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Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(Vero细胞)中游离甲醛含量柱前衍生-高效液相色谱检测方法的建立及验证
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作者 杨欢 非成瑞 +3 位作者 王思捷 申雪 杨力 吴凡 《中国生物制品学杂志》 2025年第1期53-60,共8页
目的建立Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(Vero细胞)中游离甲醛含量柱前衍生-高效液相色谱检测方法,并进行验证及应用,以期为测定疫苗中游离甲醛含量提供新的方法。方法样品用2,4-二硝基苯肼衍生后,经C18色谱柱(5μm,120?,4.6 mm×250 mm... 目的建立Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(Vero细胞)中游离甲醛含量柱前衍生-高效液相色谱检测方法,并进行验证及应用,以期为测定疫苗中游离甲醛含量提供新的方法。方法样品用2,4-二硝基苯肼衍生后,经C18色谱柱(5μm,120?,4.6 mm×250 mm)分离,分别对检测波长、流动相比例、流速、衍生时间、温度、缓冲液和衍生容器等检测条件进行优化,并对方法进行专属性、线性、重复性、准确性、检测限和定量限、耐用性验证。采用优化的方法检测20批脊髓灰质炎灭活疫苗(Vero细胞)中游离甲醛含量。结果色谱条件:以乙腈∶水体积分数70∶30为流动相,流速0.6 mL/min,波长352 nm进行测定;衍生条件:加入2,4-二硝基苯肼乙腈溶液0.5 mL和pH 5.0的缓冲液0.25 mL,60℃水浴20 min。该色谱分离条件能够有效分离2,4-二硝基苯肼及甲醛衍生物,且乙醛对测定结果无影响;甲醛标准品浓度在0.05~100μg/mL范围内与峰面积线性关系良好,r为0.9999;重复性试验中6次检测结果的相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为0.36%;9份加标供试品溶液甲醛含量回收率在102.0%~107.0%之间;检出限和定量限分别为0.025和0.05μg/mL;样品衍生后48 h能够稳定存在,耐用性较好。同一批次样品结果重复性较好,甲醛含量在4.5~9.9μg/剂之间。结论建立的方法具有测定范围宽、线性好、准确性高等优点,能够对Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(Vero细胞)中游离甲醛进行准确定量,可作为疫苗产品游离甲醛含量的辅助检测方法,对疫苗批签发和质量监管具有重要意义。 展开更多
关键词 高效液相色谱法 脊髓灰质炎灭活疫苗 甲醛 含量测定
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新型冠状病毒mRNA疫苗中蔗糖含量高效液相色谱-电喷雾检测器检测方法的建立及验证
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作者 吴凡 刘勤 +4 位作者 杨欢 申雪 王思捷 和文志 非成瑞 《中国生物制品学杂志》 2025年第11期1351-1357,共7页
目的建立高效液相色谱(high-performance liquid chromatography,HPLC)-电喷雾检测器(charged aerosol detection,CAD)法测定新型冠状病毒mRNA疫苗中的蔗糖含量,并对方法进行验证及初步应用,以期为更多mRNA疫苗中的蔗糖含量测定提供新... 目的建立高效液相色谱(high-performance liquid chromatography,HPLC)-电喷雾检测器(charged aerosol detection,CAD)法测定新型冠状病毒mRNA疫苗中的蔗糖含量,并对方法进行验证及初步应用,以期为更多mRNA疫苗中的蔗糖含量测定提供新的检测方法。方法色谱柱:Zorbax NH2(Agilent,4.6 mm×250 mm,5.0μm);色谱条件:以乙腈溶于水(乙腈50%)为流动相,流速0.8 mL/min,雾化温度70℃,检测器采集频率10 Hz,滤波3.6 s,柱温20℃。对方法的线性、定量限与检出限、专属性、重复性、准确性进行验证,并采用建立的方法检测3批新型冠状病毒mRNA疫苗中的蔗糖含量。结果蔗糖标准品浓度在0.25~6 mg/mL范围内与峰面积线性关系良好,相关系数(R)为0.9986;该方法检出限和定量限分别为0.03125和0.125 mg/mL;乳糖和蔗糖在本试验条件下能够完全分开,分离度为1.65;6份供试品峰面积的相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为2.4%;3个不同浓度的加标溶液回收率为101.3%~102.2%。采用建立的方法检测3批新型冠状病毒mRNA疫苗样品的蔗糖含量分别为81.3774、80.3390和74.1573 mg/mL。结论建立的HPLC-CAD方法测定范围宽,线性和重复性好,准确性高,能够对新型冠状病毒mRNA疫苗中的蔗糖进行准确定量。 展开更多
关键词 蔗糖含量 高效液相色谱法 电喷雾检测器 新型冠状病毒mRNA疫苗
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HPLC法测定α-乙酰乳酸脱羧酶中四环素残留量
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作者 邓鸣 朱斌 《中国酿造》 CAS 2013年第4期150-152,共3页
目的:建立α-乙酰乳酸脱羧酶中四环素残留量测定高效液相色谱法。方法:采用EDTA-Mcllvaine缓冲液提取样品,提取液经HLB固相萃取柱净化,以C18柱分离,乙腈-甲醇-0.01mol/L草酸溶液(12∶6∶82)为流动相,紫外检测器检测波长为350nm。结果:... 目的:建立α-乙酰乳酸脱羧酶中四环素残留量测定高效液相色谱法。方法:采用EDTA-Mcllvaine缓冲液提取样品,提取液经HLB固相萃取柱净化,以C18柱分离,乙腈-甲醇-0.01mol/L草酸溶液(12∶6∶82)为流动相,紫外检测器检测波长为350nm。结果:四环素的检测限(LOQ)为0.04mg/L;线性范围0.09mg/L^15.0mg/L;回收率为82.5%,RSD=2.6%(n=6)。结论:本实验建立的方法简便灵敏,结果准确可靠,重现性好,适用于α-乙酰乳酸脱羧酶中四环素残留量的测定。 展开更多
关键词 Α-乙酰乳酸脱羧酶 四环素 高效液相色谱法
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