摘要
描述了一种基于双倍PCR技术 ,用种特异性引物快速鉴定大豆胞囊线虫方法。应用两组引物扩增胞囊线虫的rDNA。第一组引物含有2个通用引物D3A和D3B ,用于扩增大亚基核糖体基因(28SrDNAgene)的D3扩展区 ;第二组引物包括大豆胞囊线虫种特异性引物GlyF1和一个通用引物rDNA2,用于扩增ITS2区的片断和部分28S基因。用此双倍PCR扩增技术检测了来自中国、俄罗斯、美国和巴西的53个大豆胞囊线虫群体 ,结果表明 ,用两组引物进行双倍PCR扩增 ,所有53个大豆胞囊线虫群体都产生两个明显的片断(181bpand345bp) ,其中181bp片断是SCN特异性引物GlyF1和rDNA2扩增出大豆胞囊线虫中特异性片断。在所测试的其它胞囊线虫群体 ,仅仅扩增出345bp的片断 ,而不能扩增出大豆胞囊线虫的特异性片断。用该项技术能从大豆胞囊线虫的单个胞囊或单头二龄幼虫的微量DNA中 ,扩增出大豆胞囊线虫的特异性片断 。
A rapid method for diagnosis of juveniles and cysts of soybean cyst nematode based on PCR with species specific primers was described. The PCR assay was tested on 53 populations originating from China, Russia, USA and Brazil and a single cyst or second stage of Heterodera glycines alone or the mixture with other soil inhabiting nematodes was detected.
出处
《沈阳农业大学学报》
CAS
CSCD
2001年第3期216-217,共2页
Journal of Shenyang Agricultural University
