摘要
先前的研究提示，λ噬菌体DNA复制起始之所以依赖于转录激活，可能是因为处于DNA裸露部分的复制原点只有在被转录时才能形成复制起始所需的较高的负超螺旋状态。为了验证这一假设，我们设法获得了大肠杆菌的HU全蛋白及HU-α、HU-β单亚基突变体以及topA突变体，并进行了超感染和电泳试验。与野生型相比，在HU突变体和topA突变体的细胞中，DNA裸露部分的负超螺旋强度从理论上讲应当增强。采用具有不同免疫型的λ噬菌体对这些大肠杆菌突变体及其野生型亲本的λ溶源菌株进行超感染实验后，我们发现，在这些突变体内，λ噬菌体的复制仍然需要转录激活。我们又通过电泳实验测定了突变体细胞内DNA的超螺旋程度，发现在大肠杆菌体内，DNA裸露部分的负超螺旋强度可能始终维持在一个较低的水平，在上述突变大肠杆菌中，虽然某个基因的突变应当引起DNA裸露部分负超螺旋强度的增强，但DNA裸露部分负超螺旋的真实强度似乎仍被限制在需要转录激活的水平。此外，我们还发现，HU异源二聚体以及HU-α、HU-β同源二聚体吸收负超螺旋的多少，与它们对λDNA体外复制的转录激活的决定作用大小呈现正相关，因此，在体外进行λDNA复制时，HU异源二聚体以及HU-α、HU-β同源二聚体可能是通过改变DN负超螺旋强度间接使复制起始与转录相偶联。
出处
《中国科技教育》
2002年第6期23-25,共3页
China Science & Technology Education
