目的探讨肺腺癌细胞恶性T细胞扩增序列1(MCTS1)介导骨髓源性抑制细胞(MDSCs)趋化的作用机制。方法利用生物信息学(http://timer.cistrome.org/#tab-8258-2)分析癌症基因组图谱(TCGA)中肺腺癌组织(n=515)MCTS1的表达水平与MDSCs浸润之间...目的探讨肺腺癌细胞恶性T细胞扩增序列1(MCTS1)介导骨髓源性抑制细胞(MDSCs)趋化的作用机制。方法利用生物信息学(http://timer.cistrome.org/#tab-8258-2)分析癌症基因组图谱(TCGA)中肺腺癌组织(n=515)MCTS1的表达水平与MDSCs浸润之间的相关性;利用IL-6+粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)共同诱导人外周血单个核细胞(PBMCs)中MDSCs的生成,流式细胞术检测MDSCs生成比例,CD33磁珠分选MDSCs;收集肺腺癌SPC-A1细胞野生型以及MCTS1敲减和过表达SPC-A1细胞的无血清细胞上清液,利用Transwell小室进行MDSCs的趋化试验并计算趋化指数;羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记CD8^(+)T细胞与发生趋化的MDSCs细胞共培养,流式细胞术检测CD8^(+)T细胞的增殖水平;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)测定MDSCs相关趋化因子的mRNA水平;流式多因子芯片技术检测细胞上清液中C-X-C基序趋化因子配体1(CXCL1)的含量;Western blot检测janus激酶2(JAK2)的表达水平以及信号转导子和转录激活子1(STAT1)的活化水平。结果肺腺癌组织MCTS1与MDSCs浸润程度呈正相关(Spearmanρ=0.226,P<0.001);与空白对照组比较,IL-6和GM-CSF共同诱导PBMCs后可显著增加MDSCs的比例(4.95±1.03 vs 0.97±0.24,t=6.54,P<0.01);MCTS1过表达的SPC-A1细胞上清液对MDSCs的趋化指数较对照组显著升高(4.88±0.99 vs 2.94±0.27,q=6.29,P<0.01),而经MCTS1敲减的细胞上清液可使MDSCs的趋化指数显著降低(1.50±0.17 vs 2.94±0.27,q=4.69,P<0.05);MCTS1过表达的SPC-A1细胞中CXCL1 mRNA(2.79±0.16 vs 1.00±0.08,q=28.94,P<0.001)和上清液中蛋白质水平(78.20±6.16 vs 37.50±3.31,q=16.83,P<0.001)均显著升高,而敲减MCTS1则可抑制CXCL1 mRNA(0.53±0.03 vs 1.00±0.08,q=7.64,P<0.01)和蛋白质水平(17.33±1.96 vs 37.50±3.31,q=8.34,P<0.01);此外,与对照组比较,MCTS1过表达组JAK2蛋白的表达水平(2.11±0.15 vs 1.00±0.05,q=19.48,P<0.001)和STAT1的活化水平(2.10±0.19 vs 1.00±0.10,q=15.02,P<0.001)显著升高,而MCTS1敲减组JAK2蛋白水平(0.56±0.06 vs 1.00±0.05,q=7.61,P<0.01)和STAT1的活化水平均显著降低(0.46±0.07 vs 1.00±0.05,q=7.45,P<0.01)。结论肺腺癌细胞MCTS1通过JAK2-STAT1信号通路调控CXCL1的表达,并介导MDSCs的趋化。展开更多
目的研究刺通草各部位营养成分,评价其氨基酸营养价值。方法通过对刺通草花苞、嫩叶、老叶、茎皮等部位的蛋白质、总灰分、氨基酸、氮、磷、钾、钙进行测定与分析,综合评价各部位的营养情况。结果刺通草不同部位的营养成分存在差异,花...目的研究刺通草各部位营养成分,评价其氨基酸营养价值。方法通过对刺通草花苞、嫩叶、老叶、茎皮等部位的蛋白质、总灰分、氨基酸、氮、磷、钾、钙进行测定与分析,综合评价各部位的营养情况。结果刺通草不同部位的营养成分存在差异,花苞的蛋白质及氮、磷、钾含量最高,分别为18.60%、2.98%、0.512%、3.00%;茎皮中总灰分和钙含量最高,分别为31.32%、7.28%,约为花苞和叶的3倍。各部位均检测到16种氨基酸和6种必需氨基酸,总氨基酸含量为47.59~106.57 mg/g,必需氨基酸含量为17.07~38.14 mg/g,必需氨基酸占总氨基酸含量的34.70%~40.27%。精氨酸、谷氨酸、天冬氨酸为花苞和茎皮的主要氨基酸;谷氨酸、天冬氨酸、亮氨酸为嫩叶和老叶的主要氨基酸;刺通草各部位的第一限制性氨基酸为蛋氨酸+胱氨酸;各部位呈味氨基酸和药用氨基酸含量丰富,分别占总氨基酸的88%和56%以上。各部位的氨基酸比值系数分(score of ratio coefficient of amino acid,SRC)值介于65.42~71.11之间,平均值为67.16。结论刺通草花苞的蛋白质等营养含量丰富,叶的氨基酸营养价值较高,茎皮中钙含量非常丰富。本研究可为刺通草资源开发和利用提供科学参考。展开更多
文摘目的探讨肺腺癌细胞恶性T细胞扩增序列1(MCTS1)介导骨髓源性抑制细胞(MDSCs)趋化的作用机制。方法利用生物信息学(http://timer.cistrome.org/#tab-8258-2)分析癌症基因组图谱(TCGA)中肺腺癌组织(n=515)MCTS1的表达水平与MDSCs浸润之间的相关性;利用IL-6+粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)共同诱导人外周血单个核细胞(PBMCs)中MDSCs的生成,流式细胞术检测MDSCs生成比例,CD33磁珠分选MDSCs;收集肺腺癌SPC-A1细胞野生型以及MCTS1敲减和过表达SPC-A1细胞的无血清细胞上清液,利用Transwell小室进行MDSCs的趋化试验并计算趋化指数;羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记CD8^(+)T细胞与发生趋化的MDSCs细胞共培养,流式细胞术检测CD8^(+)T细胞的增殖水平;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)测定MDSCs相关趋化因子的mRNA水平;流式多因子芯片技术检测细胞上清液中C-X-C基序趋化因子配体1(CXCL1)的含量;Western blot检测janus激酶2(JAK2)的表达水平以及信号转导子和转录激活子1(STAT1)的活化水平。结果肺腺癌组织MCTS1与MDSCs浸润程度呈正相关(Spearmanρ=0.226,P<0.001);与空白对照组比较,IL-6和GM-CSF共同诱导PBMCs后可显著增加MDSCs的比例(4.95±1.03 vs 0.97±0.24,t=6.54,P<0.01);MCTS1过表达的SPC-A1细胞上清液对MDSCs的趋化指数较对照组显著升高(4.88±0.99 vs 2.94±0.27,q=6.29,P<0.01),而经MCTS1敲减的细胞上清液可使MDSCs的趋化指数显著降低(1.50±0.17 vs 2.94±0.27,q=4.69,P<0.05);MCTS1过表达的SPC-A1细胞中CXCL1 mRNA(2.79±0.16 vs 1.00±0.08,q=28.94,P<0.001)和上清液中蛋白质水平(78.20±6.16 vs 37.50±3.31,q=16.83,P<0.001)均显著升高,而敲减MCTS1则可抑制CXCL1 mRNA(0.53±0.03 vs 1.00±0.08,q=7.64,P<0.01)和蛋白质水平(17.33±1.96 vs 37.50±3.31,q=8.34,P<0.01);此外,与对照组比较,MCTS1过表达组JAK2蛋白的表达水平(2.11±0.15 vs 1.00±0.05,q=19.48,P<0.001)和STAT1的活化水平(2.10±0.19 vs 1.00±0.10,q=15.02,P<0.001)显著升高,而MCTS1敲减组JAK2蛋白水平(0.56±0.06 vs 1.00±0.05,q=7.61,P<0.01)和STAT1的活化水平均显著降低(0.46±0.07 vs 1.00±0.05,q=7.45,P<0.01)。结论肺腺癌细胞MCTS1通过JAK2-STAT1信号通路调控CXCL1的表达,并介导MDSCs的趋化。
文摘目的研究刺通草各部位营养成分,评价其氨基酸营养价值。方法通过对刺通草花苞、嫩叶、老叶、茎皮等部位的蛋白质、总灰分、氨基酸、氮、磷、钾、钙进行测定与分析,综合评价各部位的营养情况。结果刺通草不同部位的营养成分存在差异,花苞的蛋白质及氮、磷、钾含量最高,分别为18.60%、2.98%、0.512%、3.00%;茎皮中总灰分和钙含量最高,分别为31.32%、7.28%,约为花苞和叶的3倍。各部位均检测到16种氨基酸和6种必需氨基酸,总氨基酸含量为47.59~106.57 mg/g,必需氨基酸含量为17.07~38.14 mg/g,必需氨基酸占总氨基酸含量的34.70%~40.27%。精氨酸、谷氨酸、天冬氨酸为花苞和茎皮的主要氨基酸;谷氨酸、天冬氨酸、亮氨酸为嫩叶和老叶的主要氨基酸;刺通草各部位的第一限制性氨基酸为蛋氨酸+胱氨酸;各部位呈味氨基酸和药用氨基酸含量丰富,分别占总氨基酸的88%和56%以上。各部位的氨基酸比值系数分(score of ratio coefficient of amino acid,SRC)值介于65.42~71.11之间,平均值为67.16。结论刺通草花苞的蛋白质等营养含量丰富,叶的氨基酸营养价值较高,茎皮中钙含量非常丰富。本研究可为刺通草资源开发和利用提供科学参考。
