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中国城市无烟立法的综合影响 被引量：1
1
作者 陈泓君 尹慧 《中国健康教育》 北大核心 2025年第5期451-458,共8页
目的通过对2006年《世界卫生组织烟草控制框架公约》在中国生效后进行全面无烟立法或出台无烟立法相关政策的城市进行研究,对无烟立法所带来的综合影响进行系统综述。方法对知网、PubMed数据库进行文献检索,分析各城市二手烟暴露率、心... 目的通过对2006年《世界卫生组织烟草控制框架公约》在中国生效后进行全面无烟立法或出台无烟立法相关政策的城市进行研究,对无烟立法所带来的综合影响进行系统综述。方法对知网、PubMed数据库进行文献检索,分析各城市二手烟暴露率、心血管疾病住院率与死亡率。结果共有23篇文献最终纳入,其中中文文献15篇,英文文献8篇。中国城市无烟立法的健康效应主要体现在心血管健康的改善,立法后卒中即刻住院率较立法前下降了4.0%~5.6%,卒中年住院率较立法前下降了8.0%~15.3%,急性心肌梗死年死亡率较立法前下降了4.0%~16.0%,而卒中死亡率、缺血性心脏病住院率、急性心肌梗死住院率的研究结果差异性较大;中国城市无烟立法对降低二手烟暴露率有影响,随机效应模型合并效应量后RR值为0.60(95%CI:0.46~0.78),研究存在异质性。结论城市层面无烟立法可以显著改善心血管健康,降低二手烟暴露率,中国各城市应继续推进无烟立法,为公众提供健康的公共环境。 展开更多
关键词 无烟立法 控烟 二手烟暴露 心血管疾病
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IL-33在呼吸道合胞病毒(RSV)感染致哮喘急性发作中的作用 被引量：15
2
作者 陈家君 冯净净 +2 位作者 施天昀 陈鸿军 揭志军 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期59-65,共7页
目的研究IL-33在呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)感染致哮喘急性发作中的作用。方法将24只3周龄SPF级BALB/c雌性小鼠随机分为PBS组、RSV组、卵清白蛋白(ovalbumin,OVA)组和OVA/RSV组,每组6只。首先应用OVA或PBS激发并... 目的研究IL-33在呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)感染致哮喘急性发作中的作用。方法将24只3周龄SPF级BALB/c雌性小鼠随机分为PBS组、RSV组、卵清白蛋白(ovalbumin,OVA)组和OVA/RSV组,每组6只。首先应用OVA或PBS激发并致敏小鼠,再感染RSV致哮喘急性发作。麻醉后处死小鼠。ELISA法测小鼠血清总IgE水平、支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)及肺组织IL-33蛋白水平;瑞氏/吉姆萨染色后测BALF细胞总数及各细胞分类计数;取肺组织病理切片HE染色;real-time PCR测T辅助细胞2型(T helper 2,Th2)细胞因子、IL-33等mRNA表达。结果 OVA组与PBS组相比,血清IgE水平明显升高(P<0.05)。OVA/RSV组中BALF细胞总数较OVA组显著增加,主要表现为巨噬细胞和中性粒细胞的增加。病理切片HE染色可见OVA/RSV组小气道周围炎性细胞浸润更加明显。以上表明RSV感染OVA诱导哮喘急性发作的小鼠模型成功建立。real-time PCR显示:与OVA组相比,OVA/RSV组IL-13以及IL-33 mRNA表达显著增加(P<0.05),IL-5和ST2表达有所增加,但差异无统计学意义。ELISA结果显示:与OVA组相比,OVA/RSV组肺组织中IL-33浓度增高更加显著(P<0.05),BALF中IL-33浓度也有所增加,但差异无统计学意义。结论 IL-33可能通过启动Th2型免疫反应在RSV感染诱导哮喘急性发作小鼠模型中起重要作用。 展开更多
关键词 呼吸道合胞病毒(RSV) 哮喘 急性发作 IL-33 ST2
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基于多特征融合的尺度自适应KCF目标跟踪算法 被引量：12
3
作者 周正松 陈虹君 周红 《四川大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期697-703,共7页
首先,对核相关滤波(KCF)目标跟踪算法进行了详细推导;然后,针对KCF算法提取单一特征,不能很好地表达目标的外观模型,提出将多种特征融合的方法,增加外观模型的可区分性.同时针对KCF算法不能自适应尺度变化的问题,引入一种尺度自适应变... 首先,对核相关滤波(KCF)目标跟踪算法进行了详细推导;然后,针对KCF算法提取单一特征,不能很好地表达目标的外观模型,提出将多种特征融合的方法,增加外观模型的可区分性.同时针对KCF算法不能自适应尺度变化的问题,引入一种尺度自适应变化方法.还对于KCF算法的固定更新率在目标被遮挡的情况下会学习到错误信息的问题,提出一种在线模型更新因子的方法;最后,通过实验对比结果表明,本文提出的算法跟踪精度更高,且对目标尺度发生较大变化和遮挡情况下的跟踪具有较强的鲁棒性. 展开更多
关键词 核相关滤波 目标跟踪 循环矩阵 多特征融合
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上海市金山区奶牛传染性鼻气管炎血清学调查 被引量：5
4
作者 张晓锋 翁永刚 +5 位作者 李守富 郭海 陈冈 叶结平 范红结 陈鸿军 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2017年第5期73-75,共3页
2016年在上海市金山区10个奶牛场共采集460份牛血清,利用商品化牛传染性鼻气管炎病毒(infectious bovine rhinotracheitis virus,IBRV)gE特异性抗体检测试剂盒对其进行血清学调查。结果发现,金山区奶牛存在36.67%~97.37%的抗体阳性率,I... 2016年在上海市金山区10个奶牛场共采集460份牛血清,利用商品化牛传染性鼻气管炎病毒(infectious bovine rhinotracheitis virus,IBRV)gE特异性抗体检测试剂盒对其进行血清学调查。结果发现,金山区奶牛存在36.67%~97.37%的抗体阳性率,IBRV感染普遍,建议采取综合管理措施,有效控制该病造成的损失。 展开更多
关键词 传染性鼻气管炎 血清学调查 奶牛 金山区
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双酰肼类昆虫生长调节剂的抗药性研究进展 被引量：4
5
作者 刘秀 王宏昆 +3 位作者 陈红军 席涵 李静波 金晨钟 《农药》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期469-472,480,共5页
双酰肼类杀虫剂是一类高效、环保、低毒的新型昆虫生长调节剂。简要介绍了双酰肼类杀虫剂的发展历程,重点概述了其作用机理、选择性、抗药性机理研究现状,并提出了预防和治理抗药性的措施。
关键词 作用机理 选择性 抗性 抗性机理 对策
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疑似阿帕他胺片相关致中毒性表皮坏死松解症继发急性呼吸窘迫综合征死亡1例
6
作者 肖东豪 陈洪骏 郑庄潮 《海峡药学》 2025年第11期93-95,共3页
本病例报道了1例80岁男性患者,因前列腺癌接受治疗过程中出现严重不良反应并最终死亡的情况。患者在口服阿帕他胺片进行内分泌治疗后,出现全身多发皮疹等一系列症状,经多科室会诊及后续诊断,考虑为Stevens-Johnson综合征/中毒性表皮坏... 本病例报道了1例80岁男性患者,因前列腺癌接受治疗过程中出现严重不良反应并最终死亡的情况。患者在口服阿帕他胺片进行内分泌治疗后,出现全身多发皮疹等一系列症状,经多科室会诊及后续诊断,考虑为Stevens-Johnson综合征/中毒性表皮坏死松解症继发急性呼吸窘迫综合征,尽管积极抢救,但因患者年龄大且合并多种基础疾病,最终抢救无效死亡。通过对该病例的详细分析,探讨相关药物不良反应与死亡之间的关联性,为进一步临床用药安全提供参考。 展开更多
关键词 前列腺癌 阿帕他胺片 STEVENS-JOHNSON综合征 中毒性表皮坏死松解症 急性呼吸窘迫综合征 药物不良反应 病例分析
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ClassⅠ新城疫病毒强毒株融合蛋白的表达时相分析 被引量：2
7
作者 孙英杰 陈鸿军 +5 位作者 仇旭升 詹媛 于洋 宋翠萍 于圣青 丁铲 《中国动物传染病学报》 CAS 2010年第1期17-22,共6页
根据ClassⅠ新城疫病毒分离株9a5b编码序列,设计特异性引物扩增融合蛋白(F)基因截短片段(199~1500 nt),利用原核表达获得重组蛋白,切胶免疫Balb/c小鼠,制备特异性多抗血清,利用制得的血清进行F蛋白表达时相分析。结果表明:NDV 9a5b病毒... 根据ClassⅠ新城疫病毒分离株9a5b编码序列,设计特异性引物扩增融合蛋白(F)基因截短片段(199~1500 nt),利用原核表达获得重组蛋白,切胶免疫Balb/c小鼠,制备特异性多抗血清,利用制得的血清进行F蛋白表达时相分析。结果表明:NDV 9a5b病毒按5M.O.I(multiplicity of infection,多重感染复数)感染量接种DF1单层细胞,经IFA检测,在感染6 h时,F蛋白开始出现,主要分布于细胞浆内;12~16 h胞浆中的F蛋白含量逐渐增多,形成包涵体,开始在细胞膜上分布;当病毒感染24h后,F蛋白在细胞膜上形成明显的膜周染色;至感染36h后,出现多个细胞融合的包涵体,细胞已基本崩解。此时,F蛋白也散在分布于包涵体中。这为深入开展F蛋白与该病毒的毒力演化机制研究工作奠定了基础。 展开更多
关键词 新城疫病毒 CLASS I 融合蛋白 动态分布
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船舶无线网络通信路径最优规划方法分析 被引量：2
8
作者 杨海涛 陈鸿俊 马玲 《舰船科学技术》 北大核心 2021年第8期136-138,共3页
针对传统船舶网络通信最优路径的规划方法存在的误码/丢包率高、数据传输时延长的缺陷,提出船舶无线网络通信路径最优规划优化方法。结合船舶无线网络的通信原理,构建相应的物理结构,并确定通信的起点和终点位置。在此基础上生成多条通... 针对传统船舶网络通信最优路径的规划方法存在的误码/丢包率高、数据传输时延长的缺陷,提出船舶无线网络通信路径最优规划优化方法。结合船舶无线网络的通信原理,构建相应的物理结构,并确定通信的起点和终点位置。在此基础上生成多条通信路径,对其进行计算,并从带宽、部署成本、时间开销等多个方面设置约束,在多约束下得出船舶无线网络通信路径的最优规划结果。通过与传统规划方法的对比得出结论:设计规划方法得出的最优通信路径的误码率和丢包率分别降低了2.12%和0.51%,且数据传输速度得到有效提升。 展开更多
关键词 无线通信网络 通信路径 路径规划 船舶通信
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胃镜联合去甲肾上腺素对溃疡性消化道出血患者疗效及炎性因子的影响价值 被引量：2
9
作者 陈虹君 李美鹚 《临床合理用药杂志》 2018年第32期3-4,共2页
目的观察胃镜联合去甲肾上腺素治疗溃疡性消化道出血患者的临床效果。方法回顾性分析医院收治的溃疡性消化道出血患者82例临床资料,根据治疗方法不同分为对照组和观察组,每组41例。对照组采用单纯胃镜止血夹止血方案,观察组在对照组治... 目的观察胃镜联合去甲肾上腺素治疗溃疡性消化道出血患者的临床效果。方法回顾性分析医院收治的溃疡性消化道出血患者82例临床资料,根据治疗方法不同分为对照组和观察组,每组41例。对照组采用单纯胃镜止血夹止血方案,观察组在对照组治疗基础上加用去甲肾上腺素注射止血,比较2组止血有效率和72 h再出血率,记录2组治疗前后IL-6、IL-8以及TNF-α数值,评价患者的炎性反应情况。结果观察组即时止血率为90.24%,高于对照组的56.10%(P<0.01);观察组72 h再出血率为4.88%,低于对照组的24.39%(P<0.05);治疗后,2组各项炎性因子指标(TNF-α、IL-6及IL-8)数值较治疗前均下降,且观察组较对照组明显更低(P均<0.01)。结论胃镜联合去甲肾上腺素注射止血能够有效提高患者的即时止血率,同时还能够降低患者的再出血率,是一种有效治疗溃疡性消化道出血的治疗方案,值得推广应用。 展开更多
关键词 胃镜 止血夹止血 去甲肾上腺素 溃疡性消化道出血
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中国式现代化的共享发展阐释及其路径探究 被引量：1
10
作者 陈泓君 牟晓明 《西华师范大学学报（哲学社会科学版）》 2024年第2期11-18,共8页
共享发展作为一种发展理念、价值追求融入并贯穿中国式现代化始终,彰显出中国式现代化的独特优势,其具体体现为:中国式现代化一方面超越“资本中心论”,诠释人的共生共享价值旨归,另一方面超越“文明冲突论”,扩展文明包容共享思维理性... 共享发展作为一种发展理念、价值追求融入并贯穿中国式现代化始终,彰显出中国式现代化的独特优势,其具体体现为:中国式现代化一方面超越“资本中心论”,诠释人的共生共享价值旨归,另一方面超越“文明冲突论”,扩展文明包容共享思维理性。相较于由资本增殖逻辑所推动的西方现代化,中国式现代化源自共享发展的强大内生动力。这主要体现为,共享发展唤醒人的主体自觉以提高人们参与现代化建设的生产积极性,激发创新创造精神以推进现代化追赶超越式发展和凝聚现代化发展合力。因而,新时代必须坚持将共享发展理念深度融入中国式现代化建设之中,这就要求必须尊重现代化发展规律,渐进共享社会发展红利;优化现代化发展格局,在综合平衡中共谋发展;完善分配制度,促进全体人民共同富裕;构建和谐精神场域,凝聚共享价值共识,从而使中国式现代化迈向人类文明新高度。 展开更多
关键词 共享发展 中国式现代化 共同富裕 路径
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非洲猪瘟病毒基因缺失疫苗株的构建和免疫保护特性 被引量：32
11
作者 张艳艳 陈腾 +35 位作者 张静远 齐宇 缪发明 薄宗义 王立冬 郭晓宇 周鑫韬 杨金梅 王晓虎 高玉龙 汪春雨 鲍晨沂 米立娟 孙雪霏 冯娜 杨金金 王承宇 万忠海 李记平 孟轲音 田多 李楠 王述超 王颖 张菲 张锦霞 蒋依倩 刘晔 张守峰 张中洋 钱莺娟 朱鸿飞 高玉伟 陈鸿军 李金祥 扈荣良 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1421-1427,共7页
以我国首例非洲猪瘟疫情中分离的流行毒株(SY18)为亲本株构建了多基因家族(MGF)基因和CD2v基因缺失的非洲猪瘟病毒基因缺失疫苗候选株,针对基因缺失株的安全性和免疫保护效果进行了特性研究。结果显示,MGF和CD2v双基因缺失株(ASFV SY18... 以我国首例非洲猪瘟疫情中分离的流行毒株(SY18)为亲本株构建了多基因家族(MGF)基因和CD2v基因缺失的非洲猪瘟病毒基因缺失疫苗候选株,针对基因缺失株的安全性和免疫保护效果进行了特性研究。结果显示,MGF和CD2v双基因缺失株(ASFV SY18ΔMGF/ΔCD2v)对猪安全,接种猪能够100%抵抗亲本强毒株SY18株的攻击,对照猪全部死亡;说明该毒株可作为非洲猪瘟疫苗候选株。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 基因缺失 MGF基因 CD2v基因 疫苗候选株 安全性 免疫保护
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非洲猪瘟病毒与宿主细胞相互作用研究进展 被引量：22
12
作者 敖大 陈南华 +4 位作者 钱莺娟 陈鸿军 郭晓宇 张泉 朱建中 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2020年第3期110-118,共9页
非洲猪瘟(ASF)自2018年8月在我国暴发,对养猪业构成巨大威胁.该病是由非洲猪瘟病毒(ASFV)引起的家养猪高热、急性和高死亡率的出血症和淋巴组织坏死症;认识和了解病原ASFV与宿主的相互作用是理解致病机制的基础和疫病防控的前提.本文对A... 非洲猪瘟(ASF)自2018年8月在我国暴发,对养猪业构成巨大威胁.该病是由非洲猪瘟病毒(ASFV)引起的家养猪高热、急性和高死亡率的出血症和淋巴组织坏死症;认识和了解病原ASFV与宿主的相互作用是理解致病机制的基础和疫病防控的前提.本文对ASFV与宿主细胞受体和内体系统的互作、基因转录和蛋白合成系统的互作、细胞凋亡和内质网应激系统的互作、天然免疫干扰素应答系统的互作、抗原递呈细胞的互作五个方面现有研究进展进行综述;并试图在此基础上理解ASFV的免疫保护和免疫逃逸作用,思考ASFV与宿主互作中需要回答的问题,为研制保护性疫苗和深入认识ASF致病机制提供线索. 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 宿主 相互作用 免疫逃逸
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非洲猪瘟病毒DP96R蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备 被引量：12
13
作者 王西西 吴映彤 +3 位作者 吴竞 陈鸿军 郭晓宇 朱鸿飞 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2018年第5期10-15,共6页
本研究旨在采用原核表达系统表达非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)Georgia 2007/1毒株毒力基因UK,获得重组蛋白(DP96R),进一步制备并鉴定DP96R重组蛋白的多克隆抗体。首先构建原核重组表达质粒pET-28a-UK并转化BL21感受态... 本研究旨在采用原核表达系统表达非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)Georgia 2007/1毒株毒力基因UK,获得重组蛋白(DP96R),进一步制备并鉴定DP96R重组蛋白的多克隆抗体。首先构建原核重组表达质粒pET-28a-UK并转化BL21感受态细胞,在16℃、0.4 mmol/L IPTG条件下诱导10 h后,检测到目的蛋白以可溶性表达为主,蛋白分子量约为15 kDa。然后采用纯化的重组蛋白免疫新西兰大白兔,制备抗DP96R蛋白多克隆抗体。ELISA结果表明制备的多抗具有良好反应性,Western blot和免疫荧光实验(immunofluorescence assay,IFA)表明制备的多抗能特异性识别真核表达的DP96R蛋白。DP96R重组蛋白及多克隆抗体的制备为进一步研究DP96R蛋白的生物学功能以及建立ASFV毒株鉴别诊断的血清学检测方法奠定了基础。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 UK基因 DP96R蛋白 原核表达 多克隆抗体
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晶闸管三相半控整流电路谐波耦合导纳矩阵建模算法研究
14
作者 陈宏军 段文辉 +2 位作者 王克谦 王鹏 魏继承 《电力系统装备》 2020年第13期37-38,167,共3页
在研究优化的全网谐波抑制方法时,非线性负荷建模是影响精度和效率的关键.文章针对三相阻感负载整流电路的原理进行分析,并采用具有高精度的谐波耦合导纳矩阵模型算法进行建模,从而准确地预测不同负载参数下,其各次谐波耦合程度的变化规... 在研究优化的全网谐波抑制方法时,非线性负荷建模是影响精度和效率的关键.文章针对三相阻感负载整流电路的原理进行分析,并采用具有高精度的谐波耦合导纳矩阵模型算法进行建模,从而准确地预测不同负载参数下,其各次谐波耦合程度的变化规律,为研究非线性负载谐波外特性提供了一种解决方案.文章对所提谐波耦合导纳矩阵的建模方法,进行了仿真和实验验证,仿真数据及实验结果均验证了该方法对晶闸管三相半控整流电路谐波外特性拟合的准确性. 展开更多
关键词 耦合导纳矩阵 非线性负载 三相全桥晶闸管整流电路 电能质量优化
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东天山红石岗镁铁—超镁铁质岩体成因及铜镍成矿潜力 被引量：7
15
作者 师震 陈宏骏 +4 位作者 钱壮志 徐刚 冯延清 段俊 任萌 《地球科学与环境学报》 CAS 北大核心 2019年第2期156-169,共14页
红石岗岩体是新疆东天山铜镍成矿带东段近年来新发现的含铜镍矿化的镁铁—超镁铁质岩体。红石岗岩体由橄榄岩相、辉长岩相和闪长岩相组成,铜镍硫化物主要赋存于辉长岩相和橄榄岩相中。辉长岩中锆石U-Pb定年表明红石岗镁铁—超镁铁质岩... 红石岗岩体是新疆东天山铜镍成矿带东段近年来新发现的含铜镍矿化的镁铁—超镁铁质岩体。红石岗岩体由橄榄岩相、辉长岩相和闪长岩相组成,铜镍硫化物主要赋存于辉长岩相和橄榄岩相中。辉长岩中锆石U-Pb定年表明红石岗镁铁—超镁铁质岩体的形成年龄为(280±1)Ma,与东天山其他主要含铜镍矿岩体形成年龄一致。红石岗岩体中橄榄石Fo牌号为82.2～87.3,Ni含量为(1 240～3 470)×10^(-6),橄榄石Fo牌号与Ni含量的关系表明岩浆在橄榄石结晶过程存在硫化物熔离,但是模拟计算表明仅橄榄石分离结晶不能使岩浆中硫化物达到饱和。红石岗岩体全岩微量元素特征为轻稀土元素富集,具明显的Nb、Ta负异常,Nb/Yb-Th/Yb图解表明其母岩浆侵位过程中曾经历了10%～20%的地壳物质混染,这可能促使母岩浆中发生硫化物熔离。红石岗镁铁—超镁铁质岩体具有与东天山铜镍成矿带内其他含矿岩体相似的成岩成矿时代、母岩浆特征及硫化物饱和机制,表明红石岗岩体具有形成铜镍硫化物矿床的潜力。 展开更多
关键词 锆石U-Pb定年 矿物晶体化学 岩石地球化学 镁铁—超镁铁质岩体 铜镍硫化物 成矿潜力 东天山
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鸭坦布苏病毒分离鉴定及全基因组序列分析 被引量：7
16
作者 王宾宾 闫大为 +6 位作者 倪欣涛 李雪松 滕巧泱 杨健美 陈鸿军 刘芹防 李泽君 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2017年第6期8-14,共7页
本文采集2015年浙江省2个鸭养殖场中疑似鸭坦布苏病毒(Duck Tembusu virus,DTMUV)感染的雌麻鸭卵巢病料,经组织研磨处理,DF-1细胞纯化,成功分离了2株鸭坦布苏病毒(DTMUV),分别命名为ZJ201501和ZJ201504。利用9对两两相互重叠的PCR引物,... 本文采集2015年浙江省2个鸭养殖场中疑似鸭坦布苏病毒(Duck Tembusu virus,DTMUV)感染的雌麻鸭卵巢病料,经组织研磨处理,DF-1细胞纯化,成功分离了2株鸭坦布苏病毒(DTMUV),分别命名为ZJ201501和ZJ201504。利用9对两两相互重叠的PCR引物,对这2株病毒的全基因进行分段PCR扩增,经序列测定和拼接,得到病毒的全基因组序列。核苷酸序列和E蛋白氨基酸序列比对分析发现:ZJ201501和ZJ201504的核苷酸同源性高达99.9%,全长氨基酸仅有2个位点差异;与选取的19株DTMUV参考序列相比,在核苷酸水平和E蛋白氨基酸水平上,其同源性分别大于97.1%和98.4%,而ZJ201501和ZJ201504与早期分离的DTMUV FX2010遗传距离最远,这表明DTMUV在鸭群中发生了一定的变异。本研究为进一步了解DTMUV的遗传进化提供了理论依据。 展开更多
关键词 鸭坦布苏病毒 分离鉴定 全基因组序列测定 进化树
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非洲猪瘟病毒多基因家族成员MGF360-12L RPA检测方法的建立 被引量：9
17
作者 吴映彤 王西西 +3 位作者 吴竞 陈鸿军 朱鸿飞 郭晓宇 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2020年第2期20-25,共6页
为建立一种简便、快速的针对非洲猪瘟病毒(ASFV)多基因家族成员MGF360-12L的分子检测方法,基于MGF360-12L基因序列,设计并合成引物,建立重组酶聚合酶扩增(RPA)等温检测方法。结果表明,于35℃恒温反应30 min,即可实现对目的片段的稳定扩... 为建立一种简便、快速的针对非洲猪瘟病毒(ASFV)多基因家族成员MGF360-12L的分子检测方法,基于MGF360-12L基因序列,设计并合成引物,建立重组酶聚合酶扩增(RPA)等温检测方法。结果表明,于35℃恒温反应30 min,即可实现对目的片段的稳定扩增;以含有MGF360-12L基因的重组质粒为模板,RPA反应的检测限达到10~3个拷贝,同普通PCR方法检测限一致;此外,该RPA方法仅特异性扩增非洲猪瘟病毒MGF360-12L基因,对PEDV、FMDV、CSFV、PRRSV、PRV 和 PCV-2基因组cDNA或DNA没有扩增。本研究建立的RPA方法操作简单、反应快速、检测成本低,能够为ASFV相关基因缺失毒株的鉴别诊断提供一定技术支持。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 MGF360-12L RPA
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H9N2亚型禽流感病毒样颗粒疫苗的制备研究 被引量：4
18
作者 潘学 陈新武 +6 位作者 季雅宁 李雪松 刘芹防 陈鸿军 杨健美 滕巧泱 李泽君 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2019年第1期1-7,共7页
目前,我国现有的商品化灭活苗无法完全保护免疫鸡免受H9N2亚型禽流感病毒流行株的感染。病毒样颗粒(virus-like particle,VLP)疫苗的免疫效果及其安全性优于灭活苗,成为近年研究的热点。本研究旨在建立一种H9N2亚型流感病毒VLP疫苗制备... 目前,我国现有的商品化灭活苗无法完全保护免疫鸡免受H9N2亚型禽流感病毒流行株的感染。病毒样颗粒(virus-like particle,VLP)疫苗的免疫效果及其安全性优于灭活苗,成为近年研究的热点。本研究旨在建立一种H9N2亚型流感病毒VLP疫苗制备的方法。将优化的H9N2亚型禽流感病毒的HA、NA基因和未优化的HA、NA基因分别插入到pFastBack^(TM)Dual载体中,得到相应的重组供体。然后将这些重组供体转化至含Bacmid的DH10Bac感受态细胞中,获得含有目的基因的重组杆粒。将重组杆粒转染Sf9昆虫细胞,红细胞凝集试验、SDS-PAGE和Western blot结果显示,优化的HA、NA基因编码的蛋白在Sf9昆虫细胞中获得了成功表达。通过透射电子显微镜观察细胞上清的浓缩液,能检测到VLP。结果表明,本研究在Sf9昆虫表达系统中成功表达了H9N2亚型禽流感病毒的HA和NA蛋白,并形成了VLP,为进一步研究该病毒VLP疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 流感病毒 基因优化 HA NA 病毒样颗粒
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一株欧洲类禽H1N1猪流感病毒的分离鉴定与反向遗传系统的建立 被引量：5
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作者 胡晓鲁 张婷 +7 位作者 兰海玲 李雪松 杨健美 滕巧泱 陈鸿军 李泽君 刘芹防 关平原 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2019年第3期27-32,共6页
猪流感是猪常见的呼吸道传染病,临床以高热、呼吸困难、咳嗽和衰竭、迅速康复或死亡为特征。猪流感不仅给养猪业造成巨大损失,也严重威胁着人类健康。本研究从发病猪场中分离到1株H1N1亚型猪流感病毒,序列分析结果显示,分离毒株属于欧... 猪流感是猪常见的呼吸道传染病,临床以高热、呼吸困难、咳嗽和衰竭、迅速康复或死亡为特征。猪流感不仅给养猪业造成巨大损失,也严重威胁着人类健康。本研究从发病猪场中分离到1株H1N1亚型猪流感病毒,序列分析结果显示,分离毒株属于欧洲类禽猪流感H1N1亚型病毒。将分离毒株分别接种到MDCK与ST细胞,观察病毒的生长特性,结果显示分离的猪流感病毒在ST细胞中复制能力较强。采用RT-PCR技术分别扩增8个基因片段,克隆到流感病毒反向遗传系统,成功拯救出猪流感病毒毒株,测序结果显示拯救的猪流感病毒与亲本毒序列一致。本研究成功分离的猪流感病毒,以及建立的反向遗传技术为研究欧洲类禽猪流感病毒跨种传播的机制以及研发新型猪流感疫苗株奠定了基础。 展开更多
关键词 欧洲类禽猪流感病毒 H1N1亚型 反向遗传系统
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非洲猪瘟病毒p30单克隆抗体的制备和鉴定 被引量：4
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作者 杨莎莎 苗雨润 +8 位作者 薄宗义 王振忠 谭凯 鲍晨沂 吴晓东 陈鸿军 郑龙三 钱莺娟 戴建君 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期976-981,共6页
p30蛋白是非洲猪瘟病毒(ASFV)的膜蛋白,在病毒感染早期分泌表达,含量丰富且抗原性较高,是重要的病毒早期诊断靶标。本研究以ASFV基因Ⅱ型格鲁吉亚2007株p30基因的质粒为模板扩增p30基因片段,连接至原核表达载体pET-28a,转化到大肠杆菌Ro... p30蛋白是非洲猪瘟病毒(ASFV)的膜蛋白,在病毒感染早期分泌表达,含量丰富且抗原性较高,是重要的病毒早期诊断靶标。本研究以ASFV基因Ⅱ型格鲁吉亚2007株p30基因的质粒为模板扩增p30基因片段,连接至原核表达载体pET-28a,转化到大肠杆菌Rosetta后,经IPTG诱导表达和镍柱纯化;将纯化后的重组p30蛋白作为免疫原免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤细胞融合和间接ELISA方法,筛选出了2株能够稳定分泌抗p30蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞,并通过制备腹水的方法获得单克隆抗体;最后经Western-blot和IFA试验鉴定,其均能与ASFV感染细胞发生特异性反应。本研究为ASFV感染的诊断和致病机制研究提供了重要材料。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 p30蛋白 单克隆抗体
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