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间充质干细胞影响NADHP氧化酶4抑制氧化应激通路治疗2型糖尿病肾病
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作者 冯淑琪 金国荣 +9 位作者 薛群航 贺敏 王泽航 要嘉欣 陈龙 王玉姣 张安秀 何生 周冰蕊 解军 《中国生物化学与分子生物学报》 北大核心 2025年第5期730-740,共11页
糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)是糖尿病最严重的并发症之一,是终末期肾病的主要原因。DN患者的病理机制与长期血糖控制不佳密切相关,持续高血糖状态通过诱导肾内氧化应激反应,引发足细胞损伤及肾小管间质炎症浸润,进而导致蛋白... 糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)是糖尿病最严重的并发症之一,是终末期肾病的主要原因。DN患者的病理机制与长期血糖控制不佳密切相关,持续高血糖状态通过诱导肾内氧化应激反应,引发足细胞损伤及肾小管间质炎症浸润,进而导致蛋白尿、肾小球硬化和纤维化等不可逆肾损伤。人脐带间充质干细胞(human umbilical cord derived mesenchymal stem cells,hUC-MSCs)因其良好的抗氧化应激作用有望为DN提供新的解决方案。本研究建立了DN小鼠模型,通过尾静脉注射hUC-MSCs(1×10^(6)/只)来达到治疗DN的目的。空腹血糖和腹腔注射葡萄糖耐量实验(intraperitoneal glucose tolerance test,IPGTT)数据显示,hUC-MSCs能显著降低DN小鼠的空腹血糖水平(22.5±3.0 vs 14.7±1.1,P<0.01)并提高其血糖调节能力(P<0.05)。同时,DN小鼠经hUC-MSCs治疗后肾功能得到改善并且氧化应激产物水平下降,例如尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、尿肌酐(urinary creatinine,Ucr)、尿蛋白(urinary protein,PRO)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)的水平均显著降低(P<0.05)。通过苏木素-伊红(hematoxylin-eosin staining,H&E)染色、糖原(periodic acid-schiff stain,PAS)染色和天狼星红染色对肾组织形态学进行分析,经hUC-MSCs治疗后DN小鼠的肾小球间质增生、肾小球肥大和肾小管炎性间质浸润等病理状态均得到减轻。免疫组化、Real-time RT-PCR和免疫印迹等结果显示,hUC-MSCs治疗可降低氧化应激主要相关蛋白酶NADPH氧化酶4(NADPH oxidase 4,NOX4)和硫氧还蛋白相互作用蛋白(thioredoxin interacting protein,TXNIP)的表达(P<0.05),减少活性氧(reactive oxygen species,ROS)的产生。同时,在体外实验中选择人肾皮质近曲小管上皮细胞(human renal proximal tubular epithelial cells,HK-2 cells)进行验证,使用高糖处理,采用hUC-MSCs的条件培养基(mesenchymal stem cell-conditioned medium,MSC-CM)进行处理,免疫印迹结果显示,NOX4和TXNIP的表达都得到抑制(P<0.05),ROS表达降低。综上,hUC-MSCs治疗可以降低DN小鼠的血糖水平,改善肾功能下降以及病理损伤,其作用可能与下调NOX 4的表达从而抑制TXNIP介导的氧化应激有关。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 人脐带间充质干细胞 氧化应激 NADPH氧化酶4 硫氧还蛋白相互作用蛋白
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迷走神经活化的胆碱能抗炎通路在糖尿病肾病中的作用 被引量:2
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作者 张萍 杨博 常晓彤 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期341-347,共7页
糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)是糖尿病患者死亡的主要驱动因素,其患病率在全球范围内呈上升趋势。DN的发生发展与复杂的慢性低度炎症密切相关。在糖尿病患者中,高血糖和高血脂会导致损伤相关分子模式的释放,触发Janus激酶/信号... 糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)是糖尿病患者死亡的主要驱动因素,其患病率在全球范围内呈上升趋势。DN的发生发展与复杂的慢性低度炎症密切相关。在糖尿病患者中,高血糖和高血脂会导致损伤相关分子模式的释放,触发Janus激酶/信号转导与转录激活子3(Janus kinase/signal transducer and activator of transcription 3,JAK/STAT3)、核因子-κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)、磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K)-蛋白质激酶B(protein kinase B,PKB或Akt)等促炎细胞信号通路的活化,以及白介素-1(interleukin-1,IL-1)、IL-6和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)等促炎细胞因子的产生,这些促炎因子是导致肾损伤的关键致病介质,从糖尿病的初始阶段到晚期肾衰竭中均发挥着多重作用。迷走神经是自主神经系统的关键组成部分,其通过介导胆碱能抗炎通路(cholinergic anti-inflammatory pathway,CAP)发挥抗炎作用。在DN时,迷走神经活性下降,胆碱能抗炎系统受损,促炎与抗炎反应失调,肾的炎症和损伤加重。而利用神经免疫相互作用,通过迷走神经刺激术激活CAP,则可调控炎症信号通路及炎性细胞因子,改善DN的炎症和损伤状态。本文将对炎症细胞因子和炎症信号通路在DN发生发展中的作用,以及迷走神经活化的胆碱能抗炎通路对DN的改善作用进行综述,以期为DN等慢性炎症相关疾病的治疗策略研究及应用提供理论基础。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 炎症 迷走神经 胆碱能抗炎通路
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荧光法测定SD大白鼠不同脑区的单胺类神经递质 被引量:21
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作者 汪丛莹 庞志功 +1 位作者 汪宝琪 张鹏 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1999年第1期101-103,共3页
以荧光光谱法定量地研究了不同浓度的司考林作用下,鼠脑组织中去甲肾上腺素、多巴胺和5-羟色胺的定量变化,从而表达了中枢神经递质的变化规律.
关键词 荧光法 去甲肾上腺素 多巴胺 羟色胺 测定
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毛细管电泳安培测定鼠单个交感神经细胞中儿茶酚胺类神经递质 被引量:12
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作者 胡深 庞代文 +4 位作者 王宗礼 程介克 李之望 樊友珍 胡宏镇 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1998年第6期752-756,共5页
用自组装的毛细管电泳微电极安培检测系统,分析了鼠的单个交感神经细胞。大白鼠经麻醉、微解剖及酶解分离出新鲜的单个交感神经细胞。采用全细胞进样,用异丙肾上腺素 作内标。测定了儿茶酚胺类神经递质去甲肾上腺素和肾上腺素。检测... 用自组装的毛细管电泳微电极安培检测系统,分析了鼠的单个交感神经细胞。大白鼠经麻醉、微解剖及酶解分离出新鲜的单个交感神经细胞。采用全细胞进样,用异丙肾上腺素 作内标。测定了儿茶酚胺类神经递质去甲肾上腺素和肾上腺素。检测限分别达 57 amol和 59 amol。八个活细胞分析结果,每个细胞平均含去甲肾上腺素 455 amol及肾上腺素 65 amol。 展开更多
关键词 分析 儿茶酚胺 神经递质 去甲肾上腺素 肾上腺素
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五株鸽副粘病毒国内分离株F基因片段的克隆与分子特性 被引量:11
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作者 刘华雷 周斌 +2 位作者 郁斌 王永坤 陈溥言 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期378-381,共4页
Five isolates of pigeon paramyxovirus Ⅰ(PPMV-Ⅰ),designated as YZ9712,NC9701,NP9904,PB9601 and SZa9803,were isolated from pigeons during epizootics recently in China.The F gene functional domains were amplified by ... Five isolates of pigeon paramyxovirus Ⅰ(PPMV-Ⅰ),designated as YZ9712,NC9701,NP9904,PB9601 and SZa9803,were isolated from pigeons during epizootics recently in China.The F gene functional domains were amplified by RT-PCR and then cloned into pGEMDR○-T vector and sequenced.A phylogenetic tree based on nucleotide sequence of the F gene segment revealed all the strains were divided into seven genotypes,and five PPMV-Ⅰ isolates similar to strains 1168/84 and 760/83 were grouped into subgenotype Ⅵb.The homology between these five isolates were 98.3%~99.4% and 97.8%~99.4% at the nucleotide and amino acid levels respectively.The deduced amino acid sequence at the cleavage site of the F protein was of virulent strains112K-R-Q-K-R-F117?All the isolates had highly genetic similarity to the England reference strain 1168/84 and Wales reference strain 760/83 of PPMV-Ⅰ,suggesting that they might have originated from a common ancestor. 展开更多
关键词 F基因 分子特性 Ⅰ型副粘病毒病 鸽瘟 接触性传染病 分离株 养鸽 克隆 RNA 节段
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多巴胺在硫堇衍生化自组装膜修饰金电极上的伏安行为及其安培测定 被引量:14
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作者 徐静娟 汪云 +1 位作者 方惠群 陈洪渊 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1998年第4期428-430,共3页
研究了多巴胺(DA)在硫堇衍生化自组装膜修饰金电极(Th-SAM/AUu)上的电化学行为。DA在该修饰电极上的△Ep~70 mV,循环伏安峰形对称,氧还峰电流之比接近 1,为准可逆反应。研究了温度、pH对DA氧化还原的... 研究了多巴胺(DA)在硫堇衍生化自组装膜修饰金电极(Th-SAM/AUu)上的电化学行为。DA在该修饰电极上的△Ep~70 mV,循环伏安峰形对称,氧还峰电流之比接近 1,为准可逆反应。研究了温度、pH对DA氧化还原的影响,并求得了其热力学参数。在选定的条件下,峰电流与DA的浓度在1.0 × 10-6~1.0×10-3mol/L的范围内呈线性关系,相关系数为0.9923,可用于DA的灵敏测定。 展开更多
关键词 自组装膜 硫堇 多巴胺 化学修饰电极 测定
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大鼠海马神经元膜离子通道随培养时间变化的特点 被引量:10
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作者 杨胜 刘振伟 +2 位作者 万勤 周文霞 张永祥 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期151-155,共5页
目的和方法 :采用膜片钳全细胞记录技术观察新生大鼠海马神经元体外分散培养过程中 ,基本离子通道和膜参数随培养天数延长而变化的规律。结果 :在 7d ,14d和 2 1d时电压依赖性钠电流 (Voltage dependentNa+ cur rent,INa)和延迟整流性... 目的和方法 :采用膜片钳全细胞记录技术观察新生大鼠海马神经元体外分散培养过程中 ,基本离子通道和膜参数随培养天数延长而变化的规律。结果 :在 7d ,14d和 2 1d时电压依赖性钠电流 (Voltage dependentNa+ cur rent,INa)和延迟整流性钾电流 (DelayedrectifierK+ current,Ik)的幅度无显著性差异。电压依赖性钙电流 (Voltage dependentCa2 + current,ICa)和ICa密度则持续增大 ,进一步研究表明 ,L型钙通道 (L typevoltage dependentCa2 +channel,L VDCC)的增加是其主要原因。NMDA诱发电流随培养时间延长而明显增加。结论 :钙通道和NMDA受体所介导的Ca2 + 内流是神经元易感于衰老和死亡的重要机制之一。 展开更多
关键词 大鼠 海马 神经元 膜离子通道 NMDA 膜片钳 电压依赖性离子通道
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神经生长因子对骨折愈合影响的研究进展 被引量:25
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作者 姚建华 时述山 李亚非 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 2000年第10期996-998,共3页
关键词 神经生长因子 骨折愈合 骨组织 表达 骨修复
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用修饰电极导数伏安法同时测定多巴胺和肾上腺素 被引量:17
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作者 何星存 李平 莫金垣 《分析测试学报》 CAS CSCD 2000年第1期19-21,22,共4页
研究了2,6 - 吡啶二甲酸在玻碳电极上电化学聚合的实验条件及修饰电极的电化学特性, 发现该聚合物膜修饰电极对多巴胺和肾上腺素的电化学氧化有显著的催化作用, 而对抗坏血酸等阴离子没有响应。 利用在修饰电极上循环伏安阴极过... 研究了2,6 - 吡啶二甲酸在玻碳电极上电化学聚合的实验条件及修饰电极的电化学特性, 发现该聚合物膜修饰电极对多巴胺和肾上腺素的电化学氧化有显著的催化作用, 而对抗坏血酸等阴离子没有响应。 利用在修饰电极上循环伏安阴极过程多巴胺和肾上腺素的峰电位不同, 采用阴极化导数伏安法可同时测定多巴胺和肾上腺素。 展开更多
关键词 修饰电极 多巴胺 肾上腺素 导数伏安法 神经递质
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神经营养因子(NGF、NT-3、BDNF及CNTF)和受体trkA、trkB、trkC在正常大鼠脊髓和胳鼠脊髓移植体的免疫组织化学研究 被引量:14
10
作者 周长满 杨青峰 +2 位作者 鄂玲玲 单文戈 鞠躬 《神经解剖学杂志》 CSCD 北大核心 1999年第1期27-30,共4页
本研究采用免疫组织化学方法观察了NGF家族(NGF、NT-3、BDNF)和非NGF家族的CNTF以及NGF家族因子受体trkA、trkB、trkC在正常大鼠脊髓腰段的分布和胎鼠脊髓移植体在移植后4周的表达。在正常大鼠脊髓腰段,各神经营养因子及受体反应物... 本研究采用免疫组织化学方法观察了NGF家族(NGF、NT-3、BDNF)和非NGF家族的CNTF以及NGF家族因子受体trkA、trkB、trkC在正常大鼠脊髓腰段的分布和胎鼠脊髓移植体在移植后4周的表达。在正常大鼠脊髓腰段,各神经营养因子及受体反应物主要存在于脊髓灰质,特别是前角的运动神经元。但在脊髓后角的分布稍有不同,BDNF阳性细胞的胞浆染色较深,胞核不染色;而NT-3的胞核染色较胞浆为深,核仁不染色。在胎鼠脊髓移植体,NGF、BDNF、CNTF和NT-3及受体trkA、trkB、trkC均有不同程度的染色。本实验结果揭示了在正常大鼠脊髓神经元内各神经营养因子及受体的表达,提示神经营养因子除具有靶源性来源以外,还有神经元自分泌的产物。而在胎鼠移植体内和其周围组织神经营养因子及其受体的表达,可能是在移植体内的移植细胞自分泌和成鼠脊髓损伤的刺激所引起的,这在移植体的存活和发育中有重要作用。 展开更多
关键词 神经营养因子 受体 脊髓移植 免疫组化
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胞外ATP的作用、来源和命运 被引量:14
11
作者 黄亿华 翁星河 周曾铨 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 1998年第2期115-119,共5页
胞外ATP(三磷酸腺苷)浓度的改变,影响许多重要的生理功能,诸如神经递质作用、血小板凝聚、血管紧张、心脏功能和肌肉收缩等等。胞外ATP作为递质直接影响神经效应器接点和/或调制其它神经递质以及通过第二信使调节细胞活动,... 胞外ATP(三磷酸腺苷)浓度的改变,影响许多重要的生理功能,诸如神经递质作用、血小板凝聚、血管紧张、心脏功能和肌肉收缩等等。胞外ATP作为递质直接影响神经效应器接点和/或调制其它神经递质以及通过第二信使调节细胞活动,都是由膜上不同的ATP受体(P2嘌呤受体)或ATP激活的离子通道介导的。本文从胞外ATP的递质作用的发现与确证,胞外ATP的来源、ATP的受体。 展开更多
关键词 胞外ATP 递质作用 嘌呤受体 核苷酸酶
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五羟色胺和多巴胺与攻击行为的关联研究进展 被引量:13
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作者 段云峰 吴晓丽 +1 位作者 王涛 金锋 《生命科学》 CSCD 2013年第10期1027-1035,共9页
五羟色胺(5-HT)和多巴胺(DA)是影响攻击行为的重要神经递质。参与这两种神经递质合成和分解、运输及信号转导等过程的物质均可能影响攻击行为,如影响5-HT作用的色氨酸、色氨酸羟化酶、单胺氧化酶、5-羟吲哚乙酸及5-HT转运体和5-HT受体;... 五羟色胺(5-HT)和多巴胺(DA)是影响攻击行为的重要神经递质。参与这两种神经递质合成和分解、运输及信号转导等过程的物质均可能影响攻击行为,如影响5-HT作用的色氨酸、色氨酸羟化酶、单胺氧化酶、5-羟吲哚乙酸及5-HT转运体和5-HT受体;影响DA作用的多巴胺β羟化酶和儿茶酚胺邻位甲基转移酶以及DA转运体。未来攻击行为研究,应考虑色氨酸自身代谢、受体亚型及其他单胺类和儿茶酚胺类神经递质的影响。将肠道微生物纳入攻击行为研究也是未来研究的新方向。 展开更多
关键词 五羟色胺 多巴胺 攻击行为 肠道微生物 肠道
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高效液相色谱-电化学检测法测定大鼠脊髓灌流液单胺类递质及其代谢产物 被引量:6
13
作者 田津斌 方明 +2 位作者 刘雪松 许伟 韩济生 《分析试验室》 CAS CSCD 1998年第1期86-89,共4页
用反相离子对高效液相色谱-电化学检测法分离并同时测定了大鼠脊髓灌流液中部分单胺类神经递质及其代谢产物。选择了较为理想的色谱条件,使生物样品的检测限达到80~670pg,单胺类递质代谢产物的回收率保持在83%~106%... 用反相离子对高效液相色谱-电化学检测法分离并同时测定了大鼠脊髓灌流液中部分单胺类神经递质及其代谢产物。选择了较为理想的色谱条件,使生物样品的检测限达到80~670pg,单胺类递质代谢产物的回收率保持在83%~106%范围内。 展开更多
关键词 HPLC 电化学检测器 单胺 大鼠 脊髓 神经递质
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高效液相色谱-柱后固定化酶反应器-电化学检测法分析大鼠脑微透析液中的乙酰胆碱和胆碱 被引量:8
14
作者 叶惟泠 马晓峰 梅镇彤 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 1998年第5期375-378,共4页
建立了用高效液相色谱分离-柱后固定化酶反应器酶解-电化学检测器检测酶解最终产物H2O2的方法,分析了麻醉和自由活动大鼠脑微透析液中乙酰胆碱(ACh)和胆碱(Ch)的含量。至少在0.2~100μmol/L范围内ACh和... 建立了用高效液相色谱分离-柱后固定化酶反应器酶解-电化学检测器检测酶解最终产物H2O2的方法,分析了麻醉和自由活动大鼠脑微透析液中乙酰胆碱(ACh)和胆碱(Ch)的含量。至少在0.2~100μmol/L范围内ACh和Ch的浓度与其响应的线性关系良好,它们的检测极限都可达50fmol。对高效液相色谱结合固定化酶反应器的分析方法作了简要的讨论。 展开更多
关键词 大鼠脑微透析液 乙酰胆碱 胆碱 HPLC 分析
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5-羟色胺转运体基因5-HTTLPR与儿童孤独症相关性的初步研究 被引量:4
15
作者 李雅妹 孙晓勉 +1 位作者 何文 岳静 《中国神经精神疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期158-159,共2页
关键词 5-HT 儿童孤独症 5-羟色胺转运体 CA 基因 相关性 初步研究 中国汉族 多态性
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高效液相色谱法测定痕量左旋多巴、甲基多巴、多巴胺和去甲肾上腺素 被引量:11
16
作者 朱爱芝 刘军 傅承光 《分析测试学报》 CAS CSCD 1997年第6期47-49,共3页
以含5%甲醇和0.02mol/L邻苯二甲酸氢钾的缓冲液(pH 3.52)为流动相,采用安培型电化学检测器,实现了左旋多巴、甲基多巴、多巴胺和去甲肾上腺素在Shim-pack CLC-ODS(5μm,150 mm×6... 以含5%甲醇和0.02mol/L邻苯二甲酸氢钾的缓冲液(pH 3.52)为流动相,采用安培型电化学检测器,实现了左旋多巴、甲基多巴、多巴胺和去甲肾上腺素在Shim-pack CLC-ODS(5μm,150 mm×60mmI.D)柱上的完全分离及E=+0.6 V电压下于玻碳电极上的同时检测。该法线性范围达2个数量级,相关系数大于0.9997,最小检出限为 28~94pg,实验回收率为 84.9%~91.3%。该法快速、灵敏、准确,适用于体液中痕量代谢药物的分析,可用于临床监测。 展开更多
关键词 左旋多巴 甲基多巴 多巴胺 去甲肾上腺素
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儿茶酚胺类神经递质在锇配位聚合物和Nafion双层膜修饰碳基电极上的电催化氧化及其痕量测定 被引量:15
17
作者 倪静安 鞠先 +1 位作者 陈洪渊 DónalLeech 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1999年第2期224-226,共3页
多巴胺(DA)、肾上腺素(EP)和去甲肾上腺素(NE)等儿茶酚胺类神经递质是生物分子电化学研究的重要对象之一[1,2].它们在固体电极上的电子传递速率非常缓慢,且其本身或反应产物易在电极表面吸附,导致电极表面的钝化[... 多巴胺(DA)、肾上腺素(EP)和去甲肾上腺素(NE)等儿茶酚胺类神经递质是生物分子电化学研究的重要对象之一[1,2].它们在固体电极上的电子传递速率非常缓慢,且其本身或反应产物易在电极表面吸附,导致电极表面的钝化[3].利用具有特定功能的化学修饰电... 展开更多
关键词 多巴胺 肾上腺素 去甲肾上腺素 测定 儿茶酚胺
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口蹄疫病毒O/NY00株基因组L片段的克隆及其基因特征 被引量:2
18
作者 郑敏 金宁一 +6 位作者 张洪勇 刘棋 韦婷 郭建刚 李华明 尹革芬 鲁会军 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期124-130,共7页
采用RT—PCR方法对口蹄疫病毒O/NY00株基因组L片段进行了分子克隆和序列测定。结果表明:获得的O/NY00株基因组L片段长7805nt,其中包括715at的5’非编码区和6999nt的多聚蛋白编码区。将O/NY00株与其它参考毒株进行序列比较,结果显示:O/N... 采用RT—PCR方法对口蹄疫病毒O/NY00株基因组L片段进行了分子克隆和序列测定。结果表明:获得的O/NY00株基因组L片段长7805nt,其中包括715at的5’非编码区和6999nt的多聚蛋白编码区。将O/NY00株与其它参考毒株进行序列比较,结果显示:O/NY00株与O/SKR/2000、O/UKG/3/2001遗传关系最近,而与其它毒株遗传关系较远,属于O型口蹄疫ME-SA拓扑型PanAsia株的成员。与Cathay拓扑型的代表毒株O/TAW/97比较,两者在主要抗原位点1和位点3呈现出明显的以拓扑型为特征的氨基酸差别,提示两拓扑型毒株之间有较高的抗原差异。 展开更多
关键词 毒株 口蹄疫病毒 遗传关系 基因组 非编码区 抗原位点 序列比较 基因特征 RT—PCR方法 SA
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丙二醛对大鼠海马神经元结构的破坏和钙离子稳态的影响 被引量:4
19
作者 蔡建光 汤华 +1 位作者 唐晖 印大中 《生命科学研究》 CAS CSCD 2011年第4期283-289,共7页
脂质过氧化中间产物丙二醛(Malondialdehyde,MDA)在生物体内表现了广泛的生物毒性,MDA也是机体过度训练和运动性疲劳的重要生理指标.采用光学显微镜和透射式电子显微镜观察不同浓度MDA作用后海马神经元形态和超微结构的变化,并采用荧光... 脂质过氧化中间产物丙二醛(Malondialdehyde,MDA)在生物体内表现了广泛的生物毒性,MDA也是机体过度训练和运动性疲劳的重要生理指标.采用光学显微镜和透射式电子显微镜观察不同浓度MDA作用后海马神经元形态和超微结构的变化,并采用荧光分光光度法测定原代培养的海马神经元中Ca2+-ATPase活性的变化和胞质游离钙离子水平的变化,探讨MDA对海马神经元形态和结构上的破坏及神经元钙离子稳态的影响.在光镜下可观察到MDA作用下神经元突触变短,胞体肿胀,出现细胞死亡或凋亡的形态特征;在电镜下可观察到线粒体结构的明显破坏,内膜上的嵴颗粒减少或消失;同时MDA还通过抑制质膜Ca2+-ATPase的活性和其它的途径,破坏神经元胞质游离Ca2+稳态.结果表明,MDA可通过破坏海马神经元的结构和影响胞质中钙离子稳态,破坏神经元的生理功能,在机体运动性中枢疲劳形成中可能发挥重要作用. 展开更多
关键词 丙二醛 运动性疲劳 海马神经元 钙离子稳态
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江浙蝮蛇神经生长因子在大肠杆菌中的表达及纯化 被引量:3
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作者 郭丽英 钟晓燕 +1 位作者 吴祥甫 周元聪 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期293-296,共4页
将江浙蝮蛇(AgkistrodonhalysPalas,A.h.P.)神经生长因子(Nervegrowthfactor,NGF)基因克隆于分泌型原核表达载体pET22b+,以C端融合了6个组氨酸的形式在大肠杆菌BL... 将江浙蝮蛇(AgkistrodonhalysPalas,A.h.P.)神经生长因子(Nervegrowthfactor,NGF)基因克隆于分泌型原核表达载体pET22b+,以C端融合了6个组氨酸的形式在大肠杆菌BL21(DE3)中进行了IPTG诱导表达。SDSPAGE分析确定有一比理论值略大的诱导表达条带,其表达量占全菌蛋白质的20%左右,且表达蛋白质主要是以包涵体的形式存在。用6mol/L的盐酸胍溶解包涵体后,利用固定化金属离子(Ni2+)配体亲和层析一步纯化目的蛋白质,纯度可达80%左右。对该重组肽进行变复性研究。利用PC12细胞进行生物活力测定,证明表达产物具有NGF生物活力。 展开更多
关键词 蝮蛇 神经生长因子 融合表达 PC12细胞
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