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中国对虾卵子活化及卵裂的激光扫描共聚焦显微镜研究

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摘要 有报导,与其它动物不同,对虾的卵子一接触海水、不经过受精,就可以被活化。但是,只有受精卵才能卵裂发育。而且,各种对虾卵子内皮质棒及皮层颗粒的形态结构、活化过程各有不同。本文就中国对虾卵子的活化及卵裂过程进行了激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)研究。该技术可以清晰地显示细胞的立体图像。采集中国对虾,人工诱导产卵,未受精卵取自产卵虾体内,受精卵分期分批取样,固定。供试样品经PBS漂洗,AO、FITC和PI染色,LSCM观察、图像处理。刚产出的、未活化卵子形态不规则,皮层内富含皮质棒和皮层颗粒(Fig.1)。不论受清与否,产入海水的卵子释放都能被激洚并恢复减娄和分裂。活化后的卵子释放出皮层囊泡内的皮质棒(Figs,2&3)。释放出的皮质棒转变为均质的胶质层9Figs.4&5)。随后,皮层颗粒释放并在卵子表面转化为均质化的孵化膜。卵子开始举起,与孵化膜之间形成卵周隙。卵周隙内具有絮状物质(Figs,6,7&8)。卵子产出后第8-10min,经过减分裂,第一极体排放,并随着孵化的举起而被推向卵外(Fig.5)。第20min,第二极体排放,并由卵子表面到达孵化膜的内缘(Fig.6)。在20℃水温条件下,受精卵产入海水中60min开始第一次卵裂,分裂成2个相似的子细胞(Figs.9&10),其后30min左右分裂一次。第二次卵裂后期,四个子细胞发生扭转,表现出原始的螺旋卵裂的特征(Fig.11),在第三次卵裂中,八个子细胞已具有明显的螺旋卵裂特征(Fig.12)。第四次卵裂(16细胞期)以后则表现出左右的特性,螺旋卵裂特征不明显(Fig.13)。到原肠期可明显观察到近半圆型的胚孔及排列规则的卵裂球(Fig.14)。胶质层和孵化膜的形成在卵子的外面构成一个复合的膜结构,具有阻止多精受精和保护作用。亦有报导:这个时期卵子的提取物能够诱导精子发生顸体反应。
出处 《Developmental and Reproductive Biology》 1998年第2期1-8,共8页 发育与生殖生物学报(英文版)
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