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ITCH-TXNIP-NLRP3信号通路在体内外阿尔茨海默病样病变中的调控作用
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作者 谢秋雨 马建烽 +7 位作者 沈绮莹 何永祥 李晓冰 杨朔 向玉珂 覃媛 魏伟 刘英华 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第6期1109-1117,共9页
目的:在体内外实验中探讨E3泛素-蛋白连接酶ITCH通过硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)-核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)信号通路对阿尔茨海默病(AD)样病变的调控作用。方法:(1)随机分组选取2、4、6月龄的5×FAD小鼠(AD模型)和... 目的:在体内外实验中探讨E3泛素-蛋白连接酶ITCH通过硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)-核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)信号通路对阿尔茨海默病(AD)样病变的调控作用。方法:(1)随机分组选取2、4、6月龄的5×FAD小鼠(AD模型)和野生型(WT)小鼠各15只,采用硫磺素和免疫荧光染色法检测脑内β-样淀粉蛋白(Aβ)斑块数量,其中免疫荧光染色法进一步用于分析TXNIP蛋白表达水平,Western blot检测泛素连接酶ITCH和TXNIP蛋白水平变化并用免疫共沉淀法分析二者的相互作用。(2)使用脂多糖(LPS)刺激小鼠小胶质细胞BV2构造神经炎症模型,将其分为对照(CON)组和LPS+ATP处理组,选用Aβ刺激的BV2细胞构造AD炎症模型,根据处理时间的不同,将其分为CON组、12 h处理组、24 h处理组和48 h处理组,采用Western blot检测ITCH、TXNIP和NLRP3炎症小体关键组分NLRP3和caspase-1及其下游分子白细胞介素1β(IL-1β)的表达水平;在Aβ刺激的BV2细胞模型中选用腺病毒转染过表达ITCH(OE-ITCH),实验分为阴性对照组、Aβ寡聚体刺激组和OE-ITCH组,Western blot检测上述炎症相关蛋白的表达水平。结果:5×FAD转基因小鼠皮层及海马区Aβ斑块沉积随月龄增长呈依赖性上升趋势(P<0.01),且与WT小鼠相比,其TXNIP蛋白表达水平同步升高,泛素连接酶ITCH表达水平显著下调(P<0.05)。免疫共沉淀结果证实,2月龄和4月龄5×FAD小鼠脑内ITCH与TXNIP蛋白存在相互作用,但在4月龄时ITCH与TXNIP蛋白间相互作用显著减少。细胞实验结果显示,Aβ/LPS刺激后的BV2小胶质细胞中ITCH蛋白表达水平显著减少,同时伴随TXNIP、NLRP3炎症小体关键组分(NLRP3和caspase-1)及其下游分子IL-1β的表达同步上调(P<0.05);过表达ITCH显著抑制了Aβ刺激后BV2细胞TXNIP和NLRP3的异常激活和相关炎症因子的表达。结论:体内外实验结果均显示ITCH蛋白可通过抑制TXNIP-NLRP3信号通路相关蛋白的表达而在AD模型中发挥抗AD样病变的作用。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 ITCH蛋白 硫氧还蛋白互作蛋白 核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3
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“由点成面”的药理学实验教学探索 被引量:5
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作者 杨朔 刘芸 +2 位作者 向玉珂 吴晓倩 刘英华 《药学教育》 2024年第2期36-39,共4页
当前药理学实验教学中尚有亟待完善之处,该文提出了“由点成面”的药理学实验教学改革策略:通过更新实验教学内容,借助线上信息化教学平台,采取翻转课堂教学模式,改革实验教学评价体系,采用多元化的教学方法,从而提高药理学实验教学效果。
关键词 药理学实验 教学改革 人才培养
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Effects and mechanisms of Bazhen decoction,Siwu decoction,and Sijunzi decoction on 5-fluorouracil-induced anemia in mice 被引量:17
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作者 Tian Yunan xiang yuke +4 位作者 Wan Guoran Wan Dong Zhu Huifeng Wang Tao Yang Xian 《Journal of Traditional Chinese Medicine》 SCIE CAS CSCD 2016年第4期486-495,共10页
OBJECTIVE:To investigate the effects of Bazhen decoction(BZD),Siwu decoction(SWD) and Sijunzi decoction(SJZD) in mice with anemia induced by5-fluorouracil(5-FU) and discussed the possible pharmacological hematopoietic... OBJECTIVE:To investigate the effects of Bazhen decoction(BZD),Siwu decoction(SWD) and Sijunzi decoction(SJZD) in mice with anemia induced by5-fluorouracil(5-FU) and discussed the possible pharmacological hematopoietic mechanism to provide experimental evidence for the clinical use of the three classical prescriptions in the treatment of anemia.METHODS:Anemia was induced by intravenous injection of 5-FU and 80 female Kunming mice were randomly,assigned to oral administration of SWD,SJZD,or BZD daily for 10 days.Peripheral blood cells count and bone marrow cell cycle were monitored to evaluate anti-anemia effects.Serum cytokines,interferon-γ(IFN-γ),interleukin-3(IL-3),erythropoietin(EPO),granulocyte-macrophage colonystimulating factor(GM-CSF),and tumor necrosis factor-α(TNF-α) were assayed.EPO m RNA expression was assayed in kidney and liver tissue homogenates.RESULTS:BZD and SWD significantly increased the number of red blood cells,hemoglobin concentration,and hematocrit,promoted bone marrow cells to enter the cell cycle,proliferate and differentiate,significantly increased IL-3 secretion,and significantly inhibited IFN-γ secretion.BZD stimulated transcription of EPO m RNA in the kidney and liver and enhanced serum EPO expression.A therapeutic effect of SJZD was not observed.CONCLUSION:BZD and SWD treatment specifically enhanced hematopoietic function and mediated myelopoiesis by altering serum cytokines levels and accelerating entry of bone marrow cells into the cell cycle.Better curative effects were achieved via nourishing both Qi and blood(BZD) than by enriching the blood(SWD) or invigorating Qi(SWZD)alone. 展开更多
关键词 ANEMIA Blood-deficiency Fluorouracil Bazhen decoction Siwu decoction Sijunzi decoction
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