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黄芪-全蝎药对对前列腺癌荷瘤裸鼠的影响 被引量:1
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作者 游旭军 文证 +5 位作者 郑青霞 王彬 邱俊峰 吴丽通 李其信 傅伟 《世界中医药》 北大核心 2025年第11期1855-1861,共7页
目的:探讨黄芪-全蝎对前列腺癌(PCa)荷瘤裸鼠瘤体和磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号和自噬靶点表达的影响。方法:将70只荷瘤裸鼠适应性饲养后制备成转移性前列腺癌PC-3细胞皮下瘤动物模型,随机分为7组:模型对照组,黄芪-全蝎... 目的:探讨黄芪-全蝎对前列腺癌(PCa)荷瘤裸鼠瘤体和磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号和自噬靶点表达的影响。方法:将70只荷瘤裸鼠适应性饲养后制备成转移性前列腺癌PC-3细胞皮下瘤动物模型,随机分为7组:模型对照组,黄芪-全蝎低、中、高剂量组,黄芪观察组,全蝎观察组,多西他赛观察组,每组10只;模型对照组给予等量生理盐水灌胃,黄芪-全蝎低、中、高剂量组每天分别予以黄芪1.17 g/kg-全蝎0.39 g/kg、黄芪2.54 g/kg-全蝎0.585 g/kg、黄芪3.9 g/kg-全蝎0.78 g/kg,黄芪观察组予以黄芪3.9 g/kg,全蝎观察组予以全蝎0.78 g/kg,多西他赛观察组每周腹腔注射给药10μL/1 g,共24 d;观察记录瘤体体积和重量情况;采用苏木精-伊红(HE)染色观察瘤体组织形态;免疫荧光(IF)分析瘤体微管相关蛋白轻链3(LC3)的表达;蛋白质印迹法和实时定量PCR(RT-qPCR)检测自噬相关基因1(Beclin1)、泛素结合蛋白(P62)、磷酸化磷脂酰肌醇-3-激酶(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)和其基因表达情况。结果:黄芪-全蝎可抑制瘤体生长(P<0.05),降低PCa细胞核染色趋势,且呈剂量依赖梯度;黄芪-全蝎可增强LC3荧光染色信号,促进自噬(P<0.05);黄芪-全蝎可上调瘤体组织Beclin1蛋白和基因表达,下调P62、p-PI3K、p-AKT以及p-mTOR蛋白和基因表达(P<0.05,P<0.01)。结论:黄芪-全蝎药对能够有效抑制PCa瘤体的生长,其机制可能与抑制PI3K/AKT信号和促进自噬相关。 展开更多
关键词 前列腺癌 黄芪-全蝎 药对 磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B信号 自噬 体内实验 荷瘤裸鼠 机制研究
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固本清源法联合内分泌疗法治疗前列腺癌系统评价
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作者 郑青霞 李其信 +4 位作者 傅伟 文证 陈颖雯 张泽政 游旭军 《亚太传统医药》 2025年第6期139-143,共5页
目的:系统评价中医固本清源法联合内分泌疗法对前列腺癌的临床疗效。方法:检索中国知网(CNKI)、万方数据库(WangFang Data)、中国生物医学文献数据库(CBM)、维普资讯中文期刊平台(VIP),检索时间均从创刊至2023年10月,收集固本清源法联... 目的:系统评价中医固本清源法联合内分泌疗法对前列腺癌的临床疗效。方法:检索中国知网(CNKI)、万方数据库(WangFang Data)、中国生物医学文献数据库(CBM)、维普资讯中文期刊平台(VIP),检索时间均从创刊至2023年10月,收集固本清源法联合内分泌疗法治疗前列腺癌的文献,筛选并对文献质量进行评价,提取相关数据,运用Review Manager 5.4软件进行Meta分析。结果:共纳入11项研究,合计639例前列腺癌患者。Meta分析结果显示,固本清源法联合内分泌疗法治疗前列腺癌,前列腺特异抗原PSA[SMD=-0.84,95%CI(-1.62,-0.07),P=0.03]、中医临床证候评分[SMD=-0.73,95%CI=(-1.24,-0.22),P=0.005],均低于单纯内分泌治疗组,Karnofsky功能状态评分[MD=7.39,95%CI=(5.30,9.49),P<0.00001],明显高于内分泌治疗组。结论:中医固本清源法联合内分泌疗法治疗前列腺癌可提高临床疗效,有效改善患者的临床症状,提高生存质量。 展开更多
关键词 固本清源法 内分泌疗法 前列腺癌 系统评价 随机对照试验
原文传递
中医药治疗少弱精子症的随机对照试验证据图分析
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作者 文证 郑青霞 +6 位作者 林子琦 李鸿涵 林美欣 刘晨光 李其信 傅伟 游旭军 《中国性科学》 2025年第7期112-118,共7页
目的利用证据图系统梳理中医药治疗少弱精子症的随机对照试验(RCT),了解该领域证据分布及质量,发现现有治疗少弱精子症相关研究存在的问题。方法检索中国知网、万方、维普、中国生物医学文献服务系统、PubMed、EMbase、Cochrane Librar... 目的利用证据图系统梳理中医药治疗少弱精子症的随机对照试验(RCT),了解该领域证据分布及质量,发现现有治疗少弱精子症相关研究存在的问题。方法检索中国知网、万方、维普、中国生物医学文献服务系统、PubMed、EMbase、Cochrane Library等数据库中收录的中医药治疗少弱精子症的相关文献,检索时间为建库至2024年6月。提取文献样本量、研究药物、疗程、结局指标等;依据Cochrane协助网偏倚风险评价工具进行质量评价;采用图、表展示结果。结果共收集RCT文献223篇;其中药物使用占比较大的是复方玄驹胶囊、五子衍宗丸、生精胶囊、麒麟丸;结局指标包括精子活力、精子存活率、临床有效率、不良反应等;文献质量方面,103篇的随机方法正确,10篇执行了分配隐藏及盲法。结论中医药治疗少弱精子症的RCT的中医病证信息不全,结局指标较少分析中医证候积分、配偶妊娠情况、不良反应,未分析心理健康状态;整体研究质量一般。建议后续研究按照中医诊疗标准统一中医证型,针对证型实施诊疗方案;建议研究人员构建中医药治疗少弱精子症的核心指标数据集,完善疗效评价体系,在开展RCT前,参照CONSORT制定试验方案;建议引入相关量表评估患者的心理健康状况,为后续进一步开展男性不育症与心理健康状况相关性研究建立一定的基础。 展开更多
关键词 少弱精子症 中医药 随机对照试验 证据图
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中医药治疗前列腺癌的临床研究证据图分析
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作者 郑青霞 文证 +4 位作者 李鸿涵 刘晨光 李其信 傅伟 游旭军 《中国性科学》 2025年第10期146-151,共6页
目的通过系统检索并整合分析中医药治疗前列腺癌的临床随机对照试验,对中医药治疗前列腺癌的整体证据分布进行归纳。方法计算机检索中国知网、万方数据库、维普数据库、中国生物医学文献服务系统、Pub Med、EMbase、Cochrane Library、W... 目的通过系统检索并整合分析中医药治疗前列腺癌的临床随机对照试验,对中医药治疗前列腺癌的整体证据分布进行归纳。方法计算机检索中国知网、万方数据库、维普数据库、中国生物医学文献服务系统、Pub Med、EMbase、Cochrane Library、Web of Science等数据库收录的中医药治疗前列腺癌的文献,检索时间为建库至2024年6月,提取并总结相关信息。结果共纳入115篇临床随机对照试验文献,年发文量总体呈上升趋势,但多数研究规模较小,样本量集中为50~<100例;干预疗程多为4~12周;治疗组以中西医治疗为主,口服中药汤剂是最常用的干预措施;观察指标以前列腺特异性抗原、体力状况、生活质量、不良反应等为主,对中医证候评分、病灶大小、疾病进展等指标的关注度较少。结论中医药治疗前列腺癌的优势良好,但多数文献研究质量一般,建议扩大样本量,对观察周期及临床证型等进一步规范,提高研究质量,以验证中医药治疗前列腺癌的独特疗效。 展开更多
关键词 前列腺癌 中医药疗法 临床随机对照试验 证据图
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HPLC-MS/MS法测定烟叶中7种植物内源激素 被引量:9
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作者 陈千思 卢紫舒 +14 位作者 沈少君 曾文龙 张月明 罗朝鹏 郑庆霞 王晨 张慧 翟妞 徐国云 金立峰 陈霞 于永杰 曹培健 刘萍萍 周会娜 《烟草科技》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第11期51-57,共7页
为获得烟草激素的质量分数数据,并分析其在抗性、生长发育等过程中的作用,采用高效液相色谱-三重四极杆质谱(HPLC-MS/MS)仪建立了同时分析烟叶中吲哚乙酸(IAA)、吲哚丁酸(IBA)、水杨酸(SA)、赤霉素(GA)、茉莉酸(JA)、脱落酸(ABA)和油菜... 为获得烟草激素的质量分数数据,并分析其在抗性、生长发育等过程中的作用,采用高效液相色谱-三重四极杆质谱(HPLC-MS/MS)仪建立了同时分析烟叶中吲哚乙酸(IAA)、吲哚丁酸(IBA)、水杨酸(SA)、赤霉素(GA)、茉莉酸(JA)、脱落酸(ABA)和油菜素内酯(BR)等7种植物激素质量分数的方法。采用多离子反应检测模式,获得7种植物激素的特征碎片离子峰,并测定了烟草花叶病毒(TMV)感染的烟叶样品。结果表明:(1)7种植物激素在线性范围内的相关系数(r)为0.998 6~0.999 5,方法的检出限为0.07~3.00μg/L,日内日间相对标准偏差(RSD)为0.44%~9.76%,回收率为77.82%~117.63%;(2)烟草花叶病毒感染极显著(p<0.01)地增加了烟叶中SA、IBA、JA、ABA的质量分数,显著(p<0.05)增加了烟叶中IAA的质量分数,同时显著(p<0.05)降低了烟叶中GA的质量分数;TMV病毒感染对BR的影响不大。该方法具有良好的灵敏度、精密度和回收率,可用于植物相关激素的同时分析。 展开更多
关键词 烟草 植物内源激素 高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS) 烟草花叶病毒(TMV)
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NtGGPPS4基因RNAi载体构建与功能分析 被引量:1
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作者 李锋 王根发 +7 位作者 武明珠 刘向真 郑庆霞 刘萍萍 王燃 罗朝鹏 杨军 魏攀 《烟草科技》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第12期10-14,共5页
为研究NtGGPPS4在合成烟草萜类化合物中的功能,构建了该基因的RNAi表达载体pHellsgate2-NtGGPPS4,通过农杆菌介导法进行遗传转化。使用荧光定量PCR技术检测转基因烟株中NtGGPPS4的表达量,采用溶剂萃取法从转基因烟株中提取西柏三烯醇和... 为研究NtGGPPS4在合成烟草萜类化合物中的功能,构建了该基因的RNAi表达载体pHellsgate2-NtGGPPS4,通过农杆菌介导法进行遗传转化。使用荧光定量PCR技术检测转基因烟株中NtGGPPS4的表达量,采用溶剂萃取法从转基因烟株中提取西柏三烯醇和质体色素,并分别使用GC-MS、LC-MS测定其含量。结果表明,在NtGGPPS4表达量明显下降的转基因烟株中,α-西柏三烯二醇、β-西柏三烯二醇、新黄质、紫黄质、β-胡萝卜素、叶绿素a、叶绿素b和叶黄素的含量明显下降。表明NtGGPPS4参与调控了烟叶中西柏三烯醇和质体色素的生物合成。 展开更多
关键词 牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶 萜类化合物 西柏三烯醇 质体色素 RNAI
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哈蟆油冻干中药饮片在新型冠状病毒肺炎辅助治疗中的应用 被引量:2
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作者 周宏博 赵文瑞 +2 位作者 郑庆霞 才莹 谢凤杰 《中国中西医结合急救杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期531-534,共4页
目的探讨将哈蟆油(林蛙油)冻干中药饮片用于新型冠状病毒肺炎(新冠肺炎)的辅助治疗是否能提高机体免疫力和抗应激能力,从而改善患者临床症状、控制病情进展、缩短治疗周期。方法收集2020年5月25日至6月17日牡丹江医学院附属红旗医院收治... 目的探讨将哈蟆油(林蛙油)冻干中药饮片用于新型冠状病毒肺炎(新冠肺炎)的辅助治疗是否能提高机体免疫力和抗应激能力,从而改善患者临床症状、控制病情进展、缩短治疗周期。方法收集2020年5月25日至6月17日牡丹江医学院附属红旗医院收治的40例输入型新冠肺炎患者的临床资料,随机分为常规治疗组和哈蟆油组,每组20例。常规治疗组仅给予抗病毒、对症治疗、营养支持等基础治疗;哈蟆油组患者在常规治疗基础上口服哈蟆油(林蛙油)冻干中药饮片(每次0.2 g,每日2次)。比较两组患者治疗后主要临床症状的改善情况、胸部CT显示病灶吸收情况、实验室检查结果以及新型冠状病毒(2019-nCoV)核酸转阴时间。结果两组患者入院时一般情况、临床症状、既往疾病、胸部CT影像、C-反应蛋白(CRP)、淋巴细胞计数(LYM)、CD4+及CD8+T淋巴细胞水平以及患者的临床分型分布比较差异均无统计学意义。治疗3 d后,哈蟆油组发热、咳嗽、纳差症状消失率均明显高于常规治疗组〔发热:77.8%(7/9)比62.5%(5/8),咳嗽:66.7%(6/9)比50.0%(3/6),纳差:60.0%(3/5)比40.0%(2/5),均P<0.05〕;治疗6 d后,哈蟆油组发热、咳嗽、乏力、纳差症状消失率均明显高于常规治疗组〔发热:88.9%(8/9)比75.0%(6/8),咳嗽:77.8%(7/9)比50.0%(3/6),乏力:100.0%(3/3)比75.0%(3/4),纳差:80.0%(4/5)比60.0%(3/5),均P<0.05〕。治疗5 d,哈蟆油组胸部CT显示总有效率明显高于常规治疗组〔90.0%(18/20)比60.0%(12/20),P<0.05〕。治疗7 d,哈蟆油组CRP、CD8+T淋巴细胞水平均明显低于常规治疗组〔CRP(mg/L):2.87±2.83比7.63±6.53,CD8+:(24.40±2.56)%比(28.95±3.50)%,均P<0.05〕,LYM、CD4+T细胞水平明显高于常规治疗组〔LYM(×109/L):2.35±0.66比1.90±0.51,CD4+:(33.81±3.15)%比(30.10±4.01)%,均P<0.05〕。哈蟆油组2019-nCoV核酸转阴时间较常规治疗组明显缩短(d:8.85±3.64比11.65±4.52,P<0.05)。结论新冠肺炎患者服用哈蟆油(林蛙油)中药饮片可以减轻炎症反应,增强非特异性免疫和细胞免疫功能,在控制病情进展、促进康复、缩短治疗周期等方面具有一定效果。 展开更多
关键词 新型冠状病毒肺炎 哈蟆油 机体免疫
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疏肝活血法治疗慢性前列腺炎临床疗效的Meta分析 被引量:2
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作者 陈颖雯 郑青霞 +4 位作者 文证 张泽政 陈树超 傅伟 李其信 《中国性科学》 2024年第2期147-152,共6页
目的综合评价疏肝活血类中药治疗慢性前列腺炎的临床作用,以期为中医药防治慢性前列腺炎提供新思路及可靠依据。方法检索中国知网、万方数据库、维普数据库、中国生物医学文献数据库、PubMed建库至2023年2月收录的采用疏肝活血类中药治... 目的综合评价疏肝活血类中药治疗慢性前列腺炎的临床作用,以期为中医药防治慢性前列腺炎提供新思路及可靠依据。方法检索中国知网、万方数据库、维普数据库、中国生物医学文献数据库、PubMed建库至2023年2月收录的采用疏肝活血类中药治疗慢性前列腺炎的临床随机对照试验研究,应用RevMan 5.4软件对根据纳入排除标准筛选出的10篇文献进行Meta分析。结果Meta结果显示,与单纯使用西药/中成药相比,采用疏肝活血法干预的临床疗效总有效率是对照组的1.26倍(RR=1.26,95%CI:1.19~1.34,P<0.00001);慢性前列腺炎症状指数(NIH-CPSI)评分显著降低(MD=-4.75,95%CI:-5.56~-3.94,P<0.00001);疼痛(或不适)症状有效缓解(MD=-1.23,95%CI:-1.96~-0.50,P=0.0009);排尿症状改善(MD=-1.03,95%CI:-1.45~-0.61,P<0.00001);生活质量提高(MD=-1.18,95%CI:-1.29~-1.07,P<0.00001)。结论采用疏肝活血类中药治疗慢性前列腺炎,其总有效率、NIP-CPSI评分降低程度、疼痛(或不适)症状的缓解程度、排尿症状的改善及生活质量的提高明显优于单纯应用西药/中成药。 展开更多
关键词 疏肝活血 慢性前列腺炎 临床疗效 META分析
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Determination of sterols in tobacco leaves by gas chromatography-tandem mass spectrometry
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作者 CHEN Qiansi LIU Pingping +7 位作者 ZHAI Niu zheng qingxia XU Guoyun WANG Chen FAN Kai JIN Lifeng ZHANG Hui ZHOU Huina 《烟草科技》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第A01期25-32,共8页
The purpose of the study was to establish an analytical method to simultaneously determine multiple sterols in tobacco leaves rapidly and accurately.In this gas chromatography-triple quadruple tandem mass spectrometry... The purpose of the study was to establish an analytical method to simultaneously determine multiple sterols in tobacco leaves rapidly and accurately.In this gas chromatography-triple quadruple tandem mass spectrometry(GC-MS/MS)based method,various conditions for sterols extraction were assessed and the instrumental operation parameters were optimized with 5α-cholane as an internal standard.Using this method,eight plant sterols,namely lanosterol,campesterol,chenodeoxycholic acid,cholesterol,β-sitosterol,stigmasterol,dihydrotachysterol and ergosterol,were separated in less than 30 min.The linear correlation coefficients were over 0.998 9,the low detection limits were in the range of 0.010 3-0.141 4 μg/g.The recoveries were from 87.30% to 115.60%,with low standard deviations.In conclusion,this method demonstrates good repeatability,accuracy,and high sensitivity,and is best suited for rapid analysis of multiple sterols in tobacco leaves. 展开更多
关键词 TOBACCO STEROL Gas chromatography-triple QUADRUPOLE TANDEM mass SPECTROMETRY
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不同片烟醇化过程中物质变化的共性规律分析
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作者 郑庆霞 周瑢 +6 位作者 陈森林 李泽锋 陶红 刘萍萍 林云 李月灵 周会娜 《烟草科技》 北大核心 2025年第2期41-51,共11页
为了从代谢组学角度系统分析片烟醇化过程中小分子物质成分的变化规律,以广东中烟工业有限责任公司烟叶醇化库存放的不同香型产区的单打或混打片烟为研究对象,采用基于超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱的非靶向代谢组技术,对跨度2年7... 为了从代谢组学角度系统分析片烟醇化过程中小分子物质成分的变化规律,以广东中烟工业有限责任公司烟叶醇化库存放的不同香型产区的单打或混打片烟为研究对象,采用基于超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱的非靶向代谢组技术,对跨度2年7月(2018年8月至2021年4月)、涉及8个醇化时间点的烟叶样品进行分析。结果表明:不同片烟的代谢组表现出较为一致的随醇化时间进行变化的规律;以醇化时间为性状的WGCNA分析将全部代谢物分为27个模块,其中与醇化早期和末期相关的模块较多;从5个与4个以上醇化时间点均有显著关联性的模块中筛选到核心代谢物59种,涉及脂类、香气成分、二肽、萜、黄酮等,其中脂质含量随烟叶醇化过程逐渐降低,一些萜类及小分子的酸、酮等香气成分随醇化过程逐渐升高;随着醇化的进程,烟叶表面微生物活跃,二肽类成分表现出逐渐升高的趋势。本研究为进一步了解烟叶醇化过程中的化学变化提供了重要数据,同时核心代谢物的鉴定对于监控醇化过程、控制醇化质量和优化醇化时间等具有一定的指导意义。 展开更多
关键词 片烟醇化 香型风格 代谢组学 加权基因共表达网络分析
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基于气质和液质联用技术的烟草鲜烟叶代谢组学分析流程 被引量:18
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作者 郑庆霞 刘萍萍 +9 位作者 陈霞 王冰 翟妞 陈千思 金立锋 路鑫 徐国云 张慧 许国旺 周会娜 《烟草科技》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第6期59-71,共13页
为进一步推广普及烟草代谢组学研究技术,规范烟草代谢组学数据的采集流程,提高烟草代谢组学数据的可比性和可用性,建立了适用于新鲜烟叶代谢组学研究的样品采集和质谱检测方法。将采集后的鲜烟叶迅速用锡箔纸包裹并在液氮中冷冻;将充分... 为进一步推广普及烟草代谢组学研究技术,规范烟草代谢组学数据的采集流程,提高烟草代谢组学数据的可比性和可用性,建立了适用于新鲜烟叶代谢组学研究的样品采集和质谱检测方法。将采集后的鲜烟叶迅速用锡箔纸包裹并在液氮中冷冻;将充分冷冻的烟叶样品在干冰包埋下转移至实验室,真空冷冻干燥;将干燥后的烟叶样品打碎成粉末,提取代谢物;采用9种主要基于GC-MS和LC-MS技术的检测方法收集代谢组数据,分别是6种靶向检测(植物色素、游离氨基酸、有机酸、生物碱及多酚和萜类化合物)和3种非靶向检测(脂类、基于GC-MS的全成分分析和基于LC-MS全成分分析)方法。采用所建方法对不同产区、不同品种及不同生长发育时期的第十叶位鲜烟叶进行分析。结果表明:①共定性定量500余种代谢物,涉及烟草主要初生、次生代谢物,其中绝对定量101种;②主成分分析表明不同生长发育期鲜烟叶的代谢组差异较大,如大多数胺类(包括游离氨基酸)代谢物随生长发育期变化其质量分数逐渐降低;同一期鲜烟叶代谢组的生态差异大于品种差异。该方法具有稳定性和可重复性高、数据量大且可靠、覆盖代谢物多等特点,可用于烟草代谢组学研究。 展开更多
关键词 烟草 鲜烟叶 代谢组学 GC-MS LC-MS
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八大香型风格新鲜烟叶代谢特征的生态成因分析 被引量:10
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作者 周会娜 刘萍萍 +7 位作者 张玉霞 王宝林 郑庆霞 贾国涛 罗登山 姚倩 乔学义 张俊岭 《烟草科技》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期19-26,共8页
为考察生态因素对鲜烟叶代谢特征的影响,根据全国烤烟烟叶香型风格区划研究结果,按照八大香型风格,结合气象数据,分析了鲜烟叶特征代谢物(脂类化合物、含氮化合物、糖类化合物、有机酸类化合物、核酸类化合物、甾醇类化合物)与不同气象... 为考察生态因素对鲜烟叶代谢特征的影响,根据全国烤烟烟叶香型风格区划研究结果,按照八大香型风格,结合气象数据,分析了鲜烟叶特征代谢物(脂类化合物、含氮化合物、糖类化合物、有机酸类化合物、核酸类化合物、甾醇类化合物)与不同气象因子的相关性,并分析了各类代谢物的生态成因。结果表明,每个风格区的特征代谢物均与生态条件一定程度相关,温度、日照时数、降雨量等生态特征数据的变化可解释部分特征代谢产物的积累,表明鲜烟叶的代谢特征与环境生态条件紧密相关,其中与代谢物含量有较高相关性的气候因子为大田中后期温度和大田中后期日照时数。 展开更多
关键词 烟草 鲜烟叶 代谢特征 生态成因 相关分析 香型风格
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高效液相色谱-三重四极杆质谱法同时测定烟叶中10种多酚类化合物 被引量:7
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作者 刘萍萍 卢紫舒 +7 位作者 罗朝鹏 李泽锋 翟妞 郑庆霞 卢鹏 曹培健 周会娜 陈千思 《烟草科技》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第6期42-50,共9页
为研究烟叶中的植物多酚类化合物,利用高效液相色谱-三重四极杆质谱(HPLC-TQMS)技术,建立了同时分析烟叶中山奈酚(Kaempferol)、花青素(Cyanidin)、氯化飞燕草色素(Delphinidin chloride)、鼠李金(Rhamnazin)、绿原酸(Chlorogenic acid... 为研究烟叶中的植物多酚类化合物,利用高效液相色谱-三重四极杆质谱(HPLC-TQMS)技术,建立了同时分析烟叶中山奈酚(Kaempferol)、花青素(Cyanidin)、氯化飞燕草色素(Delphinidin chloride)、鼠李金(Rhamnazin)、绿原酸(Chlorogenic acid)、氯化飞燕草素3-O-β-吡喃葡糖苷(Delphinidin3-O-β-glucopyranoside chloride)、原花青素B2(Procyanidine B2)、氯化花青素鼠李葡糖苷(Keracyaninchloride)、芸香苷(Rutin)和莨菪亭(Scopoletin)等10种植物多酚类化合物质量分数的方法。采用实时离子多反应检测模式,获得10种植物多酚类化合物的特征碎片离子峰,并对烟草花叶病毒(TMV)感染的烟叶样品进行了测定。结果表明:①10种植物多酚类化合物在线性范围内的相关系数(r)为0.999 0~0.999 6,方法的检出限为1~200μg/L,日内精密度(RSD)为0.64%~8.72%,日间精密度(RSD)为1.05%~7.93%;回收率为79.66%~112.74%;②TMV感染极显著(p<0.01)增加了烟叶中山奈酚、花青素、氯化飞燕草色素、氯化飞燕草素3-O-β-吡喃葡糖苷和芸香苷的质量分数,显著(p<0.05)降低了烟叶中鼠李金的质量分数,增加了绿原酸的质量分数;③TMV病毒感染对原花青素B2、氯化花青素鼠李葡糖苷和莨菪亭的影响不大,差异不显著。该方法具有良好的灵敏度、精密度和回收率,可用于同时分析植物多酚类化合物。 展开更多
关键词 烟草 多酚 高效液相色谱-三重四极杆质谱 烟草花叶病毒(TMV) 同时测定
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气相色谱-串联质谱检测新鲜烟叶中的萜类成分 被引量:11
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作者 郑庆霞 刘萍萍 +6 位作者 陈千思 翟妞 徐国云 张慧 金立锋 陈霞 周会娜 《烟草科技》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第7期61-68,共8页
为研究烟叶中的萜类成分含量(质量分数),采用选择反应监测模式,建立了同时测定新鲜烟叶中反,反-金合欢醇、α-植醇、顺冷杉醇、β-植醇、(1S,2E,4S,6R,7E,11E)-2,7,11-西柏烷三烯-4,6-二醇(α-CBD)、(1S,2E,4R,6R,7E,11E)-2,7,11-西柏... 为研究烟叶中的萜类成分含量(质量分数),采用选择反应监测模式,建立了同时测定新鲜烟叶中反,反-金合欢醇、α-植醇、顺冷杉醇、β-植醇、(1S,2E,4S,6R,7E,11E)-2,7,11-西柏烷三烯-4,6-二醇(α-CBD)、(1S,2E,4R,6R,7E,11E)-2,7,11-西柏烷三烯-4,6-二醇(β-CBD)、香紫苏醇、赖百当-13-烯-8,15-二醇、角鲨烯、2,3-环氧化鲨烯、双氢速甾醇、胆固醇、菜籽甾醇、麦角甾醇、菜油甾醇、豆甾醇、羊毛甾醇、β-谷甾醇、β-香树脂醇、α-香树脂醇、鹅去氧胆酸等21种萜类成分的气相色谱-串联质谱(GC-MS/MS)方法;并采用该方法对云南、河南、贵州等3个产区的成熟期新鲜烟叶样品进行了分析。结果表明:在线性范围内21种萜类成分的R^2为0.9990~0.9998;方法检测限为12.7~308.7ng·g^-1,定量限为35.8~984.6ng·g^-1;日内、日间精密度(RSD)分别为0.19%~8.28%、1.02%~9.35%。不同产区烟叶中主要萜类成分α-CBD的含量高低顺序为云南(98.83μg·g^-1)>河南(57.04μg·g^-1)>贵州(38.61μg·g^-1),且3个产区之间存在显著性差异。贵州产区烟叶中萜类成分含量的分布较云南和河南产区烟叶差异更大,合肥种植的南江3号品种烟叶中萜类含量与其他3个品种差异明显。该方法前处理简单,分析的萜类物质覆盖面广,可用于批量烟叶样品的检测。 展开更多
关键词 烟草 萜类成分 气相色谱-三重四极杆质谱(GC-MS/MS)
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利用VIGS技术研究NtbHLH93基因在烟草甾醇代谢中的功能 被引量:6
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作者 武明珠 刘瑞霞 +9 位作者 王中 郑庆霞 张剑锋 李泽锋 谢小东 魏攀 李锋 罗朝鹏 曹培健 杨军 《烟草科技》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第6期16-22,共7页
为进一步研究烟草NtbHLH93基因的功能,利用病毒诱导基因沉默(Virus induced gene silence,VIGS)技术降低烟草中NtbHLH93基因的表达。通过测定pTRV2-NtbHLH93烟株中的甾醇含量,发现NtbHLH93基因表达下调后,总甾醇、豆甾醇、胆固醇和β-... 为进一步研究烟草NtbHLH93基因的功能,利用病毒诱导基因沉默(Virus induced gene silence,VIGS)技术降低烟草中NtbHLH93基因的表达。通过测定pTRV2-NtbHLH93烟株中的甾醇含量,发现NtbHLH93基因表达下调后,总甾醇、豆甾醇、胆固醇和β-谷甾醇的含量显著降低。转录组测序发现NtbHLH93基因下调后,共有259个基因差异表达。对这些差异表达基因进行KEGG表达通路分析,发现质体萜类代谢2-C-甲基-D-赤藓糖醇-4-磷酸(2-C-Methyl-D-Erythritol-4-Phosphate,MEP)途径中有两个基因(Niben101Scf00063g13014.1和Niben101Scf06249g03002.1)上调表达,这两个基因与MEP途径中的牻牛儿基牻牛儿基还原酶(Geranylgeranyl diphosphate synthases,GGPPS)基因序列高度相似,推测当甾醇合成代谢通路受阻后导致Niben101Scf00063g13014.1和Niben101Scf06249g03002.1基因上调表达。 展开更多
关键词 烟草 bHLH93 甾醇 VIGS技术
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烟草查尔酮异构酶基因2(NtCHI2)功能分析 被引量:6
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作者 翟妞 郑庆霞 +6 位作者 刘萍萍 徐国云 张慧 李晶 陈千思 武明珠 周会娜 《烟草科技》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第9期1-5,共5页
烟草查尔酮异构酶(Chalcone isomerase,CHI)是黄酮类代谢的一个关键酶,烟草中有两个基因拷贝(NtCHI1、NtCHI2),相关研究多集中在NtCHI1基因,对NtCHI2的研究较少。为研究烟草NtCHI2的功能,主要以NtCHI2的过表达和干扰植株叶片为材料,进... 烟草查尔酮异构酶(Chalcone isomerase,CHI)是黄酮类代谢的一个关键酶,烟草中有两个基因拷贝(NtCHI1、NtCHI2),相关研究多集中在NtCHI1基因,对NtCHI2的研究较少。为研究烟草NtCHI2的功能,主要以NtCHI2的过表达和干扰植株叶片为材料,进行了实时定量PCR和CHI活性分析以及芸香苷含量检测,同时进行了NtCHI2体外表达蛋白的酶活分析。结果表明:NtCHI2体外表达蛋白具有查尔酮异构酶活性;过表达株系中NtCHI2的表达量升高5~75倍,但CHI酶活性和芸香苷含量基本没有变化;干扰株系中NtCHI2的表达量降至70%,CHI酶活性和芸香苷含量分别降低50%和90%。烟草NtCHI2参与芸香苷的合成代谢调控,在一定程度上NtCHI2基因的表达量和芸香苷的含量正相关。 展开更多
关键词 烟草 查尔酮异构酶基因(NtCHI2) 查尔酮异构酶活性 芸香苷
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烟草低温早花相关基因NtDUF599的表达及功能分析 被引量:4
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作者 徐国云 翟妞 +8 位作者 许亚龙 谢小东 张慧 郑庆霞 张剑锋 刘萍萍 陈千思 金立锋 周会娜 《烟草科技》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第8期1-6,23,共7页
为研究烟草低温诱导早花的作用机制,利用转录组分析筛选获得了烟草低温早花相关基因NtDUF599。NtDUF599基因编码一个包含236个氨基酸的未知功能蛋白,受低温诱导高表达。构建该基因的RNAi干扰(RNA interference,RNAi)载体,并通过农杆菌... 为研究烟草低温诱导早花的作用机制,利用转录组分析筛选获得了烟草低温早花相关基因NtDUF599。NtDUF599基因编码一个包含236个氨基酸的未知功能蛋白,受低温诱导高表达。构建该基因的RNAi干扰(RNA interference,RNAi)载体,并通过农杆菌介导法进行烟草遗传转化,获得10个转基因株系。将转基因株系和非转基因对照株系在苗期低温(12℃)处理10 d后,在正常条件下生长至现蕾期。结果显示,转基因烟株的现蕾时间比对照提前10 d左右,且叶片数目减少。本研究首次发现DUFs(Domain of unknown functions)基因参与烟草低温诱导早花过程。 展开更多
关键词 烟草 低温胁迫 早花 RNAI DUF结构域
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雪茄烟叶(BESNO H382)不同组织器官及盐胁迫条件下内参基因的筛选 被引量:4
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作者 张慧 金静静 +6 位作者 徐国云 翟妞 郑庆霞 刘萍萍 陈千思 金立锋 周会娜 《烟草科技》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期17-24,共8页
为了筛选适用于雪茄烟叶(BESNO H382)基因定量研究的内参基因,以温室栽培条件下雪茄烟叶的不同组织器官(旺长期根、茎、叶,盛花期花萼、花冠、柱头、子房、雄蕊、雌蕊及种子)及不同盐处理条件下(300 mmol/L NaCl处理不同时间)的样品为材... 为了筛选适用于雪茄烟叶(BESNO H382)基因定量研究的内参基因,以温室栽培条件下雪茄烟叶的不同组织器官(旺长期根、茎、叶,盛花期花萼、花冠、柱头、子房、雄蕊、雌蕊及种子)及不同盐处理条件下(300 mmol/L NaCl处理不同时间)的样品为材料,采用实时荧光定量PCR技术对从雪茄烟叶转录组数据中筛选到的10个候选内参基因进行分析,同时使用geNorm、NormFinder和BestKeeper等3种软件综合评价这些候选基因的表达稳定性。结果表明,RPL14A和UBC27最适合作为雪茄烟叶不同组织的内参基因;UBC28最适合作为雪茄烟叶不同盐处理条件下的内参基因。分别以UBC27、UBC28和RPL14A为内参基因考察了胁迫相关基因脯氨酸合成酶基因(P5CS)在盐胁迫下的表达情况,发现P5CS上调表达且相对3个内参基因的表达量和变化趋势均较为一致。 展开更多
关键词 雪茄烟叶 内参基因 QRT-PCR 脯氨酸合成酶基因(P5CS)
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普通烟草ALMT基因家族的鉴定与表达分析 被引量:3
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作者 张慧 李泽锋 +8 位作者 徐国云 金静静 王晨 翟妞 金立锋 郑庆霞 陈千思 刘萍萍 周会娜 《烟草科技》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第5期1-9,共9页
为了挖掘可能参与烟草氯离子吸收转运的铝激活苹果酸转运蛋白(Al-activated malate transporter,ALMT)基因家族成员,利用生物信息学方法,系统地分析了烟草ALMT基因家族成员的蛋白理化性质、染色体定位、系统进化、基因结构和保守结构域... 为了挖掘可能参与烟草氯离子吸收转运的铝激活苹果酸转运蛋白(Al-activated malate transporter,ALMT)基因家族成员,利用生物信息学方法,系统地分析了烟草ALMT基因家族成员的蛋白理化性质、染色体定位、系统进化、基因结构和保守结构域等;利用qPCR的方法分析了烟草ALMT基因在不同组织中的表达情况,以及在盐(NaCl)处理下的表达特征。结果表明:普通栽培烟草基因组中鉴定出30个可能的ALMT家族基因,根据系统发育树可将其划分为五个亚组;NtALMT基因的基因结构和motif分布与其他物种一致,具有高度保守的WEP motif;组织表达特异性分析结果发现大多数NtALMT基因在茎中表达较高,只有NtALMT28在叶中表达量最高;氯盐处理下,茎中NtALMT10表达量升高8倍以上,叶中NtALMT19表达量升高25倍以上,暗示了这些基因可能与烟草氯离子吸收转运相关。 展开更多
关键词 烟草 ALMT基因家族 氯盐胁迫 表达分析
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玉溪、许昌烤烟烟叶中淀粉酶基因的表达及酶活性分析 被引量:2
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作者 翟妞 徐国云 +7 位作者 郑庆霞 何声宝 张慧 刘萍萍 许亚龙 陈千思 王晨 周会娜 《烟草科技》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第9期25-30,共6页
为分析河南、云南两地烤后烟叶中糖含量差异形成的原因,以许昌、玉溪成熟期烤烟中部烟叶为材料,通过基因芯片数据寻找与淀粉降解相关的差异基因。利用实时定量PCR和淀粉酶活性分析进行验证,并测定淀粉、总糖的含量(质量分数)。结果表明... 为分析河南、云南两地烤后烟叶中糖含量差异形成的原因,以许昌、玉溪成熟期烤烟中部烟叶为材料,通过基因芯片数据寻找与淀粉降解相关的差异基因。利用实时定量PCR和淀粉酶活性分析进行验证,并测定淀粉、总糖的含量(质量分数)。结果表明:获得4个与淀粉降解相关的差异基因,其中2个为α-淀粉酶基因、2个为β-淀粉酶基因,这4个基因在玉溪烟叶中的表达量明显高于许昌烟叶。玉溪烟叶中的α-和β-淀粉酶活性高于许昌烟叶。在玉溪、许昌成熟期中部烟叶中,淀粉含量分别为33.00%和35.00%,两者差异不大。烤前烟叶的总糖含量玉溪烟叶(2.10%)低于许昌烟叶(3.20%),而烤后烟叶的总糖含量玉溪烟叶(36.46%)高于许昌烟叶(20.60%)。表明影响烤后烟叶总糖含量的主要因素为淀粉酶,而不是烤前烟叶的淀粉积累量。 展开更多
关键词 烟草 淀粉酶 活性 基因表达
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