摘要
目的 获得具有多表位的丙型肝炎病毒 (HCV)嵌合抗原 ,以提高HCV酶联免疫吸附试验 (ELISA)诊断试剂的质量。方法 采用分子克隆将已获得的HCV各区段优势抗原表位基因 ,拼接为HCV嵌合抗原基因。将该基因克隆到 pQE 30载体表达。表达抗原经纯化后 ,包被酶联板 ,对16份HCV阴性和 16份阳性血清标本进行了检测。结果 pQE HCV在大肠杆菌中有效表达了相对分子质量为 5 30 0 0的HCV嵌合抗原。经Ni NTA金属螯合层析纯化后 ,获得了高纯度的目的蛋白。ELISA结果显示 ,HCV嵌合抗原能特异地与HCV感染血清反应 ,具有良好的抗原活性。结论 HCV多表位嵌合抗原包含了HCV具有代表性的主要表位 。
Objective ToexpresschimericantigenofHCVwithmultipleimmunodominantepitopes inE .coliforimprovingthequalityofreagentsforHCVscreening .Methods Thegenefragmentencoding HCVchimericantigenwasobtainedbymolecularcloningmethodandclonedintopQE 30 plasmidforex pressioninE .coliM 15 .TheexpressedchimericantigenwaspurifiedbyNi NTAandcoatedonELISA platestoanalyzeitssensitivityandspecificity .Results Thechimericantigenof 5 30 0 0washighlyex pressed .ELISAassayofserumsamples (including 18HCVpositiveand 17negativesera)indicatedthatthe HCVchimericantigenhadhighsensitivityandspecificity .Conclusions ChimericantigenofHCVwith typicalimmunodominantepitopescanbeusedtodevelopgoodreagentsforHCVimmunoassay .
出处
《中华传染病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第5期297-299,T007,共4页
Chinese Journal of Infectious Diseases
基金
国家"九.五"攻关资助项目
S98 B0 3 0 6(85 92 5 2 5 0 4)
