期刊文献+
共找到10篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
猪萨佩罗病毒3C蛋白间接ELISA抗体检测方法的建立 被引量:7
1
作者 孙杰 朱琳 +6 位作者 焦点 俞正玉 范宝超 郭容利 徐业芬 何孔旺 李彬 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期697-701,共5页
为建立快速检测猪萨佩罗病毒(PSV)的血清学方法,本研究以原核表达的PSV 3C重组蛋白为包被抗原,通过反应条件优化,建立了一种PSV重组3C蛋白的间接ELISA抗体检测方法。结果显示,该ELISA方法仅对PSV血清检测为阳性,与猪瘟病毒、猪繁殖与呼... 为建立快速检测猪萨佩罗病毒(PSV)的血清学方法,本研究以原核表达的PSV 3C重组蛋白为包被抗原,通过反应条件优化,建立了一种PSV重组3C蛋白的间接ELISA抗体检测方法。结果显示,该ELISA方法仅对PSV血清检测为阳性,与猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病毒、猪圆环病毒2型等主要猪源病毒阳性血清均无特异性反应,具有良好的特异性。该方法的批内和批间重复性变异系数均小于10%,血清稀释度可以达到1∶320;采用该ELISA方法对我国2016年间采集的江苏省6个不同地区猪场的281份临床血清样品进行了检测,阳性率高达38.43%,表明江苏地区猪群中存在PSV感染。本实验建立的ELISA方法可以用于检测临床样品中的PSV抗体,特异性强、敏感性高、重复性好,是PSV流行病学调查的一种有效工具,对该病的防控具有重要意义。 展开更多
关键词 猪萨佩罗病毒 3C蛋白 原核表达 间接ELISA
在线阅读 下载PDF
青藏高原牦牛支原体血清抗体检测及流行趋势研究 被引量:6
2
作者 王冬经 徐业芬 +5 位作者 严明帅 索朗斯珠 赵霞玲 参木友 朱勇 牛家强 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2020年第4期889-892,共4页
【目的】为全面了解牛支原体在我国青藏高原牦牛群中的分布与感染状况。【方法】本研究对先后采集于青藏高原的959份牦牛血清(其中四川56份、甘肃243份、西藏436份、青海224份)应用ELISA法进行了血清抗体检测。【结果】我国青藏高原牦... 【目的】为全面了解牛支原体在我国青藏高原牦牛群中的分布与感染状况。【方法】本研究对先后采集于青藏高原的959份牦牛血清(其中四川56份、甘肃243份、西藏436份、青海224份)应用ELISA法进行了血清抗体检测。【结果】我国青藏高原牦牛群中牛支原体抗体阳性率为48.70%;若从各省(区)分布来看,四川、甘肃、西藏、青海的抗体阳性率依次为64.29%、53.09%、46.10%、45.09%;若从感染年龄来看,1岁以下者为55.70%,1~2岁者为46.20%,3~6岁者为45.23%,6岁以上者为49.70%;若从感染性别来看,雄性阳性率为45.71%,雌性阳性率为50.24%。经SPSS21.0进行卡方检验,结果表明:四川与甘肃的血清抗体阳性率差异不显著(P>0.05),却与青海、西藏差异均显著(P<0.05),但甘肃、西藏、青海差异均不显著(P>0.05);感染年龄4省(区)均差异不显著(P>0.05);感染性别四川、甘肃、青海的雌性均高于雄性,但四川和青海差异不显著(P>0.05),仅甘肃差异显著(P<0.05),而西藏雄性高于雌性,但差异不显著(P>0.05)。【结论】牛支原体在我国青藏高原牦牛群中广泛存在与流行,尤其在四川、西藏和青海省呈现明显的逐年上升趋势。 展开更多
关键词 青藏高原 牦牛 牛支原体 ELISA 流行趋势
在线阅读 下载PDF
牦牛Smad 4基因3′UTR区双荧光素酶载体构建及与bta-miR-146a的靶向验证 被引量:5
3
作者 牛家强 王玉恒 +5 位作者 索朗斯珠 强巴央宗 徐业芬 郭敏 程玲华 杨士承 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期1366-1376,共11页
旨在鉴定牦牛Smad4基因与bta-miR-146a的靶向关系,为探究它们在牦牛卵巢卵泡发育过程中的可能分子调控机制提供理论基础。利用miRBase数据库和MEGA 6.0软件分析miR-146a在不同物种中的保守性,同时利用TargetScan软件预测其潜在靶基因,... 旨在鉴定牦牛Smad4基因与bta-miR-146a的靶向关系,为探究它们在牦牛卵巢卵泡发育过程中的可能分子调控机制提供理论基础。利用miRBase数据库和MEGA 6.0软件分析miR-146a在不同物种中的保守性,同时利用TargetScan软件预测其潜在靶基因,通过构建psiCHECK2双荧光素酶报告基因载体进行靶向验证。生物信息学分析结果显示,miR-146a成熟序列在脊椎动物中具有高度的保守性,并预测到178个与卵巢卵泡发育相关的潜在靶基因,从中选取Smad4基因分析发现其3′非编码区域(3′UTR)与bta-miR-146a存在结合位点;进一步成功构建牦牛Smad4基因3′UTR野生型及突变型psiCHECK2双荧光素酶报告质粒,荧光素酶活性检测结果显示,bta-miR-146amimic对牦牛Smad4基因3′UTR野生型报告质粒荧光活性有明显的下调作用,分别与突变型及NC对照组差异显著(P<0.05)。本研究初步证实,牦牛Smad4基因是bta-miR-146a的靶基因,从而提示btamiR-146a可能通过调控Smad4基因在牦牛卵巢卵泡发育过程中的表达发挥作用。 展开更多
关键词 牦牛 bta-miR-146a SMAD4 荧光素酶活性
在线阅读 下载PDF
牦牛MBL2基因mRNA及相关miRNAs在不同组织中的表达分析 被引量:3
4
作者 温东旭 张鹏宇 +3 位作者 徐业芬 王福鹏 索朗斯珠 牛家强 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期886-897,共12页
甘露糖结合凝集素(mannose binding lectin,MBL)是一种钙离子依赖的糖结合蛋白,是天然免疫的重要组成部分。本研究旨在探究牦牛MBL2基因mRNA组织表达谱及可能靶定它的miRNAs组织表达谱。本研究首先应用RT-PCR技术分析牦牛MBL2基因mRNA... 甘露糖结合凝集素(mannose binding lectin,MBL)是一种钙离子依赖的糖结合蛋白,是天然免疫的重要组成部分。本研究旨在探究牦牛MBL2基因mRNA组织表达谱及可能靶定它的miRNAs组织表达谱。本研究首先应用RT-PCR技术分析牦牛MBL2基因mRNA在牦牛肝、脾、肺、肾、后腿骨骼肌、卵巢、小肠、颌下淋巴结、大肠、肠系膜淋巴结这10种组织里的表达谱,其次使用Targetscan和miRBase软件针对可能靶定MBL2基因的miRNAs进行预测,最后利用RT-PCR技术分析可能靶定MBL2基因的miRNAs在牦牛所检测10种组织中的表达谱。试验结果显示,MBL2基因mRNA在所检测的牦牛组织中仅在肝中表达,表达水平极显著高于脾、肺、肾、后腿骨骼肌、卵巢、小肠、颌下淋巴结、大肠、肠系膜淋巴结组织(P<0.01);预测到可能靶定牦牛MBL2基因的miRNAs共有37个,从中选择了8个进行组织表达谱分析,发现bta-miR-143、bta-miR-193a、bta-miR-345-5p、bta-miR-2385-3p、bta-miR-2432、bta-miR-2285p、bta-miR-2284t-5p、bta-miR-126-5p在各组织中均有表达,与MBL2基因的mRNA在牦牛肝中共表达。综上所述,牦牛MBL2基因可能主要由肝表达,预测筛选的8个miRNAs可能在肝中通过靶定MBL2基因发挥调节作用,但它们之间是否存在真实的靶向关系及其靶向调节的生物学效应都有待于进一步深入研究。 展开更多
关键词 牦牛 甘露糖结合凝集素2 MIRNA 组织表达谱
原文传递
不同培养基组分对牛支原体生长的影响 被引量:4
5
作者 严明帅 徐业芬 +2 位作者 张冯禧 索朗斯珠 牛家强 《湖北农业科学》 2021年第7期99-102,105,共5页
为了解不同培养基组分对牛支原体生长的影响,试验选用3种动物血清和4个厂商的琼脂,按照5%、10%、15%的血清浓度依次制备了9种液体培养基,分别进行了牛支原体生长试验;在此基础上,用4个厂商的琼脂依次制备了4种固体培养基,分别进行了牛... 为了解不同培养基组分对牛支原体生长的影响,试验选用3种动物血清和4个厂商的琼脂,按照5%、10%、15%的血清浓度依次制备了9种液体培养基,分别进行了牛支原体生长试验;在此基础上,用4个厂商的琼脂依次制备了4种固体培养基,分别进行了牛支原体生长试验;通过对液体培养基OD值的测定和对固体培养基性能指标评价来判断牛支原体生长状况。结果表明,牛支原体在9种液体培养基中均能生长,且培养至60 h时其OD值达到最大;在添加血清浓度相同的情况下,添加马血清培养基的OD值与添加猪血清或胎牛血清培养基的OD值相比差异显著(P<0.05);在添加相同类型血清的情况下,添加猪血清或胎牛血清的各培养基之间的OD值相比差异不显著(P>0.05),而添加马血清的各培养基之间的OD值相比,添加量10%和15%与5%相比差异显著(P<0.05),而10%与15%相比差异不显著(P>0.05)。而固体培养基的指标性能评分分别为9(BD公司)、7(香港某公司)、5(上海某公司)、6分(成都某公司)。说明添加10%马血清的液体培养基最适宜牛支原体生长,固体培养基应在此液体培养基的基础上,添加BD公司的琼脂所制备的固体培养基最适宜牛支原体的生长。 展开更多
关键词 牛支原体 培养基组分 性能指标
在线阅读 下载PDF
高原环境对牦牛生长发育及肠道菌群的影响 被引量:4
6
作者 王悦 徐业芬 +1 位作者 吴国芳 李惠侠 《中国奶牛》 2021年第5期1-5,共5页
随着人们生活水平的不断提高和畜牧业的蓬勃发展,畜禽的生产性能越来越受到关注。由于具有较高的经济价值,牦牛养殖也日益得到行业的重视,但因其大多生存在高海拔地区,高原环境在一定程度上影响了牦牛正常生长发育。本文综述了高原环境... 随着人们生活水平的不断提高和畜牧业的蓬勃发展,畜禽的生产性能越来越受到关注。由于具有较高的经济价值,牦牛养殖也日益得到行业的重视,但因其大多生存在高海拔地区,高原环境在一定程度上影响了牦牛正常生长发育。本文综述了高原环境对牦牛生长发育、肠道菌群的影响,以期对牦牛养殖发展有所启示。 展开更多
关键词 西藏牦牛 高原环境 生长发育 肠道菌群
在线阅读 下载PDF
牦牛TLR-4基因3′-UTR区扩增克隆及相关miRNAs生物信息学分析
7
作者 栗亮亮 温东旭 +6 位作者 徐业芬 王运路 常新明 赵启涵 秦忠璞 索朗斯珠 牛家强 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2021年第10期6-9,14,共5页
本试验采用构建DNA混池和测序的方法,对西藏、青海341头牦牛TLR-4基因3′-UTR区单核苷酸多态性(SNP)位点进行筛选,然后用DNAMAN 8.0软件进行序列对比分析,并通过TargetScan 7数据库预测牦牛TLR-4基因3′-UTR区的微小RNAs(miRNAs)的可能... 本试验采用构建DNA混池和测序的方法,对西藏、青海341头牦牛TLR-4基因3′-UTR区单核苷酸多态性(SNP)位点进行筛选,然后用DNAMAN 8.0软件进行序列对比分析,并通过TargetScan 7数据库预测牦牛TLR-4基因3′-UTR区的微小RNAs(miRNAs)的可能靶定。结果显示,牦牛TLR-4基因3′-UTR区可能存在2个SNP位点,分别为A^(380)G和A^(382)G,通过TargetScan7数据库在线预测到牦牛TLR-4基因3′-UTR区共18个miRNAs可能靶定。本试验为牦牛TLR-4基因3′-UTR区可能存在的A^(380)G和A^(382)G突变位点与所预测的miRNAs之间靶向验证提供了初步理论根据,提示可通过分子水平进行抗病育种提高牦牛群体免疫力。 展开更多
关键词 牦牛 TLR-4基因 3′-UTR区 单核苷酸多态性 微小RNA
在线阅读 下载PDF
Relationship Between the mRNA Expression Level of TGF-β Receptor Genes in Tissues and Ovulation Rate in Hu Sheep 被引量:6
8
作者 LI Er-lin XIE Xin-hua +4 位作者 xu ye-fen XIE Zhuang CHEN Ling LIU Hong-lin LI Qi-fa 《Agricultural Sciences in China》 CAS CSCD 2010年第11期1659-1666,共8页
Eight ewes of Hu sheep which bred multi-lamb were used as the high-fecundity group and the other eight ewes of Hu sheep which bred single lamb were used as the control group to investigate the relationship between the... Eight ewes of Hu sheep which bred multi-lamb were used as the high-fecundity group and the other eight ewes of Hu sheep which bred single lamb were used as the control group to investigate the relationship between the mRNA expression level of TGF-β receptor genes in tissues and ovulation rate in Hu sheep. Cloprostenol sodium was injected to make the synchronization of estrus treatment, then all ewes were slaughtered within 24-36 h after empathema and the ovaries were collected. Furthermore, the number of ovulation points was counted to determine ovulation rate for each sheep. Tissue expression analysis was conducted by RT-PCR for one ewe form the high-fecundity group and the relationship between the mRNA expression of genes encoding TGF-β receptors and ovulation rate was detected by real-time fluorescent quantitative PCR. The results showed that the relative expression level of TGF-flR I gene in the reproductive organ was significantly higher than in the lung and muscle (P 〈 0.01), while relative expression level of TGF-βR H in reproductive organ was significantly higher than that of other tissues (P 〈 0.01), indicating that these are highly expressed genes in the ovary. In addition, mRNA expression level of TGF-βR I and TGF-flRH in the ovaries of the high-fecundity group were significantly higher (P〈 0.01) and obviously higher (P= 0.011) than the control group, respectively. The mRNA expression level of TGF-βR I and TGF-βR H had a positive correlation with ovulation rate and the correlation coefficients were 0.562 (P〉 0.05) and 0.711 (P〈 0.05), respectively. It is suggested that TGF-β receptors have close relationship with highfecundity in Hu sheep. 展开更多
关键词 Hu sheep TGF-βR I TGF-βR H ovulation rate
在线阅读 下载PDF
牦牛MBL2基因3′-UTR区抗菌相关SNPs的筛选 被引量:3
9
作者 温东旭 陈建春 +4 位作者 王一飞 徐业芬 索朗斯珠 牛家强 赵霞玲 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期898-907,共10页
为了筛选牦牛MBL2基因3′-UTR区与抗菌有关的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP),本研究通过扩增青藏高原521头牦牛血液中MBL2基因3′-UTR区,并分别进行测序,利用DNAMAN8.0、CHROMAS 2.6.6和Haploview软件对序列进行S... 为了筛选牦牛MBL2基因3′-UTR区与抗菌有关的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP),本研究通过扩增青藏高原521头牦牛血液中MBL2基因3′-UTR区,并分别进行测序,利用DNAMAN8.0、CHROMAS 2.6.6和Haploview软件对序列进行SNPs预测和连锁不平衡分析,使用ELISA检测试剂盒分别检测血清中多杀巴氏杆菌和布氏杆菌抗体D450值,利用SPSS分析SNPs与多杀性巴氏杆菌和布氏杆菌血清抗体D450值的相关性,并通过miRWalk和RNA 22数据库对靶向牦牛MBL2基因3′-UTR区的miRNAs进行预测筛选。结果显示,牦牛MBL2基因3′-UTR区SNP大小为861 bp,预测存在A997C、T1295C、A1473T、C1511T和C1540T共5个SNPs,其中A997C和T1295C、A1473T和C1540T位点强连锁不平衡,A997C/T1295C位点CC/CC基因型与多杀性巴氏杆菌抗体D450值的相关性显著高于AA/TT基因型和AC/TC基因型(P<0.05);共预测到223个靶向牦牛MBL2基因3′-UTR区的miRNAs,其中12个miRNAs分别靶向T1295C、A1473T、C1511T和C1540T位点。结论,牦牛MBL2基因3′-UTR区A997C/T1295C位点多态性可能与牦牛抗多杀性巴氏杆菌性状具有相关性,12个miRNAs可能通过靶向T1295C、A1473T、C1511T和C1540T位点参与牦牛MBL表达水平调节。 展开更多
关键词 牦牛 MBL2 单核苷酸多态性(SNP) 多杀性巴氏杆菌 布氏杆菌 miRNA
在线阅读 下载PDF
转染miR-106a对牦牛卵泡颗粒细胞增殖和激素分泌的影响
10
作者 孟朝轶 王玉恒 +4 位作者 徐业芬 王运路 罗浩月 郭慧 李惠侠 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2023年第3期46-50,共5页
为探究miR-106a对牦牛卵泡颗粒细胞(GCs)增殖和激素分泌的影响,本试验通过体外分离培养牦牛卵泡GCs,分别转染miR-106a模拟物(miR-106a mimics)和miR-106a抑制剂(miR-106a inhibitors),利用CCK-8法检测GCs细胞增殖,ELISA法分别检测雌二醇... 为探究miR-106a对牦牛卵泡颗粒细胞(GCs)增殖和激素分泌的影响,本试验通过体外分离培养牦牛卵泡GCs,分别转染miR-106a模拟物(miR-106a mimics)和miR-106a抑制剂(miR-106a inhibitors),利用CCK-8法检测GCs细胞增殖,ELISA法分别检测雌二醇(E_2)和孕酮(P_4)激素分泌情况。结果显示,与对照组相比,24、48、72和96 h时,miR-106a mimics组和miR-106a inhibitors组牦牛GCs的细胞增殖受到极显著抑制(P<0.01)。与对照组相比,GCs转染48 h时,miR-106a mimics组E_2分泌量极显著升高,而miR-106a inhibitors组E_2分泌量极显著降低(P<0.01);GCs转染72 h时,miR-106a mimics组和miR-106a inhibitors组E_2分泌量均极显著降低(P<0.01);GCs转染48 h时,miR-106a mimics组和miR-106a inhibitors组P_4分泌量均极显著降低(P<0.01);而GCs转染72 h时则结果相反,miR-106a mimics组和miR-106a inhibitors组P_4分泌量均极显著升高(P<0.01)。结果表明,miR-106a转染牦牛GCs后对细胞增殖和激素分泌具有影响,为其在卵巢卵泡中的研究提供了数据支持。 展开更多
关键词 miR-106a 颗粒细胞 增殖 激素 牦牛
在线阅读 下载PDF
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部