抗肠出血性大肠杆菌O157:H7 EspA单克隆抗体的制备及其特性鉴定 被引量：5

1

作者 余抒 罗萍 +2 位作者 陈洪章 李海侠 毛旭虎 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期657-659,共3页

目的:制备抗肠出血性大肠杆菌O157:H7EspA单克隆抗体(mAb)。方法:以重组EspA蛋白为免疫原免疫BALB/c小鼠,运用杂交瘤技术并且联合间接ELISA筛选只针对EspA的杂交瘤细胞株。以Ig类与亚类鉴定试剂盒鉴定mAb的Ig亚类,ELISA、Western blot... 目的:制备抗肠出血性大肠杆菌O157:H7EspA单克隆抗体(mAb)。方法:以重组EspA蛋白为免疫原免疫BALB/c小鼠,运用杂交瘤技术并且联合间接ELISA筛选只针对EspA的杂交瘤细胞株。以Ig类与亚类鉴定试剂盒鉴定mAb的Ig亚类,ELISA、Western blot及免疫荧光技术鉴定抗体的免疫学特性。结果:获得3株稳定分泌抗EspA杂交瘤细胞的mAb,Ig亚型分别为IgG1κ型、IgG2aκ型、IgG2bκ型。Western blot和免疫荧光分析表明,3株杂交瘤细胞制备的mAb腹水都能特异地结合重组EspA蛋白和识别O157:H7的EspA成分。结论:成功地制备了抗肠出血性大肠杆菌O157:H7EspA的mAb,并证明了该mAb的生物学活性,为深入研究肠出血性大肠杆菌O157:H7的致病机制提供新的手段。 展开更多

关键词 EspA 单克隆抗体 特性鉴定

原文传递

肠出血性大肠埃希菌O157∶H7黏附HeLa细胞模型的建立 被引量：4

2

作者 余抒 顾江 +6 位作者 曾浩 杨琴 刘艳青 张卫军 罗萍 王庆旭 毛旭虎 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第20期1933-1935,共3页

目的建立肠出血性大肠埃希菌O157∶H7体外黏附HeLa细胞模型,为进一步研究其致病机制奠定基础。方法以细菌黏附HeLa细胞数量为指标,分别评价细菌数量、细菌与细胞孵育时间对细菌黏附数量的影响,得到最佳条件,最后肌动蛋白荧光染色(FAS)... 目的建立肠出血性大肠埃希菌O157∶H7体外黏附HeLa细胞模型,为进一步研究其致病机制奠定基础。方法以细菌黏附HeLa细胞数量为指标,分别评价细菌数量、细菌与细胞孵育时间对细菌黏附数量的影响,得到最佳条件,最后肌动蛋白荧光染色(FAS)试验鉴定模型。结果加入细菌为1×105CFU,细菌与细胞孵育4h时,黏附细胞的数量最佳,FAS检测发现该条件下细菌能够引起细胞特异性黏附、擦拭(attaching&effacing,A/E)损伤,模型建立成功。结论成功建立O157∶H7体外黏附HeLa细胞模型,为进一步研究其致病机制提供了条件。 展开更多

关键词 肠出血性大肠埃希菌O157:H7 细胞模型 HELA细胞

暂未订购

CD4^+T细胞新亚群——Th9细胞研究新进展 被引量：4

3

作者 余抒 吴超 +1 位作者 陈立 邹全明 《国际检验医学杂志》 CAS 2011年第14期1592-1594,共3页

传统意义上的CD4＋T细胞在接受外来抗原刺激后经过两类经典途径分化为Thl和Th2细胞，参与体液和细胞免疫应答。除Thl和Th2细胞外，调节性T细胞（Treg）和Thl7细胞属于CD4＋T细胞。

关键词 白细胞介素21 研究 TH9细胞

暂未订购

阿尔茨海默病及诊断学研究进展 被引量：8

4

作者 余抒 府伟灵 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2016年第1期49-51,共3页

阿尔茨海默病(AD)从被发现到深入研究已经历了一个世纪,但由于缺乏疾病临床前期的诊断方法和有效的治疗手段,使其成为目前十大致死性疾病中唯一无法预防、治愈或延缓病程的疾病,它的危害已经作为全球性的公共卫生问题被提出。本文概述... 阿尔茨海默病(AD)从被发现到深入研究已经历了一个世纪,但由于缺乏疾病临床前期的诊断方法和有效的治疗手段,使其成为目前十大致死性疾病中唯一无法预防、治愈或延缓病程的疾病,它的危害已经作为全球性的公共卫生问题被提出。本文概述了AD的发病机制、诊断方法、治疗策略,并进一步阐述该疾病的研究进展和诊断学演变过程,以期为更好地统一早期诊断标准提供依据。 展开更多

关键词 阿尔茨海默病 发病机制 诊断学演变 早期诊断

暂未订购

EHEC O157与宿主细胞作用的效应分子和易位分子研究进展

5

作者 余抒 毛旭虎 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期939-941,共3页

关键词 EHEC O157 易位分子 效应分子 细胞作用 血栓性血小板减少性紫癜 溶血性尿毒综合征 宿主

暂未订购

抗幽门螺旋杆菌尿素酶B亚单位(UreB)单克隆抗体抗原识别表位的初步鉴定 被引量：5

6

作者 李海侠 吴亚男 +5 位作者 王宪灵 张卫军 罗平 余抒 陈洪章 毛旭虎 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期184-186,190,共4页

目的初步确定抗幽门螺杆菌尿素酶B亚单位(UreB)单克隆抗体(mAb)6E6识别的抗原表位。方法采用截短法分段构建含UreB抗原的重组质粒,分别命名为U12,U13,U15,U16,U47。用IPTG诱导表达融合蛋白。对表达产物进行SDS-PAGE蛋白电泳及Westernblo... 目的初步确定抗幽门螺杆菌尿素酶B亚单位(UreB)单克隆抗体(mAb)6E6识别的抗原表位。方法采用截短法分段构建含UreB抗原的重组质粒,分别命名为U12,U13,U15,U16,U47。用IPTG诱导表达融合蛋白。对表达产物进行SDS-PAGE蛋白电泳及Westernblot分析。结果6E6能够分别识别1～300位氨基酸的U12片段,1～260位氨基酸的U16片段,1～230位氨基酸的U15片段,而不能识别1～200位氨基酸的U13片段和251～389位氨基酸的U47片段。结论mAb6E6抗体识别的抗原表位位于200～230位氨基酸。 展开更多

关键词 幽门螺杆菌 UreB分段抗原分子 单克隆抗体 抗原表位

暂未订购

幽门螺杆菌感染蒙古沙鼠模型胃黏膜菌群多样性研究 被引量：4

7

作者 宋阳 胡琳琳 +6 位作者 黄薇薇 余抒 廖亚玲 顾江 任莉 邹全明 郭刚 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期805-808,共4页

目的对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染蒙古沙鼠模型胃黏膜菌群多样性进行研究,探讨Hp感染与胃内菌群的关系。方法建立Hp感染的蒙古沙鼠模型,空白对照组、阴性对照组、直接感染组和预处理感染组各15例,4周后采集胃黏膜样本,同... 目的对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染蒙古沙鼠模型胃黏膜菌群多样性进行研究,探讨Hp感染与胃内菌群的关系。方法建立Hp感染的蒙古沙鼠模型,空白对照组、阴性对照组、直接感染组和预处理感染组各15例,4周后采集胃黏膜样本,同时检测HP定植率,并提取细菌基因组DNA,采用聚合酶链反应-变性梯度凝胶电泳技术(PCR-DGGE)对黏膜局部菌群进行指纹图谱分析,并对特异性条带进行测序鉴定分析。结果预处理感染组感染率(93.3%)与直接感染组感染率(26.7%)有明显差异(P<0.05);各实验组PCR-DGGE指纹图谱分析显示条带数量,空白对照组(21.6±2.5)、阴性对照组(3.3±1.1)、直接感染组(14.6±2.4)和预处理感染组(7.2±2.2),经统计学分析,各组间均有明显差异(P<0.05),提示蒙古沙鼠各组间菌群多样性存在显著的差异性。结论 Hp感染与胃黏膜菌群结构的变化密切相关。 展开更多

关键词 胃内菌群 幽门螺杆菌感染 聚合酶链反应-变性梯度凝胶电泳技术

原文传递

抗重组志贺毒素ⅡB亚基单克隆抗体的制备及生物学特性鉴定 被引量：4

8

作者 陈洪章 邹全明 +5 位作者 罗萍 毛旭虎 曾浩 马颖 余抒 曾明 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期148-151,共4页

目的制备出高效价的抗重组志贺毒素ⅡB亚基(rStx2B)单克隆抗体。方法以融合蛋白EspA-Stx2B作为抗原,免疫Balb/c小鼠,以未免疫的Balb/c小鼠脾细胞为饲养细胞;运用细胞杂交瘤技术制备,运用间接ELISA法筛选产生针对rStx2B的单克隆抗体细胞... 目的制备出高效价的抗重组志贺毒素ⅡB亚基(rStx2B)单克隆抗体。方法以融合蛋白EspA-Stx2B作为抗原,免疫Balb/c小鼠,以未免疫的Balb/c小鼠脾细胞为饲养细胞;运用细胞杂交瘤技术制备,运用间接ELISA法筛选产生针对rStx2B的单克隆抗体细胞株;体内诱生法产生腹水,饱和硫酸铵沉淀法初步纯化,再采用HiTraprProteinA柱进一步纯化,快速定性试纸鉴定McAb的Ig亚型,采用间接ELISA法相加实验鉴定抗原识别表位。结果获得3株产生针对rStx2B的单克隆抗体细胞株Stx2B-1H9、Stx2B-1H10、Stx2B-3E5,Ig亚型分别为IgG1κ型,IgG2aκ型,IgG2bκ型,亲和力常数分别为7.36×108、6.94×108、5.85×108。结论成功制备3株稳定分泌抗rStx2B的杂交瘤细胞株,产生的McAb特异性好,亲和力高,为应用这些单克隆抗体建立免疫亲和层析法纯化天然志贺毒素Ⅱ,鉴定Stx2B的表位,研究针对EHECO157:H7感染的治疗性抗体奠定了基础。 展开更多

关键词 志贺毒素ⅡB亚基 单克隆抗体 生物学特性

暂未订购

原核融合表达载体的设计、构建及应用 被引量：4

9

作者 程琰 毛旭虎 +5 位作者 王庆旭 余抒 刘艳青 张晓丽 宁亚蕾 邹全明 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期618-624,共7页

目的利用EspA(肠出血性大肠杆菌O157:H7Ⅲ型分泌蛋白A)作为融合伴体分子,构建一种高效原核融合表达载体。方法在EspA的羧基端设计一Linker,包括柔韧区,肠激酶酶切位点和多克隆位点。PCR分别扩增EspA、Linker基因,利用重叠延伸PCR技术获... 目的利用EspA(肠出血性大肠杆菌O157:H7Ⅲ型分泌蛋白A)作为融合伴体分子,构建一种高效原核融合表达载体。方法在EspA的羧基端设计一Linker,包括柔韧区,肠激酶酶切位点和多克隆位点。PCR分别扩增EspA、Linker基因,利用重叠延伸PCR技术获得二者融合基因,T-A克隆后插入表达载体pET-28a(+),构建高效原核表达载体-pEspA。分别将IL-24、GFP等六种基因克隆入pEspA,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导融合蛋白表达,SDS-PAGE检测融合蛋白。以EspA单克隆抗体亲和层析柱纯化融合蛋白,融合蛋白经肠激酶酶切后再通过Ni2+亲和层析柱获得外源蛋白。分别利用MTT法和紫外光激发实验鉴定IL-24、GFP生物学活性。结果构建的表达载体pEspA可高效表达外源目的蛋白,使本身不表达或表达量低的目的蛋白获得高效表达。先以EspA单克隆抗体亲和层析一步纯化获得高纯度的融合蛋白,融合蛋白经肠激酶酶切后再以Ni2+亲和层析柱获得了外源蛋白,同时生物学活性实验显示纯化的IL-24、GFP具有较好的生物学活性。结论成功构建了基于EspA的新型高效原核融合表达载体,为蛋白的融合表达及纯化又提供了一种可供选择的工具。 展开更多

关键词 EspA 融合表达载体 肠出血性大肠杆菌O157:H7

原文传递

抗志贺毒素ⅡB亚单位单克隆抗体识别表位的初步鉴定 被引量：1

10

作者 陈洪章 曾浩 +3 位作者 毛旭虎 罗萍 余抒 邹全明 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第19期1831-1833,共3页

目的初步确定抗志贺毒素ⅡB亚单位(Stx2B)单克隆抗体(McAb)1H9、1H10、3E5识别的抗原表位。方法运用DNAstar Protean软件,对Stx2B(1～72aa)全抗原进行表位预测;采用截短法分段构建重组质粒Stx2B50(23～72aa),Stx2B54(1～54aa)。用IPTG... 目的初步确定抗志贺毒素ⅡB亚单位(Stx2B)单克隆抗体(McAb)1H9、1H10、3E5识别的抗原表位。方法运用DNAstar Protean软件,对Stx2B(1～72aa)全抗原进行表位预测;采用截短法分段构建重组质粒Stx2B50(23～72aa),Stx2B54(1～54aa)。用IPTG诱导表达融合蛋白。对表达产物进行SDS-PAGE蛋白电泳及Westernblot分析。结果1H9、1H10能够识别Stx2B和Stx2B50;3E5能够识别Stx2B、Stx2B50和Stx2B54。结论McAb1H9、1H10识别的抗原表位位于55～72aa,McAb3E5识别的抗原表位位于23～54aa。 展开更多

关键词 志贺毒素ⅡB亚基 抗原表位 鉴定

暂未订购

致病性大肠杆菌引发宿主细胞A／E损伤分析方法的建立 被引量：1

11

作者 王海光 顾江 +4 位作者 余抒 张卫军 邹全明 朱凤才 毛旭虎 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期659-662,共4页

目的建立一种能够对由致病性大肠杆菌引发的宿主细胞黏附及擦拭性损伤(A/E损伤)进行半定量分析的方法,为进一步研究其致病性提供评价手段。方法以大肠杆菌黏附HeLa细胞作为感染模型。采用姬姆萨染色和荧光肌动蛋白染色实验,通过菌落计... 目的建立一种能够对由致病性大肠杆菌引发的宿主细胞黏附及擦拭性损伤(A/E损伤)进行半定量分析的方法,为进一步研究其致病性提供评价手段。方法以大肠杆菌黏附HeLa细胞作为感染模型。采用姬姆萨染色和荧光肌动蛋白染色实验,通过菌落计数及肌动蛋白聚集数量定量分析,统计学处理,比较EPEC 43095、EHEC O157∶H7 Sakai株和弱毒株EHEC O157∶H7 00B015以及E.coliDH5α对HeLa细胞的黏附能力,评价它们对细胞的损伤程度。结果EPEC对细胞的黏附及擦拭性损伤程度大于EHEC(P<0.05)。EHEC Sakai和00B015在黏附能力上差异不大(P>0.05),但是,Sakai在肌动蛋白聚集形成能力方面却明显强于00B015(P<0.05)。结论成功建立了一种能够对EPEC或EHEC所引发的宿主细胞黏附及擦拭性损伤进行半定量分析的方法。 展开更多

关键词 肠致病性大肠杆菌 肠出血性大肠杆菌 黏附和擦拭性损伤

原文传递

幽门螺杆菌尿素酶B亚单位的分段表达及免疫学性质分析 被引量：1

12

作者 赵卓 陈立 +3 位作者 罗萍 余抒 吴超 邹全明 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期260-263,共4页

目的分段表达幽门螺杆菌(HP)尿素酶B亚单位(UreB),并对其进行免疫学性质分析,为精确定位其保护性表位奠定基础。方法用生物信息学软件分析UreB全长基因,选择分段点,PCR分别扩增其5个片段,构建于pET-11c(+)原核表达载体,并转化大肠杆菌BL... 目的分段表达幽门螺杆菌(HP)尿素酶B亚单位(UreB),并对其进行免疫学性质分析,为精确定位其保护性表位奠定基础。方法用生物信息学软件分析UreB全长基因,选择分段点,PCR分别扩增其5个片段,构建于pET-11c(+)原核表达载体,并转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析蛋白表达情况,ELISA及Western blot分别鉴定其免疫原性及抗原性。结果成功克隆了UreB的5个基因片段,基因测序结果与Genbank公布的序列一致.经SDS-PAGE分析,5个蛋白表达相对分子质量大小都与预期相符,在大肠杆菌中实现了表达。ELISA和Western blot分析显示,表达的5个蛋白表现出良好的抗原性和免疫原性。结论 UreB的分段表达为进一步研究UreB保护性表位及HP疫苗鉴定奠定了新的基础。 展开更多

关键词 幽门螺杆菌 尿素酶B亚单位

原文传递

基于新月柄杆菌RsaA外运机制的EspA及EspA-IL-24融合蛋白胞外分泌表达研究

13

作者 宁亚蕾 周立雄 +4 位作者 毛旭虎 张卫军 程琰 余抒 邹全明 《生物技术通讯》 CAS 2008年第3期353-357,共5页

目的:实现大肠杆菌分泌蛋白(Esp)A及EspA与白细胞介素(IL)-24融合蛋白的胞外分泌表达,进一步验证基于新月柄杆菌RsaA外运机制的原核胞外分泌表达载体系统的有效性和通用性,并改造优化该系统。方法:利用分子克隆手段,按RsaA分泌系统操纵... 目的:实现大肠杆菌分泌蛋白(Esp)A及EspA与白细胞介素(IL)-24融合蛋白的胞外分泌表达,进一步验证基于新月柄杆菌RsaA外运机制的原核胞外分泌表达载体系统的有效性和通用性,并改造优化该系统。方法:利用分子克隆手段,按RsaA分泌系统操纵子组织方式,将获得的RsaA系统元件编码序列和异源调控序列克隆至pQE30骨架质粒,构建新的胞外分泌表达质粒pQABP2S;以大肠杆菌为宿主菌诱导表达EspA及EspA-IL-24融合蛋白,并通过Westernblot检测目标蛋白在培养上清中的表达。结果:获得了新的胞外分泌表达载体pQABP2S;与对照相比,该载体宿主系统培养上清中目标蛋白EspA及EspA-IL-24的表达量明显增加。结论:在大肠杆菌中通过RsaA分泌系统可实现分子大小不同的EspA及EspA-IL-24融合蛋白的特异性分泌表达,进一步证实该分泌表达策略的有效性和通用性;调整调控序列以优化分泌系统的尝试,为此类基因工程技术平台的开发提供了借鉴。 展开更多

关键词 新月柄杆菌 RsaA分泌系统 大肠杆菌分泌蛋白A 白细胞介素-24 分泌表达 表达载体 大肠杆菌

在线阅读 下载PDF 职称材料

“迈瑞”全自动生化分析仪的偏倚评估研究 被引量：4

14

作者 徐含青 刘跃平 +9 位作者 府伟灵 黄君富 李永川 赵娜 杨昭 杨翔 任章银 王珂 余抒 黄庆 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期997-1002,共6页

目的对"迈瑞"多个型号的全自动生化分析仪进行偏倚评估,为遴选优秀国产生化设备提供实验依据。方法参照CLSI EP9-A2文件,以"贝克曼"AU5400为参比检测系统,"迈瑞"4个型号(BS200、BS380、BS480和BS820)为... 目的对"迈瑞"多个型号的全自动生化分析仪进行偏倚评估,为遴选优秀国产生化设备提供实验依据。方法参照CLSI EP9-A2文件,以"贝克曼"AU5400为参比检测系统,"迈瑞"4个型号(BS200、BS380、BS480和BS820)为实验检测系统,对15项常规生化项目进行比对分析。通过比较两个检测系统的决定系数R^2、线性回归方程斜率和医学决定水平处的偏差进行偏倚评估。结果实验检测系统和参比检测系统的相关性良好。两个检测系统间存在一定的系统偏差,但以我国卫生行业标准为质量目标,只有血清总蛋白、白蛋白和钙3个项目与参比检测系统不具可比性(即TP、ALB、CA的质量目标分别是5%、6%、5%,BS200、BS380、BS480和BS820中TP的平均偏倚分别为8.74%、4.59%、5.85%、8.26%,ALB的平均偏倚分别为12.66%、14.07%、11.66%、12.99%,CA的平均偏倚分别为6.79%、7.85%、7.7%、8.96%,3个项目在4台仪器均出现1个或多个医学决定水平的偏倚大于质量目标),其余12个项目具有可比性。结论 "迈瑞"与"贝克曼"检测系统的偏倚在临床可接受范围内,可在基层医院推广使用。 展开更多

关键词 检测系统 生化分析仪 偏倚评估

原文传递

IL-8和NGAL在儿童早期尿路感染诊断中的价值探讨 被引量：5

15

作者 余抒 刘跃平 府伟灵 《国际检验医学杂志》 CAS 2019年第18期2191-2194,共4页

目的探讨尿液中白细胞介素-8(IL-8)和中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)的水平变化与尿路感染及早期肾脏损伤的关系。方法一共将6周岁以下儿童120例纳入研究,其中确诊为尿路感染的患儿80例作为尿路感染组,包括40例初次确诊和40例... 目的探讨尿液中白细胞介素-8(IL-8)和中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)的水平变化与尿路感染及早期肾脏损伤的关系。方法一共将6周岁以下儿童120例纳入研究,其中确诊为尿路感染的患儿80例作为尿路感染组,包括40例初次确诊和40例治疗后复发的尿路感染患者,40例未发生急慢性尿路感染的健康儿童。采用发光免疫分析仪分别检测入组儿童尿液标本中IL-8和NAGL的浓度,分析两者在不同临床分组中的表达变化,对结果进行统计学分析。结果与对照组比较,NAGL、IL-8在尿路感染组中均显著升高(P<0.05),并且初次诊断组的水平明显高于复发组(P<0.05);同时,伴有合并症的尿路感染患儿NAGL水平显著高于单纯尿路感染的患儿(P<0.05)。结论IL-8可作为尿路感染的早期诊断候选指标,NAGL可作为尿路感染伴早期肾脏损伤的特征性指标,为快速诊断儿童尿路感染提供实验依据,并用于开发快速、简单、低成本的儿童尿路感染诊断方法和临床监测方法。 展开更多

关键词 尿路感染 白细胞介素-8 中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白 早期肾损伤 快速诊断

暂未订购

血清HBV DNA载量与血小板参数的相关性研究 被引量：2

16

作者 李亚军 余抒 《检验医学与临床》 CAS 2023年第4期527-530,534,共5页

目的探讨不同乙型肝炎病毒(HBV)DNA载量水平患者的血小板参数差异,分析血小板参数与HBV DNA载量水平的相关性,以期为临床治疗慢性乙型肝炎(CHB)提供参考依据。方法随机选取CHB 194例作为病例组,并以健康体检者200例作为对照组,分别检测H... 目的探讨不同乙型肝炎病毒(HBV)DNA载量水平患者的血小板参数差异,分析血小板参数与HBV DNA载量水平的相关性,以期为临床治疗慢性乙型肝炎(CHB)提供参考依据。方法随机选取CHB 194例作为病例组,并以健康体检者200例作为对照组,分别检测HBV DNA载量、乙肝表面标志物[乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝表面抗体(HBsAb)、乙肝e抗原(HBeAg)、乙肝e抗体(HBeAb)、乙肝核心抗体(HBcAb)]、血小板参数[血小板计数(PLT)、血小板分布宽度(PDW)、平均血小板体积(MPV)、大血小板比率(P-LCR)]。根据HBV DNA载量不同分为低载量组(<105 copy/mL)、中载量组(105~107 copy/mL)和高载量组(>107 copy/mL),分析不同组别血小板参数的差异。结果大三阳CHB患者以低龄人群为主,小三阳CHB患者以高龄人群为主;病例组血小板参数(PLT、PDW、MPV、P-LCR)与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);小三阳人群中,PLT与HBV DNA载量呈负相关(P<0.05),MPV、P-LCR与HBV DNA载量协同升高,PDW、MPV、P-LCR与HBV DNA载量呈正相关(P<0.05)。结论血小板参数与HBV在体内的复制情况密切相关,临床在制订治疗方案及评价疗效时,可以将HBV DNA载量与血小板参数联合考虑。 展开更多

关键词 乙型肝炎病毒 DNA载量 血小板计数 大血小板比率

暂未订购

D-二聚体和纤维蛋白(原)降解产物质控品复溶后稳定性研究 被引量：1

17

作者 李亚军 孙滔 余抒 《检验医学与临床》 2024年第5期703-707,共5页

目的 探讨D-二聚体(D-D)和纤维蛋白(原)降解产物(FDP)冻干质控品复溶后不同保存方法对其结果稳定性的影响。方法 取同批次10瓶低值FDP质控品分别复溶后混合成一瓶并充分混匀后分装入30支EP管,每支分装300μL;再取同批次10瓶高值FDP质控... 目的 探讨D-二聚体(D-D)和纤维蛋白(原)降解产物(FDP)冻干质控品复溶后不同保存方法对其结果稳定性的影响。方法 取同批次10瓶低值FDP质控品分别复溶后混合成一瓶并充分混匀后分装入30支EP管,每支分装300μL;再取同批次10瓶高值FDP质控品进行同样复溶分装处理。低值和高值各取15支EP管作为冷藏组(4℃保存),再将低值和高值分别剩余的15支EP管作为冷冻组(—20℃保存)。每日分别取冷藏组和冷冻组EP管各1支,室内自然复温平衡30 min后使用相同仪器及试剂检测D-D和FDP各5次,连续进行15 d,共检测150次,评价分装质控样本的均一性、冷冻保存法的精密度。观察分装冷冻保存法累积精密度[均值(x)、标准差(s)和变异系数(CV)]与室内质控效果。结果 冷藏组D-D和FDP低值第4~15天、D-D高值第6~15天、FDP高值第10~15天检测值均明显低于第1天,差异均有统计学意义(P<0.05)。冷冻组D-D低值第10~15天、D-D高值第11~15天、FDP低值和高值第14~15天检测值均明显低于第1天,差异均有统计学意义(P<0.05)。冷冻组D-D、FDP的低值与高值下降趋势均比冷藏组缓慢,且D-D和FDP低值与高值的(x±s)均高于冷藏组,CV均低于冷藏组,差异均有统计学意义(P<0.05)。D-D和FDP各水平10个月的室内质控结果累积CV符合美国临床实验室改进修正案′88规范。结论 分装冷冻保存对D-D和FDP冻干质控品复溶后的保存效果好,值得推广应用。 展开更多

关键词 D-二聚体 纤维蛋白(原)降解产物 质控品 冷冻保存法 稳定性

暂未订购

肠出血性大肠杆菌O157：H7 EspA—Stx2B融合蛋白的克隆、表达及生物学活性研究

18

作者 王庆旭 毛旭虎 +4 位作者 彭燕 刘艳青 余抒 程建平 邹全明 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期258-262,共5页

目的重组表达肠出血性大肠杆菌（EHEC）O157：H7的EspA与Stx2B融合蛋白，并对其生物学活性进行初步研究。方法采用PCR技术从EHEC O157：H7基因组中扩增espA基因及stx2B基因，两基因通过连接子（1inker）相连，T／A法克隆，克隆至pET-28... 目的重组表达肠出血性大肠杆菌（EHEC）O157：H7的EspA与Stx2B融合蛋白，并对其生物学活性进行初步研究。方法采用PCR技术从EHEC O157：H7基因组中扩增espA基因及stx2B基因，两基因通过连接子（1inker）相连，T／A法克隆，克隆至pET-28a（＋）表达载体上，转化宿主细胞E.coli BL21（DE3），IPTG诱导表达，SDS—PAGE检测其表达量及表达形式，免疫印迹分析免疫反应性。用纯化的融合蛋白免疫BALB／c小鼠，检测其免疫原性，然后对免疫小鼠进行O157活菌攻毒试验和O157超声上清致死保护试验。结果构建的espa—stx2B融合基因片段的测序结果与理论预测值完全一致。融合蛋白在工程菌中以包涵体的形式表达，表达量约40％。免疫印迹显示融合蛋白能分别与EspA和Stx2B抗体发生抗原抗体反应。免疫小鼠其特异性抗体阳转率达100％，EspA和Stx2B抗体的几何平均滴度（GMT）分别增长了124．30倍和58．49倍。免疫小鼠O157活菌攻毒保护试验免疫后排菌时间和排菌量与对照组相比并没有明显改变，O157菌超声上清致死保护试验免疫组存活率为10／15，对照组全部死亡。结论在E．coli中高效表达了EspA—Stx2B融合蛋白，此融合蛋白具有良好的免疫原性和免疫反应性，融合蛋白免疫小鼠并不能降低细菌在小鼠胃肠道的黏附与定植，但却起到明显的免疫保护作用，保护率为66．7％（10／15）。 展开更多

关键词 EHEC O157:H7 EspA stx2B 融合蛋白 基因表达

原文传递