摘要
目的通过基因表达综合(GEO)数据库生物信息学分析及实验验证,探讨微小RNA(miR)-451对宫颈鳞状细胞癌生物学功能的影响及潜在分子机制。方法分析GEO数据库中宫颈癌数据集,筛选宫颈癌组织与正常宫颈组织中差异表达的miRNA和mRNA,经数据分析确定miR-451为后续研究目标。采用实时萤光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测miR-451在宫颈鳞癌细胞系中的表达水平;过表达或沉默miR-451后,分别通过细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法、流式细胞术、伤口愈合实验及Transwell实验,检测其对宫颈鳞癌细胞增殖、凋亡、细胞周期、侵袭及迁移功能的调控作用。利用miRanda、miRMap、miRTarBase、miRDB、Targetscan五个数据库预测miR-451的下游靶基因,通过基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)数据库对靶基因进行功能富集分析;采用生物信息学分析及萤光素酶报告实验,验证miR-451与巨噬细胞移动抑制因子(MIF)的靶向关系;通过生物信息学软件预测miR-451作用的潜在下游通路,结合蛋白质印迹实验验证通路相关蛋白的表达。结果miR-451在宫颈鳞癌组织中低表达;过表达miR-451可抑制宫颈鳞癌细胞增殖、迁移及侵袭,促进细胞凋亡;MIF是miR-451的直接靶基因,miR-451可通过靶向MIF下调磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/AKT/mTOR)信号通路活性。结论细胞水平提示,miR-451可通过靶向MIF调控PI3K/AKT/mTOR信号通路,发挥对宫颈鳞癌的抑癌作用,为宫颈鳞癌的潜在治疗靶点提供实验依据。
出处
《大医生》
2025年第24期30-36,共7页
Doctor
基金
山西省科技厅基础研究计划项目(编号:20210302124593)
山西白求恩医院人才引进科研启动金项目(编号:2021RC013)。
