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bFGF通过上调Ras/ERK信号通路诱导BMSCs表达Ⅰ型胶原 被引量:8
1
作者 买霞 陈莉 +2 位作者 扎拉嘎胡 陈小义 王英慧 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期360-363,共4页
目的研究碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblastgrowth factor,bFGF)诱导体外培养大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow derived mesenchymal stem cell,BMSCs)成骨性分化及其作用机制。方法从SD大鼠骨髓中获得BMSCs,纯化培养传代后用... 目的研究碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblastgrowth factor,bFGF)诱导体外培养大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow derived mesenchymal stem cell,BMSCs)成骨性分化及其作用机制。方法从SD大鼠骨髓中获得BMSCs,纯化培养传代后用不同浓度bFGF(5、10、20μg.L-1)在不同时间(d 0、3、5、7、14、21)分别采用透射电镜和光镜观察细胞形态结构变化;用免疫细胞化学和RT-PCR检测Ⅰ型胶原蛋白及mRNA表达;用Western blot和免疫细胞化学方法分析细胞内p-ERK蛋白表达。结果 BMSCs经bFGF作用后在光镜和透射电镜下均为成骨样细胞的形态特征;bFGF促进细胞Ⅰ型胶原蛋白和mRNA表达,同时细胞p-ERK蛋白表达升高。结论 bFGF可活化Ras/ERK信号转导通路,促进BMSCs向成骨细胞分化。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 细胞分化 BFGF Ⅰ型胶原 ERK 细胞培养
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土槿乙酸诱导前列腺癌DU-145细胞周期阻滞的机制研究 被引量:3
2
作者 买霞 徐忠伟 +2 位作者 陈小义 曹波 徐瑞成 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第22期3467-3471,共5页
目的:探讨土槿乙酸(pseudolaric acid B,PLAB)对人前列腺癌细胞株DU-145细胞增殖和细胞周期的影响。方法:MTT法检测PLAB对细胞生长抑制作用;Hoechst 33342荧光染色分析细胞死亡特征;流式细胞术检测细胞周期;Real-timePCR和Western blot... 目的:探讨土槿乙酸(pseudolaric acid B,PLAB)对人前列腺癌细胞株DU-145细胞增殖和细胞周期的影响。方法:MTT法检测PLAB对细胞生长抑制作用;Hoechst 33342荧光染色分析细胞死亡特征;流式细胞术检测细胞周期;Real-timePCR和Western blot检测周期相关基因cyclin B1,CDK1和cyclin D1的表达变化。结果:PLAB明显抑制DU-145细胞生长,且抑制作用呈浓度-作用时间依赖性(P<0.05),其24,48,72 h的IC50分别为4.53,2.39,2.08μmol·L-1。5μmol·L-1PLAB处理细胞24 h,细胞出现核染色质凝集、凋亡小体等典型凋亡特征,随着PLAB浓度升高,G2/M期细胞比例明显增大并表现出时间依赖性(P<0.05),同时伴有cyclin B1和CDK1呈高表达状态(P<0.05),cyclin D1呈低表达状态(P<0.05)。结论:PLAB可抑制DU-145细胞生长,引起细胞G2/M期阻滞,伴随cyclin B1和CDK1呈高表达状态,可能与其调控周期相关蛋白降解有关。 展开更多
关键词 土槿乙酸 人前列腺癌细胞 细胞周期 CYCLIN B1 CDK1 CYCLIN D1
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大鼠骨髓间充质干细胞分离培养及其生物学特性观察 被引量:3
3
作者 买霞 陈莉 +2 位作者 扎拉嘎胡 战丽艳 徐瑞成 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期463-466,I0002,共5页
目的:分离和培养大鼠骨髓间充质干细胞并观察其生物学特性。方法:实验于2004-05/2006-04在武装警察部队医学院细胞生物学实验室进行。在无菌条件下分离大鼠胫骨、股骨,用预冷磷酸盐缓冲液冲出骨髓,经Percoll梯度分离方法获得骨髓单个核... 目的:分离和培养大鼠骨髓间充质干细胞并观察其生物学特性。方法:实验于2004-05/2006-04在武装警察部队医学院细胞生物学实验室进行。在无菌条件下分离大鼠胫骨、股骨,用预冷磷酸盐缓冲液冲出骨髓,经Percoll梯度分离方法获得骨髓单个核细胞,接种含体积分数为0.10胎牛血清的IMDM培养基中。对单个核细胞行贴壁培养后,通过倒置光显微镜和透射电子显微镜进行细胞形态学观察,流式细胞术进行细胞周期分析,细胞计数法测定细胞生长曲线,免疫细胞化学染色显示c-kit表达。结果:①倒置光显微镜下观察采用Percoll(1.073g/mL)分离的骨髓间充质干细胞大小较为均匀,基本上呈梭形或星形的上皮样细胞,传代培养后的细胞体积增大,成纤维样细胞逐渐增多。②透射电子显微镜下观察骨髓间充质干细胞的核质比例较大,核仁大而明显,细胞表面有微绒毛,胞浆内可见核糖体和线粒体,其他细胞器较少,表现出未分化细胞的特征。③细胞生长曲线测定表明接种后第4天细胞进入指数增生期,至第7天进入平台期。④流式细胞术证明G2+S期细胞为11.8%。⑤体积较大的多角形细胞为c-kit阳性,体积较小的成纤维样细胞为阴性细胞,阳性颗粒主要分布在细胞膜和细胞质,细胞核未见表达,阳性细胞比率为55.3%。结论:成功地建立了一种分离培养大鼠骨髓间充质干细胞的方法,获得的细胞生长稳定,增殖活跃,可作为组织工程的种子细胞。 展开更多
关键词 骨髓 间质干细胞 大鼠 细胞培养 免疫细胞化学
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纤维蛋白凝胶促进大鼠间充质干细胞的成骨分化(英文) 被引量:1
4
作者 买霞 李威 +2 位作者 王英慧 扎拉嘎胡 陈小义 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2014年第25期3998-4003,共6页
背景:纤维蛋白是一种天然的可生物降解、组织相容性好的高分子材料,是一种能促进细胞和外源性生长因子释放的载体,其中血纤维蛋白稳定因子ⅩⅢ已证明有利于未分化的间充质干细胞在高度交联的凝胶支架内迁移,并且促进这些细胞的增殖与分... 背景:纤维蛋白是一种天然的可生物降解、组织相容性好的高分子材料,是一种能促进细胞和外源性生长因子释放的载体,其中血纤维蛋白稳定因子ⅩⅢ已证明有利于未分化的间充质干细胞在高度交联的凝胶支架内迁移,并且促进这些细胞的增殖与分化能力。目的:观察大鼠间充质干细胞在纤维蛋白凝胶内的行为。方法:无菌条件下分离大鼠胎肢细胞获得间充质干细胞,取第3代细胞分别接种于0,5,10,20 g/L纤维蛋白凝胶内,用倒置相差显微镜和激光扫描共聚焦显微镜分析细胞在凝胶内的形态学变化;酶标仪和Von Kossa染色分析碱性磷酸酶活性和钙盐沉积。结果与结论:5 g/L低浓度纤维蛋白凝胶有利于细胞形态的发生,20 g/L高浓度凝胶有利于细胞的成骨分化。20 g/L纤维蛋白凝胶碱性磷酸酶活性高于对照组,10和20 g/L浓度纤维蛋白凝胶矿化结节出现在21至28 d,而对照组无矿化结节出现。提示大鼠间充质干细胞的形态与成骨分化依赖于纤维蛋白凝胶浓度,提示纤维蛋白凝胶有助于间充质干细胞的成骨分化。 展开更多
关键词 生物材料 骨生物材料 纤维蛋白凝胶 间充质干细胞 成骨分化 细胞培养 细胞形态 碱性磷酸酶
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土槿乙酸抑制人卵巢癌SKOV_3细胞增殖并诱导G_2/M期阻滞 被引量:1
5
作者 买霞 徐忠伟 +1 位作者 陈小义 徐瑞成 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期508-512,共5页
目的探讨土槿乙酸(pseudolaric acid B,PLAB)对人卵巢癌SKOV3细胞增殖和细胞周期的影响。方法 MTT法检测PLAB对细胞生长抑制作用;Hoechst 33342荧光染色分析细胞死亡特征;流式细胞术检测细胞周期;Real time-PCR和Western blot检测周期... 目的探讨土槿乙酸(pseudolaric acid B,PLAB)对人卵巢癌SKOV3细胞增殖和细胞周期的影响。方法 MTT法检测PLAB对细胞生长抑制作用;Hoechst 33342荧光染色分析细胞死亡特征;流式细胞术检测细胞周期;Real time-PCR和Western blot检测周期相关基因Cyclin B1、CDK1和CyclinD1的表达变化。结果 PLAB明显抑制SKOV3细胞生长,且抑制作用呈浓度-作用时间依赖性(P<0.05),其24、48和72 h的IC50值分别为2.44、1.60、2.94μmol.L-1。5μmol.L-1PLAB处理细胞24 h,细胞出现核染色质凝集、凋亡小体等典型凋亡特征,随着PLAB浓度升高,G2/M期细胞比例明显增大并表现出时间依赖性(P<0.05),同时伴有Cyclin B1和CDK1呈高表达状态(P<0.05),Cyclin D1呈低表达状态(P<0.05)。结论 PLAB可抑制SKOV3细胞生长,引起细胞G2/M期阻滞,伴随Cyclin B1和CDK1呈高表达状态,可能与其调控周期相关蛋白降解有关。 展开更多
关键词 土槿乙酸 人卵巢癌细胞 细胞周期 CYCLIN B1 CDK1 CYCLIN D1
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土槿甲酸对MGC80-3细胞抗肿瘤活性的研究 被引量:2
6
作者 买霞 陈莉 +2 位作者 陈小义 李灵芝 陈虹 《实用肿瘤学杂志》 CAS 2002年第1期1-2,共2页
目的 研究土槿甲酸(PAA)对人胃癌细胞生长、抑制效应,探讨其抗癌作用机制。方法 用不同浓度的PAA加入体外培养的人胃癌细胞(MGC80-3)中,观察加药后细胞生长和有丝分裂指数(MI)的变化;Hoechst33342/PI荧光双染色方法检测细胞凋亡。结果 ... 目的 研究土槿甲酸(PAA)对人胃癌细胞生长、抑制效应,探讨其抗癌作用机制。方法 用不同浓度的PAA加入体外培养的人胃癌细胞(MGC80-3)中,观察加药后细胞生长和有丝分裂指数(MI)的变化;Hoechst33342/PI荧光双染色方法检测细胞凋亡。结果 PAA明显抑制MGC80-3细胞生长;MI于加药后24h较对照组明显降低;凋亡细胞比例在用药后24h达80.4%。结论 PAA可有效抑制人胃癌细胞的增殖。 展开更多
关键词 胃癌 土槿甲酸 细胞增殖
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bFGF通过上调ERK表达诱导BMSCs向神经胶质样细胞分化 被引量:3
7
作者 买霞 陈小义 +1 位作者 杨丽颖 陈莉 《解剖科学进展》 CAS 2012年第6期541-544,548,共5页
目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)促进骨髓间充质干细胞(BMSCs)细胞增殖与分化的作用及其可能机制。方法从SD大鼠骨髓中获得BMSCs,纯化培养传代后用不同浓度的bFGF诱导,经MTT法检测bFGF对BMSCs生长的影响,应用透射电镜和光镜观察... 目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)促进骨髓间充质干细胞(BMSCs)细胞增殖与分化的作用及其可能机制。方法从SD大鼠骨髓中获得BMSCs,纯化培养传代后用不同浓度的bFGF诱导,经MTT法检测bFGF对BMSCs生长的影响,应用透射电镜和光镜观察细胞形态结构变化,免疫细胞化学染色显示GFAP表达,Western blot方法分析p-ERK蛋白表达。结果 bFGF对BMSCs具有促增殖作用,在倒置光显微镜和透射电镜下可见到有神经胶质样细胞形成,免疫细胞化学证明GFAP的表达较对照组显著增高(P<0.01),Western blot证明bFGF上调ERK蛋白表达(P<0.05)。结论 bFGF可活化Ras/ERK信号转导通路,促进BMSCs细胞增殖分化为GFAP阳性的神经胶质样细胞。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 神经胶质样细胞 碱性成纤维细胞生长因子 P-ERK SD大鼠
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钠泵抑制剂哇巴因对ECV304细胞连接相关分子表达的影响 被引量:1
8
作者 买霞 徐瑞成 +2 位作者 陈莉 陈小义 徐忠伟 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期27-31,共5页
目的:探讨钠泵抑制剂哇巴因对细胞连接相关分子表达的影响。方法:以不同浓度哇巴因作用ECV304细胞,用倒置相差显微镜和透射电镜观察细胞形态变化;通过四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞生长抑制作用;用Hoechst33342/PI双荧光染色、荧光显... 目的:探讨钠泵抑制剂哇巴因对细胞连接相关分子表达的影响。方法:以不同浓度哇巴因作用ECV304细胞,用倒置相差显微镜和透射电镜观察细胞形态变化;通过四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞生长抑制作用;用Hoechst33342/PI双荧光染色、荧光显微镜分析细胞死亡特征;应用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞连接相关分子钠泵β1亚单位、内皮钙黏蛋白、P120连环蛋白1A和P120连环蛋白3AmRNA的表达。结果:哇巴因以浓度和作用时间依赖的方式抑制ECV304细胞生长;10μmol/L哇巴因作用24h,引起细胞坏死;0.1μmol/L哇巴因作用24~48h,细胞明显脱落,细胞间连接丧失,细胞出现染色质凝集、边移、凋亡小体形成等凋亡特征。RT-PCR结果显示钠泵β1亚单位、内皮钙黏蛋白和P120连环蛋白1A表达下降,P120连环蛋白3A表达上调。结论:哇巴因调节ECV304细胞连接相关分子表达从而影响其黏附和存活。 展开更多
关键词 哇巴因 ECV304细胞 钠泵β1亚单位 内皮钙黏蛋白 P120连环蛋白
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PB231诱导K562细胞凋亡的初步研究 被引量:1
9
作者 买霞 张敏 +4 位作者 陈小义 陈莉 苏莉 陈红 李灵芝 《武警医学》 CAS 2001年第1期12-15,共4页
目的 研究PB2 3 1诱导K 562细胞凋亡作用 ,探讨PB2 3 1的抗肿瘤机制。方法 采用荧光显微镜观察细胞形态学变化 ,MTT法测定PB2 3 1对K 562细胞生长抑制作用 ,琼脂糖凝胶电泳检测细胞DNA裂解。结果 K562细胞经PB2 3 1处理后 ,在倒置光... 目的 研究PB2 3 1诱导K 562细胞凋亡作用 ,探讨PB2 3 1的抗肿瘤机制。方法 采用荧光显微镜观察细胞形态学变化 ,MTT法测定PB2 3 1对K 562细胞生长抑制作用 ,琼脂糖凝胶电泳检测细胞DNA裂解。结果 K562细胞经PB2 3 1处理后 ,在倒置光显微镜下可见细胞变形和凋亡小体形成 ;荧光显微镜下可见染色质凝集。MTT法检测其IC50 值为 5× 1 0 -5M。琼脂糖凝胶电泳呈典型的“DNALadder”。结论 PB2 3 1可诱导K562细胞发生凋亡。这可能是其抑制K562细胞生长的作用机理之一。 展开更多
关键词 PB231 人红白细胞K562细胞 细胞凋亡
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哇巴因诱导ECV304细胞凋亡与p120ctn mRNA的表达 被引量:1
10
作者 买霞 徐瑞成 +2 位作者 陈莉 陈小义 战丽艳 《解剖科学进展》 CAS 2008年第4期384-387,共4页
目的研究哇巴因对ECV304细胞的作用及相关机制。方法应用MTT法检测哇巴因对细胞生长抑制作用,Hoechst33342/PI双荧光染色分析细胞死亡特征,透射电镜和光镜观察细胞形态结构变化,半定量RT-PCR法检测P120ctn 1A和P120ctn 3A mRNA的表达。... 目的研究哇巴因对ECV304细胞的作用及相关机制。方法应用MTT法检测哇巴因对细胞生长抑制作用,Hoechst33342/PI双荧光染色分析细胞死亡特征,透射电镜和光镜观察细胞形态结构变化,半定量RT-PCR法检测P120ctn 1A和P120ctn 3A mRNA的表达。结果哇巴因以浓度和作用时间依赖的方式抑制ECV304细胞生长;荧光显微镜下可见30%以上细胞为凋亡细胞,20%细胞为晚期凋亡细胞的形态学改变;透射电镜下可见核染色质凝集、边移、凋亡小体形成等细胞形态学变化;RT-PCR结果显示P120ctn 1A mRNA表达较对照组明显降低,P120ctn 3A mRNA表达较对照组明显增强。结论哇巴因能抑制ECV304细胞增殖和诱导其凋亡,并下调P120ctn 1A和上调P120ctn3A mRNA表达。 展开更多
关键词 哇巴因 ECV304细胞 细胞凋亡 P120CTN RT—PCR
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乙醇诱导人体外培养K562细胞系凋亡的研究 被引量:2
11
作者 买霞 张敏 +1 位作者 陈小义 陈莉 《武警医学院学报》 CAS 2001年第4期278-279,F003,共3页
目的 :探讨乙醇对人K5 62细胞的细胞毒作用机制。方法 :采用不同浓度乙醇加入体外培养的K5 62细胞中 ,用荧光显微镜和倒置光显微镜观察细胞形态学变化 ,用琼脂糖凝胶电泳的方法检测细胞DNA裂解。结果 :1%乙醇能有效诱导K5 62细胞凋亡 ,... 目的 :探讨乙醇对人K5 62细胞的细胞毒作用机制。方法 :采用不同浓度乙醇加入体外培养的K5 62细胞中 ,用荧光显微镜和倒置光显微镜观察细胞形态学变化 ,用琼脂糖凝胶电泳的方法检测细胞DNA裂解。结果 :1%乙醇能有效诱导K5 62细胞凋亡 ,且随剂量增大凋亡时间缩短。 5 %乙醇作用 3 0h则可引起细胞坏死。结论 :长期饮酒者血液中有核细胞数量减少 。 展开更多
关键词 K562细胞系 乙醇 细胞凋亡 酗酒
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两种方法处理支原体污染的疗效观察 被引量:1
12
作者 买霞 陈莉 +1 位作者 张敏 叶路 《中国卫生检验杂志》 CAS 2002年第1期110-110,共1页
支原体是细菌培养中最常见、不易被察觉又很能干扰实验结果的一种污染.从1952~1972年间,有人检查了54个实验室的9700个各类培养细菌从中发现有11%的细胞受到支原体污染[1].目前发现支原体已有数十种之多.抗生素对支原体污染不能奏效,... 支原体是细菌培养中最常见、不易被察觉又很能干扰实验结果的一种污染.从1952~1972年间,有人检查了54个实验室的9700个各类培养细菌从中发现有11%的细胞受到支原体污染[1].目前发现支原体已有数十种之多.抗生素对支原体污染不能奏效,根据支原体对热耐受性差的特点,本实验拟用加温和药物处理体外培养被污染的细胞,以杀灭支原体. 展开更多
关键词 支原体 细菌培养 加温 药物处理
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土槿甲酸对人红白血病细胞增殖抑制作用的体外研究 被引量:1
13
作者 买霞 陈莉 +2 位作者 张敏 李灵芝 陈虹 《天津药学》 2001年第6期45-47,共3页
目的 :研究土槿甲酸 (PAA)对人红白血病 (K5 6 2 )细胞生长的抑制效应 ,探讨其抗癌作用机制。方法 :用不同浓度的 PAA加入体外培养的 K5 6 2细胞中 ,观察加药后细胞生长和有丝分裂指数 (MI)的变化 ;用 MTT法检测其细胞毒作用 ;Hoechst33... 目的 :研究土槿甲酸 (PAA)对人红白血病 (K5 6 2 )细胞生长的抑制效应 ,探讨其抗癌作用机制。方法 :用不同浓度的 PAA加入体外培养的 K5 6 2细胞中 ,观察加药后细胞生长和有丝分裂指数 (MI)的变化 ;用 MTT法检测其细胞毒作用 ;Hoechst33342 /PI荧光双染色方法检测细胞凋亡。结果 :PAA明显抑制 K5 6 2细胞生长 ;IC50 值为5 0μmol/L ;MI于加药后 2 4小时较对照组明显降低 ;凋亡细胞比例在用药后 2 4小时达 80 %。结论 展开更多
关键词 人红白血病细胞系 土槿甲酸 细胞增殖
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土槿甲酸对3种细胞系增殖抑制作用的比较
14
作者 买霞 陈莉 +3 位作者 徐瑞成 张敏 陈虹 李灵芝 《中国药学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第7期505-507,共3页
目的比较土槿甲酸(PAA)对人胃癌细胞(MGC80-3),人肝癌细胞(SMMC-7721)和人红白血病细胞(K562)的增殖抑制作用,探讨其抗癌作用机制。方法采用MTT法检测不同浓度PAA对体外培养的MGC80-3细胞,SMMC-7721细胞和K562细胞的细胞毒作用。Hoechst... 目的比较土槿甲酸(PAA)对人胃癌细胞(MGC80-3),人肝癌细胞(SMMC-7721)和人红白血病细胞(K562)的增殖抑制作用,探讨其抗癌作用机制。方法采用MTT法检测不同浓度PAA对体外培养的MGC80-3细胞,SMMC-7721细胞和K562细胞的细胞毒作用。Hoechst33342/PI荧光双染色方法检测细胞凋亡。琼脂糖凝胶电泳检测K562细胞DNA裂解。结果PAA明显抑制MGC80-3,SMMC-7721和K562细胞系的增殖,其IC50值分别为12.500,3.125,12.500μmol·L-1。凋亡细胞比例在用药48h分别达83.50%,44.50%和63.20%。琼脂糖凝胶电泳呈典型的"DNALadder"。结论PAA能有效抑制MGC80-3,SMMC-7721和K562细胞增殖并诱导凋亡。 展开更多
关键词 土槿甲酸 人胃癌细胞系 人肝癌细胞系 人红白血病细胞系 细胞增殖
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纤维蛋白凝胶对大鼠胚胎间充质干细胞增殖与成骨分化的影响:不同质量浓度比较
15
作者 买霞 陈莉 +1 位作者 陈小义 扎拉嘎胡 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期2091-2094,共4页
背景:纤维蛋白是一种天然的可生物降解、组织相容性好的高分子材料,其中血纤维蛋白稳定因子ⅩⅢ已经证明有利于未分化间充质干细胞在高度交联的凝胶支架内迁移,并促进其增殖与分化。目的:探讨大鼠胚胎间充质干细胞在不同质量浓度纤维蛋... 背景:纤维蛋白是一种天然的可生物降解、组织相容性好的高分子材料,其中血纤维蛋白稳定因子ⅩⅢ已经证明有利于未分化间充质干细胞在高度交联的凝胶支架内迁移,并促进其增殖与分化。目的:探讨大鼠胚胎间充质干细胞在不同质量浓度纤维蛋白凝胶内的形态学变化,以及生长增殖和成骨分化情况。方法:无菌条件下取胎鼠四肢,组织块消化法体外分离培养胚胎间充质干细胞。取传至第3代细胞,分别接种于20,10,5g/L纤维蛋白凝胶内,并设立对照组,接种于无凝胶的正常培养基中。用激光扫描共聚焦显微镜观察细胞在凝胶内的形态学变化,荧光分光光度计测定细胞增殖状态,酶标仪和Von Kossa染色分析细胞碱性磷酸酶活性和钙盐沉积情况。结果与结论:培养7d,在纤维蛋白凝胶内的大鼠胚胎间充质干细胞具有较长突起,且连接成网,而对照组细胞呈纺锤形或立方形。与对照组比较,凝胶组细胞增殖活跃,至培养第14天达峰值,以5g/L凝胶细胞组荧光最强;凝胶组细胞碱性磷酸酶活性从14d开始增强,21d达峰值。培养14d后20g/L凝胶组在凝胶区出现小矿化结节,随后逐渐融合,而对照组无矿化结节出现。证实纤维蛋白凝胶支架能够支持大鼠胚胎间充质干细胞的存活与生长,且可以促进细胞的增殖和分化。5g/L低浓度凝胶有利于细胞形态的发生,20g/L高浓度凝胶有利于细胞的成骨分化。 展开更多
关键词 纤维蛋白凝胶 细胞增殖 细胞分化 碱性磷酸酶 细胞培养 胚胎 间充质干细胞
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土槿甲酸诱导人红白血病细胞凋亡的研究
16
作者 买霞 张敏 +2 位作者 陈莉 陈虹 李灵芝 《中医药学报》 CAS 2002年第1期48-49,共2页
目的 :探讨土槿甲酸的抗肿瘤作用机制。方法 :应用MTT法测定土槿甲酸对K5 62细胞生长抑制作用 ;荧光染色法观察细胞形态学变化 ;琼脂糖凝胶电泳检测细胞DNA裂解。结果 :K5 62细胞经土槿甲酸处理后MTT法检测其IC50 值为 5× 1 0 - 5... 目的 :探讨土槿甲酸的抗肿瘤作用机制。方法 :应用MTT法测定土槿甲酸对K5 62细胞生长抑制作用 ;荧光染色法观察细胞形态学变化 ;琼脂糖凝胶电泳检测细胞DNA裂解。结果 :K5 62细胞经土槿甲酸处理后MTT法检测其IC50 值为 5× 1 0 - 5M ;荧光显微镜下可见染色质凝集、碎裂、凋亡小体形成。琼脂糖凝胶电泳呈典型的“DNALadder”。结论 :土槿甲酸可诱导K5 展开更多
关键词 土槿甲酸 人红白血病K562细胞 细胞凋亡 红白血病
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酒精对体外培养人红白血病细胞活性影响的研究
17
作者 买霞 陈莉 +1 位作者 叶路 陈小义 《职业与健康》 CAS 2002年第4期36-38,共3页
目的 了解长期饮酒对人体组织细胞损伤的可能原因。方法 采用不同浓度酒精加入体外培养的人红白血病(K562)细胞中,用荧光显微镜和倒置光显微镜观察细胞形态学变化,用琼脂糖凝胶电泳的方法检测细胞DNA裂解。结果 1%酒精能有效诱导K562... 目的 了解长期饮酒对人体组织细胞损伤的可能原因。方法 采用不同浓度酒精加入体外培养的人红白血病(K562)细胞中,用荧光显微镜和倒置光显微镜观察细胞形态学变化,用琼脂糖凝胶电泳的方法检测细胞DNA裂解。结果 1%酒精能有效诱导K562细胞凋亡,且随剂量增大凋亡时间缩短。5%酒精作用30h则可引起细胞坏死。结论 长期饮酒者血液中有核细胞数量减少,可能与其促凋亡作用有关。 展开更多
关键词 K562细胞系 酒精 死亡 人红白血病
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大鼠胚胎脑膜组织细胞分离培养及其生物学特性观察
18
作者 买霞 陈莉 +1 位作者 徐瑞成 扎拉嘎胡 《武警医学院学报》 CAS 2007年第4期344-347,F0002,共5页
【目的】分离和培养大鼠胚胎脑膜组织细胞,并观察其生物学特性。【方法】在无菌条件下取妊娠14.5~16.5 d大鼠的胚胎脑膜组织,培养传代,在倒置光显微镜和电镜下对细胞形态变化进行动态观察;流式细胞仪检测细胞周期变化;用四唑盐(MTT)... 【目的】分离和培养大鼠胚胎脑膜组织细胞,并观察其生物学特性。【方法】在无菌条件下取妊娠14.5~16.5 d大鼠的胚胎脑膜组织,培养传代,在倒置光显微镜和电镜下对细胞形态变化进行动态观察;流式细胞仪检测细胞周期变化;用四唑盐(MTT)法测定细胞生长活力。在细胞传至第4代时加入10μmol/L 5-aza,并观察其对细胞增殖和行为的影响;免疫细胞化学方法检测Desmin、GFAP的表达。【结果】在透射电镜下观察对照组多数细胞为未分化细胞,而实验组可见有成纤维样细胞和胶质样细胞的形态变化;流式细胞仪分析经5-aza诱导3 d后,处于增殖状态的S期细胞比率为8.1%,较对照组9.7%为低;经MTT法检测表明5-aza明显抑制胚胎脑膜组织细胞的增殖。免疫细胞化学检测结果表明,胚胎脑膜组织细胞经5-aza诱导8 d Desmin和GFAP的表达均较对照组显著增高,阳性率分别达51.2%和52.3%。【结论】5-aza对胚胎脑膜组织细胞生长有明显抑制作用,并诱导其分化成纤维样细胞和胶质样细胞。 展开更多
关键词 胚胎脑膜组织细胞 细胞培养 5-氮杂胞苷 大鼠
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5-氮杂胞苷对大鼠骨髓间充质干细胞增殖与分化的影响
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作者 买霞 王成艳 +1 位作者 战丽艳 周矛欣 《微量元素与健康研究》 CAS 2014年第3期1-3,共3页
目的:探讨5-氮杂胞苷(5-azacytidine,5-aza)对体外骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)细胞增殖与分化潜能的影响。方法:从Wistar大鼠骨髓中获得MSCs,培养传代,透射电镜下观察诱导前后细胞形态变化;MTT法检测5-aza对MSCs生... 目的:探讨5-氮杂胞苷(5-azacytidine,5-aza)对体外骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)细胞增殖与分化潜能的影响。方法:从Wistar大鼠骨髓中获得MSCs,培养传代,透射电镜下观察诱导前后细胞形态变化;MTT法检测5-aza对MSCs生长的影响;免疫细胞化学方法检测Actin(α-Sarcomeric)、Desmin、Myoglobin、NSE、GFAP的表达。结果:5-aza对MSCs有抑制作用,在透射电镜下观察可见有心肌样细胞和神经元样细胞的形态变化。免疫细胞化学检测结果表明,MSCs经5-aza诱导14dactin、desmin、myoglobin、NSE和GFAP的表达均较对照组显著增高,P<0.01。结论:5-aza对MSCs细胞生长有抑制作用,MSCs被5-aza诱导分化成心肌样细胞和神经元样细胞。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 心肌样细胞 神经样细胞 5-氮杂胞苷
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微丝在体外培养四种不同细胞表达的形态观察
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作者 买霞 陈莉 徐瑞成 《武警医学院学报》 CAS 2005年第2期93-95,F002,共4页
【目的】探讨微丝在4种不同细胞内的形态分布。【方法】体外培养人胃低分化粘液腺癌(MGC80 3)细胞系、人肝癌(SMMC772 1)细胞系、原代培养人皮肤成纤维细胞(HSF)和大鼠骨髓间充质干细胞(MSC) ;用考马斯亮蓝显示四种细胞内的微丝,通过... 【目的】探讨微丝在4种不同细胞内的形态分布。【方法】体外培养人胃低分化粘液腺癌(MGC80 3)细胞系、人肝癌(SMMC772 1)细胞系、原代培养人皮肤成纤维细胞(HSF)和大鼠骨髓间充质干细胞(MSC) ;用考马斯亮蓝显示四种细胞内的微丝,通过光学显微镜观察微丝分布的状态。【结果】MGC80 3细胞系和人肝癌SMMC772 1细胞系内,微丝较细且均匀分布,原代培养的HSF和MSC细胞内微丝较为粗大,分布不均匀。【结论】微丝分布与细胞的粘附状态和细胞形态有密切关系。 展开更多
关键词 微丝 肌动蛋白 细胞骨架
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