摘要
利用基因工程,可将外源基因导入大肠杆菌或其它工程细胞,使其作为生物工厂生产人类需要的蛋白质。在利用大肠杆菌表达外源基因时,必须考虑表达的基因载体、外源基因的性质、原核细胞启动子、读码框架及宿主菌调控系统这5个基本条件。本文结合笔者工作,介绍提高外源基因在大肠杆菌表达效率的一些技术进展。为提高外源基因转录水平,可选择合适的启动子、改进宿主菌调控系统和引入转录终止区。在提高外源基因转译水平方面,需改善核糖体结合点结构,考虑密码子使用的问题和增加mRNA稳定性。为提高外源蛋白的稳定性,可选择蛋白酶缺陷的宿主菌、注意蛋白质N端规律,或利用外泌型表达基因载体。
