根据GenBank中的大肠杆菌0157:H7毒力基因rfbE保守序列,应用LAMP引物的设计软件Primer Explorer V4设计针对靶基因rfbE的引物、设计反应程序与体系,成功建立检测致病大肠杆菌的LAMP检测方法。结果表明,该LAMP方法具有良好的敏感性、特...根据GenBank中的大肠杆菌0157:H7毒力基因rfbE保守序列,应用LAMP引物的设计软件Primer Explorer V4设计针对靶基因rfbE的引物、设计反应程序与体系,成功建立检测致病大肠杆菌的LAMP检测方法。结果表明,该LAMP方法具有良好的敏感性、特异性及荧光可视化判定效果。该方法对目的菌株纯菌DNA可被检出的最低限可达到1.69×10-4 ng/μL;对9种相关细菌进行LAMP方法检测,大肠杆菌0157:H7为阳性结果,其余菌株均显示阴性,阳性检出率为100%;优化浊度仪监控条件,反应器加入荧光染料,63℃反应1 h后即可观察结果,较PCR方法用时短。结果表明,该LAMP方法具有操作简便、高效快捷等优势,在食品食源性致病大肠杆菌快速检测监测方面具有较高的实用价值。展开更多
文摘根据GenBank中的大肠杆菌0157:H7毒力基因rfbE保守序列,应用LAMP引物的设计软件Primer Explorer V4设计针对靶基因rfbE的引物、设计反应程序与体系,成功建立检测致病大肠杆菌的LAMP检测方法。结果表明,该LAMP方法具有良好的敏感性、特异性及荧光可视化判定效果。该方法对目的菌株纯菌DNA可被检出的最低限可达到1.69×10-4 ng/μL;对9种相关细菌进行LAMP方法检测,大肠杆菌0157:H7为阳性结果,其余菌株均显示阴性,阳性检出率为100%;优化浊度仪监控条件,反应器加入荧光染料,63℃反应1 h后即可观察结果,较PCR方法用时短。结果表明,该LAMP方法具有操作简便、高效快捷等优势,在食品食源性致病大肠杆菌快速检测监测方面具有较高的实用价值。
