牛精子蛋白进行分离鉴定。在实验中，优化了等电聚焦程序，研究了精子蛋白的不同制备方法... 二维电泳是蛋白质分离技术并可用于对精子蛋白的分离。旨在通过对双向电泳条件的研究摸索出一种适用于分离牛精子蛋白的二维电泳技术，并利用其对牛精子蛋白进行分离鉴定。在实验中，优化了等电聚焦程序，研究了精子蛋白的不同制备方法、不同上样量、不同胶条长度对电泳结果的影响。结果表明，采用尿素-盐酸胍两步裂解法裂解精子细胞制备蛋白，使用13cm非线性胶条进行蛋白二维电泳，能获得较好的电泳图谱。图谱经二维电泳软件分析，可检测出约800多个蛋白质点，分子量基本分布在10～100kDa、等电点约为4～9的区域内。对精子蛋白二维电泳条件的摸索，为后续牛精子X、Y差异蛋白的检测和分析奠定了理论基础。 展开更多

关键词 牛 精子 二维电泳

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鱼精蛋白的研究与开发 被引量：12

5

作者 穆云龙 余旭亚 +1 位作者 孟庆雄 吴海苹 《食品与药品》 CAS 2006年第09A期11-13,共3页

鱼精蛋白是存在于各类鱼精巢组织中的一种多聚阳离子肽,具有高效、安全、功能性等特点,是值得开发的一种新型天然食品防腐剂。本文对鱼精蛋白的理化性质、提取工艺、抗菌机制和存在的问题及展望等方面进行了综述。

关键词 鱼精蛋白 抗菌活性 机制

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利用贝类废弃物制造水解动物蛋白 被引量：17

6

作者 汪涛 曾庆祝 《青岛海洋大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2003年第3期361-365,共5页

以扇贝加工废弃物—扇贝边为原料 ,采用枯草杆菌蛋白酶、胰蛋白酶、Flavourzyme对其进行深度水解 ;然后应用超滤技术对酶解液进行分离 ,除去未水解的蛋白质、细菌、微细的颗粒等物质 ,得到富含氨基酸和小分子肽的超滤透过液 ;再应用反... 以扇贝加工废弃物—扇贝边为原料 ,采用枯草杆菌蛋白酶、胰蛋白酶、Flavourzyme对其进行深度水解 ;然后应用超滤技术对酶解液进行分离 ,除去未水解的蛋白质、细菌、微细的颗粒等物质 ,得到富含氨基酸和小分子肽的超滤透过液 ;再应用反渗透技术进行预浓缩 ,以除去其中过多水分 ;最后 ,对该浓缩液进行减压浓缩或喷雾干燥 ,即得到浓液状或粉状的水解动物蛋白产品。其中 ,粉状产品的粗蛋白含量为 6 6 .88% ,氨基酸态氮含量为 6 .96 % ,氨基酸态氮 /总氮 6 5 .0 5 % 。 展开更多

关键词 水解动物蛋白 贝类废弃物 超滤技术 酶解工艺 粗蛋白 氨基酸态氮 HAP制品 水解工艺 食品工业 扇贝边利用

原文传递

哺乳动物精子性别特异膜蛋白的研究进展 被引量：1

7

作者 王栋 王振铃 +3 位作者 程金华 朱化彬 郝海生 刘永华 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期65-68,共4页

在精子形成过程中,存在性染色体特异基因的表达,这是X、Y精子膜蛋白差异形成的基础。尽管精子形成过程中形成的细胞间桥可能使精子细胞间共享基因表达产物,但雄性传递偏移现象和性别偏移现象的发生又证明两类精子间存在非共享蛋白,同时... 在精子形成过程中,存在性染色体特异基因的表达,这是X、Y精子膜蛋白差异形成的基础。尽管精子形成过程中形成的细胞间桥可能使精子细胞间共享基因表达产物,但雄性传递偏移现象和性别偏移现象的发生又证明两类精子间存在非共享蛋白,同时H-Y抗原表位的成功鉴定、精子分离实验结果以及性别特异蛋白的检测结果都肯定了精子膜蛋白差异的存在,只是这种膜蛋白的差异很小。蛋白分离技术的进步及技术间的优化集成,为精子间细微差异膜蛋白的分离提供了可能。 展开更多

关键词 差异膜蛋白 精子 基因表达

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鲑精蛋白对致病性弧菌的抑制活性 被引量：2

8

作者 鲁健章 苏意诚 刘承初 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2009年第3期461-464,共4页

为了解鲑精蛋白对致病性弧菌——副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus BE-98-2029)、霍乱弧菌(Vibriocholerae CDC 2164)和创伤弧菌(Vibrio vulnificus ATCC27562)的抑菌活性,本文分别测定了2000～4000μg/mL浓度的鲑精蛋白对三种弧菌... 为了解鲑精蛋白对致病性弧菌——副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus BE-98-2029)、霍乱弧菌(Vibriocholerae CDC 2164)和创伤弧菌(Vibrio vulnificus ATCC27562)的抑菌活性,本文分别测定了2000～4000μg/mL浓度的鲑精蛋白对三种弧菌在TSB(大豆肉汤)+1.5%NaCl培养基中的生长抑制情况和对菌体的致死时间。试验结果表明,2000μg/mL鲑精蛋白可有效抑制三种弧菌的生长,使霍乱弧菌48h内完全死亡,使副溶血性弧菌数量从3.3×106cfu/mL降至3.3×103cfu/mL;3000μg/mL的鲑精蛋白则可以在48h内完全杀死三种弧菌;4000μg/mL的鲑精蛋白在12h内使创伤弧菌总数从4.9×106cfu/mL降至9.4×102cfu/mL。 展开更多

关键词 鲑精蛋白 副溶血弧菌 霍乱弧菌 创伤弧菌 抑菌效果

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鱿鱼鱼精蛋白抗菌活性的研究 被引量：3

9

作者 张合文 钟立人 《哈尔滨商业大学学报（自然科学版）》 CAS 1999年第4期5-9,共5页

测定了鱿鱼鱼精蛋白对食品污染菌的抑制效果和最低抑菌浓度（ＭＩＣ），并通过试验证明了鱿鱼鱼精蛋白通过与甘氨酸、醋酸钠的复配，对革兰氏阴性菌的抗菌活性有所提高。

关键词 鱿鱼鱼精蛋白 最低抑菌浓度 复合防腐剂

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载脂蛋白A-1及B的结构功能与临床应用 被引量：4

10

作者 张黎明 张尔胜 张方晓 《临床荟萃》 CAS 1996年第9期424-425,共2页

自二十多年前Alaaupovie发现载脂蛋白(APO)以来,随分离和测定技术的提高,大多数APO的结构和功能已搞清楚。APO主要分为A、B、C、D、E几大类,APOA-1是APOA的主要亚类,在临床上APOA-1,APOB与冠心病的关系最密切,其结构、功能与临床疾病的... 自二十多年前Alaaupovie发现载脂蛋白(APO)以来,随分离和测定技术的提高,大多数APO的结构和功能已搞清楚。APO主要分为A、B、C、D、E几大类,APOA-1是APOA的主要亚类,在临床上APOA-1,APOB与冠心病的关系最密切,其结构、功能与临床疾病的关系受到广泛重视。 展开更多

关键词 载脂蛋白 临床应用 冠心病 高血压

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浓缩鱼蛋白的研制 被引量：1

11

作者 陈雪昌 顾祥源 《海洋水产科技》 1996年第2期1-4,36,共5页

本文对影响浓缩鱼蛋白产品质量的因素进行了研究。通过不同工艺参数，生制与熟制、板框压滤和离心脱脂等方面分别进行了试验，经综合分析，试验结果表明工艺参数确定为：脱脂溶剂浓度在８５％－９５％之间；脱脂温度：第一次脱脂为室温... 本文对影响浓缩鱼蛋白产品质量的因素进行了研究。通过不同工艺参数，生制与熟制、板框压滤和离心脱脂等方面分别进行了试验，经综合分析，试验结果表明工艺参数确定为：脱脂溶剂浓度在８５％－９５％之间；脱脂温度：第一次脱脂为室温第二、三次脱脂温度为７５℃。 展开更多

关键词 鱼蛋白 浓缩鱼蛋白 酒精脱脂 预处理

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大鼠精核蛋白的纯化 被引量：11

12

作者 费仁仁 戴文平 +3 位作者 戴巾 陈晖 朱斌 邓锦松 《生物化学杂志》 CSCD 1994年第5期557-560,共4页

用大鼠睾丸制备长形精子细胞核及用附睾制备的附睾精子核，用盐酸胍法提取总碱性蛋白（Ｔｏｔａｌ　ｂａｓｉｃ　ｐｒｏｔｅｉｎ，ＴＢＰ）。通过Ｓｅｐｈａｄｅｘ　Ｇ－１００分子筛层析，其第三峰用５％ＴＣＡ沉淀，得到纯大鼠精核蛋... 用大鼠睾丸制备长形精子细胞核及用附睾制备的附睾精子核，用盐酸胍法提取总碱性蛋白（Ｔｏｔａｌ　ｂａｓｉｃ　ｐｒｏｔｅｉｎ，ＴＢＰ）。通过Ｓｅｐｈａｄｅｘ　Ｇ－１００分子筛层析，其第三峰用５％ＴＣＡ沉淀，得到纯大鼠精核蛋白（Ｒａｔ　ｐｒｏｔａｍｉｎｅ，ＲＰ）。ＲＰ也可用ＴＢＰ通过ＨＰＬＣ反相柱得到纯化，ＲＰ位于２６％－２８％乙腈梯度。 展开更多

关键词 精子发生 精子 细胞 鱼精蛋白 提纯

原文传递

二硝基苯-鱼精蛋白制备的研究

13

作者 应奇才 韩志芳 《杭州医学高等专科学校学报》 2002年第3期103-104,共2页

目的　提高凝胶层析法分离鱼精蛋白与血红蛋白实验效果。方法　通过对制备黄色的二硝基苯 -鱼精蛋白 (DNP -鱼精蛋白 )反应的实验条件的研究 ,确定制备反应的最适 pH、加热反应时间及DNP -鱼精蛋白沉淀的溶解条件。结果　DNP -鱼精蛋白... 目的　提高凝胶层析法分离鱼精蛋白与血红蛋白实验效果。方法　通过对制备黄色的二硝基苯 -鱼精蛋白 (DNP -鱼精蛋白 )反应的实验条件的研究 ,确定制备反应的最适 pH、加热反应时间及DNP -鱼精蛋白沉淀的溶解条件。结果　DNP -鱼精蛋白制备反应的 pH、加热反应时间直接影响DNP -鱼精蛋白的生成量 ,溶解温度对溶液中DNP -鱼精蛋白含量有显著影响。结论　DNP -鱼精蛋白制备反应的最适为 pH 7.5～ 8.0、沸水浴加热时间为 2 0min ,DNP -鱼精蛋白沉淀应在沸水浴中加热 3min后溶解。 展开更多

关键词 DNP-鱼精蛋白 制备 凝胶层析法 PH值 加热反应时间

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鱼鳞胶的制备及成分测定

14

作者 张俊杰 刘桂芳 《河北理工大学学报（自然科学版）》 CAS 2008年第4期127-129,共3页

介绍了一种应用超声波技术制备鱼鳞胶和酵母发酵脱腥臭的方法,并进行了成分测定。生产工艺更加简单,用水量少。所应用试剂均为可食用食品添加剂,产品具有成膜性好,透明,蛋白含量高的特点。

关键词 鱼鳞 制胶 脱腥

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光谱法研究CTMAB存在下荧光桃红B与fsDNA的相互作用及应用 被引量：4

15

作者 夏忠瑜 李原芳 龙云飞 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期851-854,共4页

研究了阴离子染料荧光桃红B（PB）对鱼精脱氧核糖核酸（fsDNA）和阳离子表面活性剂溴化十六烷基三甲铵（CTMAB）的共振光散射光谱有协同增强作用，建立了一种定量测定fsDNA的灵敏度高、操作简便的共振光散射（RLS）方法。在pH5．33和离... 研究了阴离子染料荧光桃红B（PB）对鱼精脱氧核糖核酸（fsDNA）和阳离子表面活性剂溴化十六烷基三甲铵（CTMAB）的共振光散射光谱有协同增强作用，建立了一种定量测定fsDNA的灵敏度高、操作简便的共振光散射（RLS）方法。在pH5．33和离子强度低于0．03mol／L的条件下，fsDNA与CTMAB和PB共同作用产生最大散射波长为340nm的特征共振光散射增强（RLSE）信号。在优化条件下，测定fsDNA的线性范围为0．01～3．0mg／L，检出限（36）为1．4μg/L。方法成功应用于合成样中DNA的测定。 展开更多

关键词 共振光散射 荧光桃红B 脱氧核糖核酸 溴化十六烷基三甲铵

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大鼠精核蛋白抗血清的制备 被引量：1

16

作者 戴文平 左晓春 +1 位作者 陈晖 费仁仁 《生物化学杂志》 CSCD 1994年第5期561-564,共4页

用大鼠精核蛋白（Ｒａｔ　Ｐｒｏｔａｍｉｎｅ，ＲＰ）－核糖核酸（ＲＮＡ）复合物（ＲＰ－ＲＮＡ　Ｃｏｍｐｌｅｘｅｓ）免疫大鼠，得到了特异的抗ＲＰ抗血清，并用Ｉｍｍｕｎｏｄｏｔｔｉｎｇ和Ｉｍｍｕｎｏｂｌｏｔｔｉｎｇ方法验证... 用大鼠精核蛋白（Ｒａｔ　Ｐｒｏｔａｍｉｎｅ，ＲＰ）－核糖核酸（ＲＮＡ）复合物（ＲＰ－ＲＮＡ　Ｃｏｍｐｌｅｘｅｓ）免疫大鼠，得到了特异的抗ＲＰ抗血清，并用Ｉｍｍｕｎｏｄｏｔｔｉｎｇ和Ｉｍｍｕｎｏｂｌｏｔｔｉｎｇ方法验证了其特异性。该抗血清和ＲＰ有特异的反应，并和哺乳动物小鼠和羊的精核蛋白有一定程度交叉反应，而与体细胞类型核蛋白（Ｈ１，Ｈ２ａ，Ｈ２ｂ，Ｈ３，Ｈ４）无交叉反应。并对制备该抗血清的意义予以讨论。 展开更多

关键词 精子 细胞 精子发生 鱼精蛋白

原文传递

鲱精蛋白与鲱精酮蛋白结构的拉曼光谱研究 被引量：2

17

作者 许以明 李传友 王桂玲 《光散射学报》 1997年第1期7-11,共5页

鲱精蛋白和鲱精酮蛋白的拉曼光谱研究表明它们的结构有明显的不同之处：（１）鲱精蛋白的二级结构以α－螺旋为主，鲱精酮蛋白以α－螺旋和β－折叠为主。（２）两者有不同之处除构象灵敏的酰胺Ⅲ，Ｃ－Ｃ，Ｃ－Ｎ基团以外还有构象不灵... 鲱精蛋白和鲱精酮蛋白的拉曼光谱研究表明它们的结构有明显的不同之处：（１）鲱精蛋白的二级结构以α－螺旋为主，鲱精酮蛋白以α－螺旋和β－折叠为主。（２）两者有不同之处除构象灵敏的酰胺Ⅲ，Ｃ－Ｃ，Ｃ－Ｎ基团以外还有构象不灵敏的与Ｏ＝Ｃ－Ｎ，Ｎ－Ｈ和Ｃ＝Ｏ有关的酰胺Ⅳ，Ⅴ，Ⅵ。（３）属于甲基、亚甲基的一系列谱线的变化明显。上述３点均说明了鲱精蛋白转氨后发生了构型的变化。与“蛋白质Ｎ端除去氨基以后生成ＲＣＯＣＯＮＨ酮肽相联基团” 展开更多

关键词 鲱精蛋白 鲱精酮蛋白 转氨 拉曼光谱

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鲱精DNA纤维水合状态的拉曼分析 被引量：1

18

作者 余多慰 柯惟中 张锡然 《光散射学报》 1997年第1期1-6,共6页

本文对鲱精ＤＮＡ纤维２９００～３４００ｃｍ－１区间的拉曼光谱特征模进行分析，发现反映主链骨架Ｃ－Ｈ振动的２９６４和２９５０ｃｍ－１模对ＤＮＡ纤维空间构象有敏感性。在不同水合状态下，结合水Ｏ－Ｈ伸缩振动３２０４ｃｍ－１... 本文对鲱精ＤＮＡ纤维２９００～３４００ｃｍ－１区间的拉曼光谱特征模进行分析，发现反映主链骨架Ｃ－Ｈ振动的２９６４和２９５０ｃｍ－１模对ＤＮＡ纤维空间构象有敏感性。在不同水合状态下，结合水Ｏ－Ｈ伸缩振动３２０４ｃｍ－１模比３２２０ｃｍ－１相对稳定，是计算纤维水合参数的重要依据。用公式２．５９２６×Ｉ２９６４／Ｉ３２０４求出的结合水分子的数量及样品相对湿度值，与Ｐｒｅｓｃｏｔ的数据相比。 展开更多

关键词 鲱精 脱氧核糖核酸 拉曼光谱 水合 DNA纤维

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整合素LFA-1研究进展 被引量：2

19

作者 于长清 马金柱 崔玉东 《安徽农学通报》 2011年第19期50-53,共4页

整合素是白细胞表面受体的主要家族,主要介导细胞与细胞外基质间的黏附,调节白细胞的迁移、存活、增殖和血管生成等过程中发挥关键作用。LFA-1作为白细胞整合素的重要成员具有复杂结构和重要生物学功能,该文就其近年研究进展情况做一综述。

关键词 整合素 LFA-1 Α亚单位 Β亚单位

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鲢鱼(Aristichthys nobilis)鱼精蛋白的纯化和鉴定 被引量：11

20

作者 谢俊杰 熊瑜 +2 位作者 赵利 佘世望 李华栋 《江西科学》 2001年第4期214-217,共4页

采用SephadexG_5 0凝胶层析、CM_SepharoseCL 6B离子交换层析及反相高压液相色谱等步骤从鲢鱼鱼精蛋白的粗品中分离得到一种具有抗菌活性的蛋白质。经SDS_PAGE及生物质谱鉴定 ,该蛋白质为单一组份 ,分子量为 1 3331 .9Da。该蛋白分子中... 采用SephadexG_5 0凝胶层析、CM_SepharoseCL 6B离子交换层析及反相高压液相色谱等步骤从鲢鱼鱼精蛋白的粗品中分离得到一种具有抗菌活性的蛋白质。经SDS_PAGE及生物质谱鉴定 ,该蛋白质为单一组份 ,分子量为 1 3331 .9Da。该蛋白分子中碱性氨基酸总量为 33.4 % ,N_末端序列为NH2 _Pro_Gln_Arg_His_Lys。 展开更多

关键词 鲢鱼 鱼精蛋白 纯化 鉴定 分子量 碱性氨基酸 N-末端序列 抗菌活性

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