摘要
穿孔素是机体免疫系统中具有免疫杀伤作用的一种重要效应物质。由于昆虫杆状病毒表达系统和原核表达系统相比能对表达产物进行翻译后加工 ,所以选择昆虫细胞真核表达人穿孔素。将人穿孔素基因插入杆状病毒转移载体pAcSecG2T中和野生昆虫杆状病毒共转染sf9细胞 ,筛选得重组病毒 ,在sf9细胞中分泌表达含凝血酶位点的GST -hp融合蛋白。产物呈现钙依赖的溶红细胞活性 ,并且经Dot -Blot检测表明具有免疫活性。
Human perforin gene was transferred into the genome of Autographa californica nuclear polyhedrosis virus(AcNPV) by transfer vector pAcSecG2T which contain gp67 leader sequence and glutathione S-transferase gene. The recombinant Baculovirus expressed fusion protein GST-hp in sf9 cell. There is a thrombin cleavage site in this fusion protein. The activity of GST-hp was measured by hemolysis and immunological assay.
出处
《药物生物技术》
CAS
CSCD
2001年第2期75-77,共3页
Pharmaceutical Biotechnology
基金
南京大学医药生物技术国家重点实验室开放基金部分资助
