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解旋酶RecQ5生物学功能的研究进展
1
作者 支力强 马巍 曾思翔 《癌变·畸变·突变》 CAS CSCD 2014年第5期389-391,395,共4页
人类RecQ解旋酶是一种多功能DNA解旋酶，在DNA损伤修复及维护基因组稳定性中均起着重要作用。目前，对于RecQ解旋酶家族的研究主要集中于RecQ2～4这3个成员上，对另外2个RecQ酶的研究比较少，尤其是RecQ5解旋酶。因此，本文对RecQ5解旋... 人类RecQ解旋酶是一种多功能DNA解旋酶，在DNA损伤修复及维护基因组稳定性中均起着重要作用。目前，对于RecQ解旋酶家族的研究主要集中于RecQ2～4这3个成员上，对另外2个RecQ酶的研究比较少，尤其是RecQ5解旋酶。因此，本文对RecQ5解旋酶在DNA复制、重组、修复以及在肿瘤易感性方面的生物学作用作一综述。 展开更多
关键词 RecQ5解旋酶 DNA复制 同源重组 DNA修复 肿瘤易感性
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以mRNA技术培育生物医药产业新质生产力的实证分析——以浙江省为例
2
作者 劳慧敏 李超 +1 位作者 沈泓 周武源 《中国现代应用药学》 北大核心 2025年第15期2721-2725,共5页
目的探讨浙江省如何利用mRNA技术培育生物医药产业新质生产力,以提升产业竞争力,缩小与全球领先地区的差距。方法通过文献调研、专利分析和实地考察,综合评估浙江省在mRNA领域的科研实力、创新平台、产业化基础,并识别其在技术壁垒、资... 目的探讨浙江省如何利用mRNA技术培育生物医药产业新质生产力,以提升产业竞争力,缩小与全球领先地区的差距。方法通过文献调研、专利分析和实地考察,综合评估浙江省在mRNA领域的科研实力、创新平台、产业化基础,并识别其在技术壁垒、资金短缺、产业链协同不足和监管审批滞后等方面面临的主要挑战。结果浙江省在mRNA研究和产业化方面已具备一定基础,但与国际先进水平相比,仍存在关键技术储备不足、融资难度大、产业链协同性弱和监管审批效率低等问题。提出的对策包括加强关键技术研发、优化资金和人才资源配置、促进产学研医深度合作和完善政策环境。结论浙江省需通过强化mRNA技术攻关、提升资源配置效率、深化产业合作和优化政策支持,以加速mRNA技术在生物医药产业的转化应用,培育产业新动能,提升整体竞争力,形成具有全球影响力的生物医药产业新质生产力。 展开更多
关键词 信使核糖核酸 生物医药产业 新质生产力 实证分析 浙江省
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酶定向固定化策略在生物传感器中应用
3
作者 王兴保 马耀宏 +7 位作者 薛云龙 黄晓珍 邵越 于毅 王丙莲 刘庆艾 张立鹤 公维丽 《生物化学与生物物理进展》 北大核心 2025年第2期374-394,共21页
酶电极生物传感器具有灵敏、高效、特异性强以及器型小巧等特点,在生命科学研究、疾病诊断和监控等领域展现出广阔的应用前景,酶的固定化是决定酶电极生物传感器性能(稳定性、灵敏性、重现性)的关键步骤,通过随机固定化(物理吸附、共价... 酶电极生物传感器具有灵敏、高效、特异性强以及器型小巧等特点,在生命科学研究、疾病诊断和监控等领域展现出广阔的应用前景,酶的固定化是决定酶电极生物传感器性能(稳定性、灵敏性、重现性)的关键步骤,通过随机固定化(物理吸附、共价交联等)容易引起酶活力下降、固定化稳定性低等问题,而利用氨基酸残基突变、亲和肽融合以及核苷酸特异结合等优化酶分子空间取向,为解决随机固定化问题提供了新的可能。本文对基于定点突变引入带有官能团的特定氨基酸(赖氨酸、组氨酸、半胱氨酸、非天然氨基酸)、通过基因工程融合亲和肽(金结合肽、碳材料结合肽、碳水化合物结合结构域)及利用核苷酸与目标酶(蛋白质)之间的特异性结合等策略来实现酶分子传感元件定向固定化的原理、优缺点以及在酶电极生物传感器上的应用进展进行了系统综述,并对多种传感界面固定化酶表征技术的应用领域、各方法的优点和应用局限性进行了探讨,以期为高性能酶传感元件创制及酶电极传感器的制造提供理论和技术指导。 展开更多
关键词 酶固定化 酶电极 生物传感器 酶分子空间取向
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生物化学在北京大学的发展历史回顾
4
作者 朱圣庚 《中国生物化学与分子生物学报》 北大核心 2025年第1期22-30,共9页
1952年新中国为加强高等院校建设进行院系调整,于1953年在北京大学生物学系人体及动物生理专业内设生物化学专业课,并成立生物化学教研室。1956年在北京大学设立了综合性大学中的首个生物化学专业,教学计划兼顾生物学和化学两个学科的基... 1952年新中国为加强高等院校建设进行院系调整,于1953年在北京大学生物学系人体及动物生理专业内设生物化学专业课,并成立生物化学教研室。1956年在北京大学设立了综合性大学中的首个生物化学专业,教学计划兼顾生物学和化学两个学科的基础,并以重基础、重实践、启发式为主要原则。科研计划则有三个重点:蛋白质结构与功能、神经生化、核酸在遗传信息表达中的作用。张龙翔的蛋白质课题组最早在国内合成八肽,并测定胰蛋白酶自溶过程中化学结构与性质的变化,测定了大熊猫乳酸脱氢酶M链序列以此提出分类新依据。后期进行分子设计,在此基础上建立蛋白质工程国家重点实验室。徐长法和茹炳根通过生物工程技术构建了新型导向溶栓剂。沈同和王镜岩研究大脑在低温和缺氧条件下的代谢,王镜岩进而研究神经肽。沈同和朱圣庚发展了多种分离纯化核酸的方法,朱圣庚通过逆转座子整合遗传信息,并借助噬菌体展示芯片分离到多种特异抗原,并制得相应抗体。陈同度研究蛋白质变性过程化学结构和性质的变化,以及营养学和生物氧化还原反应。王志美协助陈同度继续吴宪的蛋白质变性理论研究。生化教研室十分重视社会服务,做好帮助兄弟院校培训师资的工作,中美生物化学联合招生项目(CUSBEA)以及出版生物化学教材等。改革开放以来大量引进人才,充分发挥课题组作用,生物化学教学和科研取得一系列新的成果。然而生物化学正面临一些概念上的巨大转变,以及大科学工程的需要,因此我们仍坚持教研室的组织形式,以便对教学和科研工作中遇到的问题及时展开研讨和协调。 展开更多
关键词 生物化学 发展历史 专业设置 教学计划 科研成果 社会服务
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生物毒素:从致命威胁到医药创新
5
作者 刘中华 《中国生物化学与分子生物学报》 北大核心 2025年第10期1377-1379,共3页
生物毒素广泛存在于动物、植物和微生物中,是生物在长期进化过程中形成的捕食、防御和竞争的“化学武器”,主要包括蛋白质、多肽及小分子化合物等。相比一般化学毒物,生物毒素具有高活性、强靶向性和分子多样性,既可能对人类健康构成威... 生物毒素广泛存在于动物、植物和微生物中,是生物在长期进化过程中形成的捕食、防御和竞争的“化学武器”,主要包括蛋白质、多肽及小分子化合物等。相比一般化学毒物,生物毒素具有高活性、强靶向性和分子多样性,既可能对人类健康构成威胁,也在疾病机理研究与药物开发中展现出独特价值。代表性药物如卡托普利、肉毒毒素、齐考诺肽及GLP-1受体激动剂,奠定了毒素应用的里程碑。目前已有百余种毒素类候选药物进入临床试验,覆盖多类重大疾病。但该领域仍面临资源挖掘效率低、结构与机制解析不足、高毒性及合成改造受限等挑战。未来,随着多组学、人工智能与合成生物学的发展,将实现生物毒素的高效发现、低毒化改造与精准应用,推动从基础研究向临床转化。 展开更多
关键词 生物毒素 研究历程 发展现状和趋势 创新药物
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间充质干细胞外泌体的研究进展与临床应用 被引量：3
6
作者 付学奇 曾琳琳 刘洋 《吉林大学学报(理学版)》 北大核心 2025年第1期207-215,共9页
间充质干细胞外泌体(MSC-Exos)是一类在实验研究及临床应用中具有巨大潜力的纳米级囊泡,含有多种生物分子,包括miRNA、mRNA、蛋白质和脂质等,具有介导细胞信号传导和参与调控受体细胞的功能.基于MSC-Exos的重要作用,从研究进展及临床应... 间充质干细胞外泌体(MSC-Exos)是一类在实验研究及临床应用中具有巨大潜力的纳米级囊泡,含有多种生物分子,包括miRNA、mRNA、蛋白质和脂质等,具有介导细胞信号传导和参与调控受体细胞的功能.基于MSC-Exos的重要作用,从研究进展及临床应用等方面综述MSC-Exos在促进组织修复、免疫调节和神经保护方面的显著效果,尤其在自身免疫性疾病、神经退行性疾病、心血管疾病及肿瘤方面的治疗中发挥重要作用,并分析其临床应用面临一系列尚未解决的问题及应用普及的挑战,包括阐明作用机制、分离提取纯化技术、制订标准化生产规则、确定剂量和给药途径、增强稳定性和降低免疫原性等,为解决这些局限性,实现MSC-Exos在临床上的广泛应用提供依据. 展开更多
关键词 间充质干细胞 外泌体 免疫疾病 神经疾病 临床应用
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circHERC4_041通过编码蛋白质抑制心肌成纤维细胞纤维化表型作用 被引量：1
7
作者 高原 周川孟 +8 位作者 伍华燕 王娅 吴茹诗 关佩莹 方俊涛 徐金东 刘宇鹏 胡志琴 单志新 《中国生物化学与分子生物学报》 北大核心 2025年第3期393-403,共11页
越来越多的研究表明,环状RNA在心肌纤维化中发挥重要调节作用。人环状RNA表达谱芯片检测结果提示,环状RNA circHERC4_041在心衰患者心肌中表达增加,RT-qPCR验证发现,与健康器官捐献者(n=18)心肌组织相比,心衰患者(n=19)中circ HERC4_04... 越来越多的研究表明,环状RNA在心肌纤维化中发挥重要调节作用。人环状RNA表达谱芯片检测结果提示,环状RNA circHERC4_041在心衰患者心肌中表达增加,RT-qPCR验证发现,与健康器官捐献者(n=18)心肌组织相比,心衰患者(n=19)中circ HERC4_041的表达显著升高。荧光原位杂交(FISH)检测证实,circHERC4_041在人心肌细胞AC16胞质中丰富存在。利用腺病毒介导在小鼠心肌成纤维细胞(mCFs)中过表达circHERC4_041可抑制mCFs中纤维化相关蛋白质表达。细胞增殖检测实验、细胞划痕和Transwell实验结果显示,过表达circHERC4_041时,mCFs的增殖和迁移能力被抑制(P<0.001)。序列分析提示,circHERC4_041包含潜在的核糖体进入序列和开放阅读框,蛋白质免疫印迹检测证实,circHERC4_041可翻译516个氨基酸的HERC4-516aa蛋白质,其主要定位于细胞胞质中。细胞功能实验证实,circHERC4_041通过特异翻译HERC4-516aa来抑制心肌成纤维细胞的纤维化表型(P<0.05)。通过IP-MS筛选和Co-IP鉴定证实,HERC4-516aa与转谷氨酰胺酶2(TGM2)具有特异的相互结合作用,并通过蛋白酶体途径促进TGM2降解。而利用腺病毒介导在mCFs中过表达TGM2可逆转HERC4-516aa对mCFs纤维化表型的抑制作用。本文证实,circHERC4_041翻译的HERC4-516aa蛋白质通过与TGM2相互作用,有效抑制心肌成纤维细胞的纤维化表型。 展开更多
关键词 心肌纤维化 环形RNA circHERC4_041 翻译 心肌成纤维细胞
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生物酶活性测试技术研究进展 被引量：1
8
作者 侯晓妮 刘明东 +3 位作者 吕昊 叶德萍 马丽侠 周李华 《生物技术进展》 2025年第1期58-66,共9页
生物酶在工业、农业、医药、环境保护等领域生产中发挥着巨大的作用。活性作为生物酶的主要性能参数,直接影响着生物酶的质量和应用。随着科学技术的发展,生物酶活性检测也产生了许多新技术新方法。回顾了国内外生物酶活性主流的测试技... 生物酶在工业、农业、医药、环境保护等领域生产中发挥着巨大的作用。活性作为生物酶的主要性能参数,直接影响着生物酶的质量和应用。随着科学技术的发展,生物酶活性检测也产生了许多新技术新方法。回顾了国内外生物酶活性主流的测试技术和方法,包括光谱法、电化学法、色谱法、放射性标记法、质谱法、表面等离子体共振法、表面增强拉曼光谱法,综述了不同方法的基本原理、适用条件及优缺点,并提出了生物酶活性测试结果的准确性和可靠性的建议,以期对生物酶活性检测、方法选取、质量控制和产品应用提供指导。 展开更多
关键词 生物酶 活性 光谱法 电化学法 色谱法 质谱法 表面等离子体共振法 表面增强拉曼光谱法
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西安地区糖尿病筛查人群异常血红蛋白表型和基因突变分析 被引量：1
9
作者 许楠 郭智 +2 位作者 梁亮 耿燕 李友琼 《现代检验医学杂志》 2025年第1期13-16,23,共5页
目的 了解西安地区糖尿病筛查人群异常血红蛋白的突变谱和表型。方法 选取2022年1~12月西安交通大学第二附属医院就诊的30 356例患者,采用高效液相色谱法检测糖化血红蛋白Hb A1c,当提示有异常峰时,同时进行血细胞检测分析和血红蛋白分析... 目的 了解西安地区糖尿病筛查人群异常血红蛋白的突变谱和表型。方法 选取2022年1~12月西安交通大学第二附属医院就诊的30 356例患者,采用高效液相色谱法检测糖化血红蛋白Hb A1c,当提示有异常峰时,同时进行血细胞检测分析和血红蛋白分析,最后Sanger法进行DNA序列分析。结果 西安地区糖尿病筛查人群的异常血红蛋白检出率为0.092%(28/30 356)。共检出7种异常血红蛋白28例,分别为Hb E(10例)、Hb G-Coushatta(6例)、Hb G-Taibei(6例)、Hb Q-Thailand(2例)、Hb North Manchester(2例)、Hb Ottawa(1例)和Hb Queens(1例)。其中1例是Hb GTaibei并发IVS Ⅱ-659_664 (-GCAATA),为首次世界报道。有7例Hb E血液学表型改变外,其他异常血红蛋白表型是正常的。除了Hb G-Coushatta和Hb Ottawa未见干扰糖化检测外,其他5种异常血红蛋白均影响了糖化检测结果。结论 西安地区糖尿病筛查人群存在一定的异常血红蛋白携带,以Hb E,Hb G-Taibei,Hb G-Coushatta为主。绝大部分异常血红蛋白的血液学表型是正常的,但是它们会干扰Hb A1c检测结果。 展开更多
关键词 西安地区 异常血红蛋白 高效液相色谱法 糖化血红蛋白
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丙泊酚调控巨噬细胞极化对支气管哮喘小鼠气道炎症反应和Toll样受体4-NOD样受体蛋白3通路的影响 被引量：1
10
作者 邵忠新 李世英 《实用临床医药杂志》 2025年第6期13-19,共7页
目的探讨丙泊酚(Pro)调控巨噬细胞极化对支气管哮喘(BA)小鼠气道炎症反应和Toll样受体4-NOD样受体蛋白3(TLR4-NLRP3)通路的影响。方法将40只BA造模小鼠随机分为BA组、Pro低剂量(Pro-L)组、Pro高剂量(Pro-H)组、Pro-H+脂多糖(LPS)组,每... 目的探讨丙泊酚(Pro)调控巨噬细胞极化对支气管哮喘(BA)小鼠气道炎症反应和Toll样受体4-NOD样受体蛋白3(TLR4-NLRP3)通路的影响。方法将40只BA造模小鼠随机分为BA组、Pro低剂量(Pro-L)组、Pro高剂量(Pro-H)组、Pro-H+脂多糖(LPS)组,每组10只。另取10只正常小鼠作为Control组。检测各组小鼠肺功能[最大呼气流量(PEF)、每分钟通气量(VE)],肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞(EOS)、淋巴细胞(LYM)和中性粒细胞(NEU)数量,白细胞介素(IL)-4、IL-10、IL-5和IL-13水平;采用流式细胞术检测外周血巨噬细胞M1型和M2型水平,辅助性T细胞(Th)1和Th2细胞比例;采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清γ干扰素(IFN-γ)、免疫球蛋白E(IgE)水平;采用苏木精-伊红(HE)染色观察肺组织病理形态;采用Western blot检测肺组织中cleaved caspase-3、TLR4、NLRP3和Caspase-1蛋白表达。结果与Control组比较,BA组小鼠肺组织有明显损伤,PEF、VE、IL-10、巨噬细胞M1型、Th1细胞比例、IFN-γ水平降低,EOS、LYM、NEU数量以及IL-4、IL-5、IL-13、巨噬细胞M2型水平、Th2细胞比例、IgE、cleaved caspase-3、TLR4、NLRP3和Caspase-1蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05);与BA组相比,Pro-L组、Pro-H组小鼠肺组织有明显损伤,PEF、VE、IL-10、巨噬细胞M1型水平、Th1细胞比例、IFN-γ水平升高,EOS、LYM、NEU数量以及IL-4、IL-5、IL-13水平、巨噬细胞M2型水平、Th2细胞比例、IgE、cleaved caspase-3、TLR4、NLRP3和Caspase-1蛋白表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05);LPS可显著减弱Pro对BA小鼠的改善作用(P<0.05)。结论Pro可能通过抑制TLR4-NLRP3信号通路来调节BA小鼠巨噬细胞极化和免疫反应,降低炎症反应程度,改善肺组织形态和肺功能。 展开更多
关键词 丙泊酚 巨噬细胞 支气管哮喘 TOLL样受体4 NOD样受体蛋白3 辅助性T细胞 炎症反应 组织病理学
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线粒体-细胞核逆行信号的通讯作用 被引量：1
11
作者 张雯龙 权磊 赵云罡 《生物化学与生物物理进展》 北大核心 2025年第7期1687-1707,共21页
线粒体是细胞的主要能量生产者,也是细胞的信号中枢,还参与许多生理病理过程,包括细胞凋亡、炎症、氧化应激、神经元病变、肿瘤发生发展等。线粒体是半自主的细胞器,其功能的发挥依赖于细胞核的支持,线粒体的生物发生和线粒体稳态的维... 线粒体是细胞的主要能量生产者,也是细胞的信号中枢,还参与许多生理病理过程,包括细胞凋亡、炎症、氧化应激、神经元病变、肿瘤发生发展等。线粒体是半自主的细胞器,其功能的发挥依赖于细胞核的支持,线粒体的生物发生和线粒体稳态的维持受到核基因组的严格控制,两者形成信号相互作用网络,通过通讯交流来调节细胞的能量代谢、基因表达以及功能状态。线粒体损伤或出现功能障碍时,会将信号传递到细胞核,从而激活适应性的转录,调控多种核转录因子,影响核内基因的表达,调节细胞的代谢状态。这种由线粒体向细胞核传递的信号被称为“线粒体-细胞核逆行信号”。由于线粒体相关疾病具有高度的异质性,但终究会造成能量的缺损,这种缺损的后果首先反映在肌肉、神经等高能耗部位。因此,线粒体功能障碍导致的疾病往往是肌病、神经退行性疾病、代谢性疾病和肿瘤。线粒体效率较低,出现功能障碍、表观遗传修饰、线粒体代谢中间产物、线粒体DNA的释放和识别激活cGAS-STING信号通路等,都会促进肿瘤发生发展。通过研究线粒体向细胞核发送逆行信号的触发因素、主要分子途径以及调控网络,不仅可以加深对细胞内信号传递的理解,还可以揭示肿瘤、神经退行性疾病和2型糖尿病等多种疾病的发病新机制。本文综述了线粒体和细胞核之间已知的逆行信号通路,其通讯功能作用及通讯失调后的病理后果,通过靶向调控线粒体逆行信号所涉及的主要分子和蛋白质,可能为这些疾病的治疗提供新策略。 展开更多
关键词 线粒体通讯 线粒体逆行信号 线粒体疾病
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基于酵母双杂交系统的小麦燕麦类似蛋白TaALP-4A互作蛋白分析
12
作者 何宁 晁岳恩 +3 位作者 王沙沙 黄超 汪庆昌 宋晓 《种子》 北大核心 2025年第7期42-48,共7页
为进一步解析燕麦类似蛋白(ALPs)调控小麦面团强度的分子机制,从面团强度较高的郑麦158中克隆了小麦燕麦类似蛋白基因TaALP-4A。结果表明,TaALP-4A基因在小麦种子不同发育时期的相对表达量最高,推测TaALP-4A基因可能参与小麦种子发育过... 为进一步解析燕麦类似蛋白(ALPs)调控小麦面团强度的分子机制,从面团强度较高的郑麦158中克隆了小麦燕麦类似蛋白基因TaALP-4A。结果表明,TaALP-4A基因在小麦种子不同发育时期的相对表达量最高,推测TaALP-4A基因可能参与小麦种子发育过程中面团强度相关基因的调控。利用酵母双杂交技术筛选郑麦158的cDNA文库,共获得了4个可能与TaALP-4A互作的蛋白,它们分别是半胱氨酸水解酶B-like(XM_044577944.1)、巯基蛋白酶(XM_044541518.1)、类萌发素蛋白GLP 8-5(XM_044511312.1)以及生长素响应因子ARF6-like(XM_044562954.1)。3个代表性候选蛋白(半胱氨酸水解酶B-like、巯基蛋白酶、类萌发素蛋白GLP)的回转验证结果表明,它们与TaALP-4A均存在互作关系,推测TaALP-4A可能与这些蛋白质相互作用,参与了小麦贮藏蛋白中醇溶蛋白的降解以及其他生殖生长过程。 展开更多
关键词 小麦 燕麦类似蛋白 TaALP-4A 表达分析 酵母双杂交 回转验证
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长非编码RNA在相分离调控中的作用
13
作者 杨新玲 张栋栋 常晓彤 《中国生物化学与分子生物学报》 北大核心 2025年第3期384-392,共9页
相分离是细胞内生物分子由单一均相混合物形成2种不相溶的液滴凝聚体过程,是细胞内分子凝聚体和无膜细胞器形成的主要驱动力。相分离不仅在多种生理活动中发挥重要的动态调控作用,而且调控神经退行性疾病和癌症等多种疾病的发生发展。... 相分离是细胞内生物分子由单一均相混合物形成2种不相溶的液滴凝聚体过程,是细胞内分子凝聚体和无膜细胞器形成的主要驱动力。相分离不仅在多种生理活动中发挥重要的动态调控作用,而且调控神经退行性疾病和癌症等多种疾病的发生发展。已有研究发现,长非编码RNA(lncRNA)与相分离密切相关,这为理解lncRNA的作用机制打开了新的视角,成为近年来非编码RNA领域的研究热点。本文重点介绍了LncRNA SLERT作为分子伴侣与DDX21蛋白相互作用,影响核仁纤维中心区/高密度纤维区(FC/DFCs)的相分离;LINC00657(NORAD)与PUM蛋白形成NP小体,驱动PUM蛋白的相分离而抑制其活性,促进基因组的稳定性;dilncRNA调控DNA损伤应答小RNAs(DDRNA)、p53结合蛋白1(53BP1)的相分离,lncRNA LINP1相分离液滴与Ku蛋白结合促进DNA损伤修复;LncRNA SNHG9、MELTF-AS1、MALR分别驱动LATS1、YBX1、ILF3蛋白质的相分离发挥促癌lncRNAs作用,GIRGL、LncFASA分别调控CAPRIN1、PRDX1的相分离在癌症发展中发挥抑癌基因作用;lncRNA XIST通过相分离驱动X染色体失活的研究。总之,本文综述了lncRNAs通过调节相分离在细胞核无膜细胞器的形成、基因组稳定性与DNA损伤修复、肿瘤发生发展和X染色体失活等病理生理过程中的最新研究进展。本文表明长非编码RNA可通过调节相分离,参与多种病理生理过程,有望为相分离介导的疾病的治疗提供新的方向。 展开更多
关键词 相分离 长非编码RNA 无膜细胞器 DNA损伤修复 癌症 X染色体失活
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基于CRISPR/Cas12a基因转化的条斑紫菜基因编辑底盘藻株构建
14
作者 王淑瑞 郇丽 +3 位作者 顾文辉 王旭雷 牛建峰 王广策 《海洋科学》 北大核心 2025年第5期34-46,共13页
CRISPR/Cas系统是新一代基因编辑技术的代表, CRISPR/Cas12a系统具有蛋白分子量小、组装简单、脱靶率低等优势。本研究首先根据条斑紫菜密码子偏好性优化获得了PyCas12a基因序列,并在潮霉素抗性标记基因PyAph7前添加了可被CRISPR/Cas12... CRISPR/Cas系统是新一代基因编辑技术的代表, CRISPR/Cas12a系统具有蛋白分子量小、组装简单、脱靶率低等优势。本研究首先根据条斑紫菜密码子偏好性优化获得了PyCas12a基因序列,并在潮霉素抗性标记基因PyAph7前添加了可被CRISPR/Cas12a识别的PAM位点,借助原核表达获得Cas12a蛋白,通过细胞外切割实验验证了其核酸内切酶对潮霉素抗性基因的剪切活性。之后以条斑紫菜(Pyropia yezoensis)叶状体为材料,利用基因枪转化,筛选获得阳性藻株。经基因组鉴定,获得转入了Cas12a核酸酶基因的条斑紫菜基因转化藻株4株,转录组水平鉴定其中3株存在稳定表达。本研究不仅为条斑紫菜功能基因的探索提供了理想材料,也为基于CRISPR/Cas12a基因编辑系统的条斑紫菜良种培育奠定了基础,在基础研究与应用研究方面均具有重要意义及广阔应用前景。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas12a 条斑紫菜(Pyropia yezoensis) 原核表达 细胞外切割 细胞内表达
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ATP合酶动态结构的开放探索性实验教学
15
作者 刘旖璇 刘洋 +4 位作者 朱文苑 胡晓倩 昌增益 秦咏梅 王青松 《中国生物化学与分子生物学报》 北大核心 2025年第5期625-631,共7页
开放探索性实验教学是生物化学实验课程近年来开展的一种教学模式,其中的ATP合酶项目利用活细胞蛋白质光交联和高通量凝胶电泳技术对ATP合酶动态结构开展分析研究,将前沿科研成果转化为实验教学内容,以关键科学问题为线索,充分调动学生... 开放探索性实验教学是生物化学实验课程近年来开展的一种教学模式,其中的ATP合酶项目利用活细胞蛋白质光交联和高通量凝胶电泳技术对ATP合酶动态结构开展分析研究,将前沿科研成果转化为实验教学内容,以关键科学问题为线索,充分调动学生学习理论知识与实验技术的主动性和创造力。开放实验模块的教学设计首先是让学生以小组合作的方式开展文献阅读和实验设计,ATP合酶项目中学生能够加深对ATP合酶结构与功能的认识,学习和实践科学研究中的创新技术。实验中学生自行完成实验材料的准备和实验条件的摸索,通过活细胞蛋白质光交联技术处理大肠杆菌样品,学习高通量凝胶电泳装置的组装、制胶和应用,逐步优化和完善实验操作及处理以获得高质量的实验结果,观察和分析ATP合酶ε亚基在不同生理条件下的动态结构变化。开放实验模块的教学过程充分体现以学生为中心的教学理念,该教学模式自开展以来获得了学生的普遍认可和支持。ATP合酶项目的教学内容实现了实验课教学与前沿科研实验的紧密结合,让学生在自主探究过程中深入体会实验技术在解决关键问题中的改造和创新。该实验内容兼具探索性和综合性,充分锻炼学生分析和解决问题的实践能力。 展开更多
关键词 ATP合酶 动态结构变化 光交联技术 高通量凝胶电泳 开放探索性实验
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肺癌血浆外泌体蛋白质组学研究
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作者 张勇 易观华 +5 位作者 罗海欣 郑雅琳 刘雯婧 顾雨帆 苏涛 曾文娟 《河南师范大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第4期31-38,I0006,共9页
肺癌是全球范围内最常见且致命的恶性肿瘤之一,其高发病率和死亡率对人体健康构成了严重威胁.为了提高肺癌的早期诊断准确率和治疗效果,需要建立无创或微创、高灵敏度和高特异性的诊断方法.外泌体是一种胞外囊泡,携带多种生物大分子,广... 肺癌是全球范围内最常见且致命的恶性肿瘤之一,其高发病率和死亡率对人体健康构成了严重威胁.为了提高肺癌的早期诊断准确率和治疗效果,需要建立无创或微创、高灵敏度和高特异性的诊断方法.外泌体是一种胞外囊泡,携带多种生物大分子,广泛分布于体液中,并参与细胞间信息交换,对肿瘤的发生发展及侵袭转移有关键作用,可能成为肺癌生物标志物的重要来源.研究结合Ti^(4+)-IMAC快速分离纯化外泌体方法以及无标记定量蛋白质组学技术,对肺癌患者血浆样本中的外泌体蛋白质组进行了深入分析.结果鉴定出41个肺癌患者特异性上调或下调表达的血浆外泌体蛋白质,能够有效区分健康人群和肺癌患者.进一步的生信分析揭示,如HDAC3、NAPA、ELP3、HAT1、RAB5B、PDIA5、SARAF等外泌体蛋白质的特异性表达与肺癌的进展显著相关,为肺癌的早期诊断与筛查提供了重要数据支撑. 展开更多
关键词 肺癌 血浆 外泌体 生物标志物 质谱 蛋白质组
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肉苁蓉多糖通过NLRP3/GSDMD信号通路调控焦亡治疗小鼠溃疡性结肠炎
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作者 马广礼 李清 《食品工业科技》 北大核心 2025年第16期427-438,共12页
本研究旨在探讨肉苁蓉多糖(Cistanche deserticola polysaccharides,CDPS)对葡聚糖硫酸钠(Dextran sulphate sodium,DSS)诱导的小鼠溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis,UC)的治疗效果及其机制。将小鼠随机分为正常组、模型组、CDPS高、低... 本研究旨在探讨肉苁蓉多糖(Cistanche deserticola polysaccharides,CDPS)对葡聚糖硫酸钠(Dextran sulphate sodium,DSS)诱导的小鼠溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis,UC)的治疗效果及其机制。将小鼠随机分为正常组、模型组、CDPS高、低剂量组和阳性对照药物柳氮磺胺吡啶组。除正常组外其他3组自由饮用3.5%DSS水溶液,诱导UC的同时灌胃相应药物。给药结束后,记录小鼠一般状态;观察结肠组织病理变化;酶联免疫法检测血清和结肠组织中炎症因子和炎症介质水平;qPCR法测定结肠组织中炎症因子和焦亡通路相关蛋白mRNA的表达水平;免疫组织化学和免疫荧光法分析小鼠结肠组织中ZO-1和Occludin蛋白表达水平、细胞凋亡程度和焦亡通路蛋白的表达水平。结果显示,与模型组相比,CDPS高、低剂量组显著改善了DSS诱导的小鼠一般状况,显著改善了结肠病理状态,降低结肠病理评分(分别降低64.43%和48.50%,P<0.01);CDPS高、低剂量组显著降低了血清和结肠组织中TNF-α、IL-1β、IL-6和IFN-γ(P<0.01或P<0.05)的水平,同时提高了IL-10水平(P<0.01或P<0.05)。此外,CDPS高、低剂量组也能显著抑制结肠组织中iNOS和COX-2的表达(P<0.01或P<0.05)。免疫组织化学和免疫荧光结果显示,CDPS高、低剂量组能够抑制NLRP3、Caspase-1和GSDMD-N的表达,从而减少细胞焦亡的发生。qPCR分析也证实,CDPS高、低剂量组能够下调IL-1β、IL-6、TNF-α、NLRP3、Caspase-1和GSDMD的mRNA表达说明CDPS对DSS诱导的小鼠溃疡性结肠炎具有显著的治疗效果,其机制可能与抑制炎症反应、改善肠道屏障功能、减少细胞凋亡和焦亡有关。 展开更多
关键词 肉苁蓉多糖 溃疡性结肠炎 细胞焦亡 肠道屏障 炎症
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花椒精油纳米脂质体的制备、表征及抑菌作用研究
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作者 李西波 张玉琳 +2 位作者 张皓月 白蓉蓉 张继 《天然产物研究与开发》 北大核心 2025年第11期1985-1993,共9页
为解决花椒精油(Zanthoxylum bungeanum essential oil,ZBEO)易挥发、稳定性差等问题,本研究以蛋黄卵磷脂与胆固醇为壁材,采用薄膜水合-高压均质法构建花椒精油纳米脂质体(Zanthoxylum bungeanum essential oil nanoliposomes,ZBEO-NL)... 为解决花椒精油(Zanthoxylum bungeanum essential oil,ZBEO)易挥发、稳定性差等问题,本研究以蛋黄卵磷脂与胆固醇为壁材,采用薄膜水合-高压均质法构建花椒精油纳米脂质体(Zanthoxylum bungeanum essential oil nanoliposomes,ZBEO-NL)。通过包封率、透射电镜、动态光散射、傅里叶变换红外光谱、X射线衍射、热重分析及储藏稳定性测试等多维度表征手段系统评估ZBEO-NL的结构特性,并采用纸片扩散法探究其抑菌活性。结果表明,纳米脂质体的包封率达88.7%±1.2%,呈单层囊泡结构,水合粒径为161.69±2.4 nm(Zeta电位=-32.12±0.8 mV),显著优于空白脂质体(158.80±3.1 nm,Zeta电位=-27.08±1.2 mV)。傅里叶变换红外光谱与X射线衍射分析表明,磷脂分子与ZBEO间通过氢键及疏水作用形成非晶态复合物,热重分析证实其热分解温度延迟至435.6℃。储藏实验显示,4℃条件下14天包封率仅下降8.2%。抑菌实验表明,ZBEO-NL对大肠杆菌(抑菌圈直径18.55±0.33 mm)及枯草芽孢杆菌(14.37±0.17 mm)的抑制作用显著高于游离精油(16.25±0.80、12.24±0.10 mm)。本研究成功构建了高稳定性的ZBEO纳米递送系统,并基于磷脂-胆固醇仿生膜结构开发了ZBEO-NL,为天然抗菌剂的产业化应用提供了理论依据与技术支撑。 展开更多
关键词 花椒精油 纳米脂质体 表征 稳定性 抑菌活性
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外泌体分离技术研究进展
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作者 李帅 刘亚婷 仰大勇 《化学学报》 北大核心 2025年第4期428-438,共11页
外泌体是来源于母细胞的小细胞外囊泡,包裹有核酸、蛋白等内容物,能够动态实时地反映母细胞的生理病理状态,因此在药物递送、疾病诊断和治疗等生物医学领域有广泛的应用.外泌体应用的第一步是分离和纯化,不管是从血液、唾液等体液还是... 外泌体是来源于母细胞的小细胞外囊泡,包裹有核酸、蛋白等内容物,能够动态实时地反映母细胞的生理病理状态,因此在药物递送、疾病诊断和治疗等生物医学领域有广泛的应用.外泌体应用的第一步是分离和纯化,不管是从血液、唾液等体液还是细胞培养上清中获取外泌体,都需要对其进行分离纯化,以去除不需要的杂质.基于外泌体的尺寸、密度、电荷、组成,已经开发出了诸多分离方法,比如超速离心、超滤、尺寸排阻色谱、聚合物沉淀、免疫亲和等,这些传统的分离方法已经非常成熟,尤其是超速离心,被誉为是外泌体分离的金标准,为广大研究者所接受.然而这些方法在分离纯度、效率、处理量、操作便捷性等方面各有优缺点,因此将多种分离方法联用是一种新思路.此外,随着化学、材料学、生物学、医学、工程学、机械学等学科的发展和交叉,越来越多新兴的技术被开发出来,比如微流控法、基于流体流动原理分离、热泳法、脂质识别分离、DNA适配体亲合法等,在一定程度上提高了外泌体的分离效率和纯度.在本综述中,详细总结了传统分离方法和新兴分离方法的最新进展,并对未来发展进行了展望,以期促进该领域的发展,推动外泌体技术的产业化. 展开更多
关键词 外泌体 外泌体分离 细胞外囊泡 微流控 DNA适配体
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石油烃污染胁迫下中肋骨条藻蛋白质组学研究
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作者 陈财珍 许翠娅 +5 位作者 杨芳 陈宇锋 许贻斌 郑盛华 江良荣 罗冬莲 《渔业研究》 2025年第3期306-316,共11页
【目的】研究石油烃污染胁迫条件下中肋骨条藻(Skeletonema costatum)的蛋白质组的变化。【方法】本研究通过同重同位素相对与绝对定量(iTRAQ)试验,利用反相液质联用(RPLC-MS)技术,分析石油烃慢性毒性处理与急性毒性处理导致的中肋骨条... 【目的】研究石油烃污染胁迫条件下中肋骨条藻(Skeletonema costatum)的蛋白质组的变化。【方法】本研究通过同重同位素相对与绝对定量(iTRAQ)试验,利用反相液质联用(RPLC-MS)技术,分析石油烃慢性毒性处理与急性毒性处理导致的中肋骨条藻蛋白质组差异性变化。【结果】与对照组相比,慢性毒性处理组和急性毒性处理组分别鉴定了112个和169个显著差异表达蛋白质(DEPs),共有40个交集DEPs,且其中20个蛋白质的亚细胞结构均定位到叶绿体;上调DEPs有5个共同的显著富集(P<0.05)GO条目,分别是碳水化合物衍生物代谢过程、碳水化合物衍生物的生物合成过程、无机二磷酸酶活性、谷氨酰胺-果糖-6-磷酸转氨酶(异构化)活性、碳水化合物衍生结合,没有共同显著富集通路;下调DEPs有三磷酸腺甙(ATP)水解耦合质子输运、质子转运型三磷酸腺甙酶(V1结构域)2个共同的显著富集(P<0.05)GO条目,有导管酸分泌通路、抗生素的生物合成通路2条共同显著富集(P<0.05)通路;与毒性响应相关的热休克蛋白(蛋白ID:220971590)在2种毒性处理后均显著上调(P<0.05)。【结论】石油烃污染胁迫条件下中肋骨条藻的DEPs变化与石油烃的污染胁迫响应机制有关,为石油烃在分子水平上的致毒机理研究奠定基础。 展开更多
关键词 石油烃 中肋骨条藻 污染胁迫 蛋白质组学 差异表达蛋白(DEPs)
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