摘要
按照交替氧化酶(alternative oxidase, AOX)位于线粒体内膜外侧亲水区S螺旋的氨基酸序列, 用固相法合成由12个氨基酸残基组成的多肽, 将此多肽与?-牛胰凝乳蛋白酶原A相连, 用作半抗原, 免疫家兔制备人工合成12肽的抗体. 将此抗体与来自绿豆幼苗不同器官线粒体的总蛋白分别进行Western杂交, 可观察到绿豆幼苗线粒体中具有两条清晰的AOX杂交带, 它们的分子量分别为35和38 ku. 同时, 取绿豆幼苗的子叶、真叶和下胚轴, 分别测定和计算它们的呼吸参数, 可以得知真叶器官组织具有最大的总呼吸(Vt)、 交替途径容量(Valt)及交替途径实际运行量(?Valt); 其次是子叶的Vt和ρValt; 下胚轴的Vt和?Valt最低, 但是Valt却高于子叶. 绿豆幼苗不同器官的有关呼吸参数测定结果与AOX表达的Western分析基本一致: 真叶的Vt特别是?Valt最高, 也具有35和38 ku的AOX的杂交多肽; 其次是子叶的Vt和ρValt, 且在子叶中, 只见一条分子量为38 ku的AOX多肽; 下胚轴的Vt和?Valt都最低, Western杂交显示只有一条分子量为38 ku的多肽, 而且表达量较少. 35 ku的AOX可能对真叶的?Valt作出了主要贡献.
出处
《中国科学(C辑)》
CSCD
北大核心
2001年第1期66-70,共5页
Science in China(Series C)
基金
国家自然科学基金资助项目!(批准号: 39670070)