目的:观察齐墩果酸对咪喹莫特诱导的银屑病样小鼠的皮损及STAT3通路的干预作用。方法:72只BALB/c雄性小鼠,按随机数字表法随机分为空白组、模型组、甲氨蝶呤组、齐墩果酸低、中、高剂量组,每组12只,于背部备皮。除空白组外,其余各组小...目的:观察齐墩果酸对咪喹莫特诱导的银屑病样小鼠的皮损及STAT3通路的干预作用。方法:72只BALB/c雄性小鼠,按随机数字表法随机分为空白组、模型组、甲氨蝶呤组、齐墩果酸低、中、高剂量组,每组12只,于背部备皮。除空白组外,其余各组小鼠每日于背部备皮区域涂抹5%咪喹莫特乳膏诱导银屑病样皮损;甲氨蝶呤组及齐墩果酸各浓度组每日灌胃对应药物0.2 m L/只;每日观察皮损状态并拍照记录,每日对小鼠皮损面积及严重程度(Psoriasis Area and Severity Index,PASI)进行评分;造模第4、7天取小鼠皮损区域皮肤,免疫印迹法检测皮损中STAT3信号通路中STAT3磷酸化表达情况;第7天称量小鼠体重及脾重,计算脾指数,同时取小鼠皮损区域皮肤;苏木素-伊红(HE)染色观察皮损组织病理学改变,并测量表皮厚度;免疫组织化学法及免疫组织荧光法检测皮损中CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)T细胞浸润情况及Ki67表达情况;实时荧光定量PCR法检测皮损中白介素-17(Interleukin-17,IL-17)m RNA相对表达情况。结果:与空白组相比,造模后模型组小鼠背部皮肤出现红斑、鳞屑、浸润性皮损,第4天及第7天PASI评分升高(P<0.01);第7天模型组表皮厚度明显增加,体重下降,脾指数上升,皮损中Ki67、CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)T细胞表达量升高,皮损中IL-17的m RNA相对表达量升高(均P<0.01);第4及第7天,模型组小鼠皮损中p-STAT3的表达量均明显升高(P<0.05,P<0.01);与模型组相比,第4天各治疗组在PASI评分略降低(P>0.05),第7天各治疗组PASI评分明显降低(均P<0.01);第7天齐墩果酸各剂量组小鼠体重略有上升(P>0.05);甲氨蝶呤组小鼠脾指数明显下降(P<0.01),齐墩果酸低、中剂量组小鼠脾指数略下降(P>0.05);各治疗组小鼠表皮厚度较模型组明显下降(P<0.01或P<0.05),小鼠皮肤中Ki-67表达量、CD4^(+)、CD8^(+)T细胞表达量均明显降低(均P<0.01);甲氨蝶呤组、齐墩果酸低、中、高剂量组小鼠皮损中CD3^(+)T细胞表达量均下降(P<0.05,P>0.05,P<0.01,P<0.01),其中在齐墩果酸各剂量组中,中剂量组在脾指数下降、表皮厚度变薄、CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)T细胞减少方面均略优于低、高剂量组(P>0.05);甲氨蝶呤组及齐墩果酸中剂量组小鼠皮损中IL-17的m RNA水平较模型组明显下降(P<0.01,P<0.05);造模给药第4天,甲氨蝶呤组小鼠皮损中p-STAT3水平较模型组明显下降(P<0.05),齐墩果酸中剂量组略下降(P>0.05);造模给药第7天,两个治疗组小鼠皮损中p-STAT3水平较模型组均明显下降(均P<0.01)。结论:齐墩果酸低、中、高剂量均可以改善咪喹莫特诱导的小鼠银屑病样皮损的严重程度,减轻炎性细胞浸润,中剂量组疗效较好,其机制可能通过抑制STAT3通路中p-STAT3的表达从而降低了IL-17的含量,且药效随作用时间的延长而逐渐增加。展开更多
文摘目的:观察齐墩果酸对咪喹莫特诱导的银屑病样小鼠的皮损及STAT3通路的干预作用。方法:72只BALB/c雄性小鼠,按随机数字表法随机分为空白组、模型组、甲氨蝶呤组、齐墩果酸低、中、高剂量组,每组12只,于背部备皮。除空白组外,其余各组小鼠每日于背部备皮区域涂抹5%咪喹莫特乳膏诱导银屑病样皮损;甲氨蝶呤组及齐墩果酸各浓度组每日灌胃对应药物0.2 m L/只;每日观察皮损状态并拍照记录,每日对小鼠皮损面积及严重程度(Psoriasis Area and Severity Index,PASI)进行评分;造模第4、7天取小鼠皮损区域皮肤,免疫印迹法检测皮损中STAT3信号通路中STAT3磷酸化表达情况;第7天称量小鼠体重及脾重,计算脾指数,同时取小鼠皮损区域皮肤;苏木素-伊红(HE)染色观察皮损组织病理学改变,并测量表皮厚度;免疫组织化学法及免疫组织荧光法检测皮损中CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)T细胞浸润情况及Ki67表达情况;实时荧光定量PCR法检测皮损中白介素-17(Interleukin-17,IL-17)m RNA相对表达情况。结果:与空白组相比,造模后模型组小鼠背部皮肤出现红斑、鳞屑、浸润性皮损,第4天及第7天PASI评分升高(P<0.01);第7天模型组表皮厚度明显增加,体重下降,脾指数上升,皮损中Ki67、CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)T细胞表达量升高,皮损中IL-17的m RNA相对表达量升高(均P<0.01);第4及第7天,模型组小鼠皮损中p-STAT3的表达量均明显升高(P<0.05,P<0.01);与模型组相比,第4天各治疗组在PASI评分略降低(P>0.05),第7天各治疗组PASI评分明显降低(均P<0.01);第7天齐墩果酸各剂量组小鼠体重略有上升(P>0.05);甲氨蝶呤组小鼠脾指数明显下降(P<0.01),齐墩果酸低、中剂量组小鼠脾指数略下降(P>0.05);各治疗组小鼠表皮厚度较模型组明显下降(P<0.01或P<0.05),小鼠皮肤中Ki-67表达量、CD4^(+)、CD8^(+)T细胞表达量均明显降低(均P<0.01);甲氨蝶呤组、齐墩果酸低、中、高剂量组小鼠皮损中CD3^(+)T细胞表达量均下降(P<0.05,P>0.05,P<0.01,P<0.01),其中在齐墩果酸各剂量组中,中剂量组在脾指数下降、表皮厚度变薄、CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)T细胞减少方面均略优于低、高剂量组(P>0.05);甲氨蝶呤组及齐墩果酸中剂量组小鼠皮损中IL-17的m RNA水平较模型组明显下降(P<0.01,P<0.05);造模给药第4天,甲氨蝶呤组小鼠皮损中p-STAT3水平较模型组明显下降(P<0.05),齐墩果酸中剂量组略下降(P>0.05);造模给药第7天,两个治疗组小鼠皮损中p-STAT3水平较模型组均明显下降(均P<0.01)。结论:齐墩果酸低、中、高剂量均可以改善咪喹莫特诱导的小鼠银屑病样皮损的严重程度,减轻炎性细胞浸润,中剂量组疗效较好,其机制可能通过抑制STAT3通路中p-STAT3的表达从而降低了IL-17的含量,且药效随作用时间的延长而逐渐增加。
