摘要
目的观察三氧化二砷（ATO）与维生素K2（VK2）联合应用对HL-60细胞增殖的影响，并探讨其可能的作用机制。方法①用不同剂量ATO（0．0、0．5、1．0、2．0、4．0μmol／L）、VK2（0．0、2．5、5．0、10．0、20．0μmol／L）或联合用药（O．5μmol／LATO＋2．5I,Lmol／LVK2、1．0μmol／LATO＋5．0μmol／LVK2、2．0μmol／LATO＋10．0μmol／LVK2、4．0μmol／LATO＋20．0μmol／LVK2）作用HL-60细胞24、48、72h，通过CCK-8方法检测细胞的增殖活性，并计算ATO、VK：对HL-60细胞的半数抑制浓度（IC50）。②根据Ic。，选择联合用药浓度，分别计算联合用药在不同抑制率（fa）时的联合指数（CI）。根据：CI〉1表示两药拮抗作用，CI：1表示两药相加作用，CI〈1表示两药协同作用，判断联合用药对HL一60细胞增殖作用的影响。③将HL-60细胞分为对照组（未加药）、1．0μmol／LATO组、5．0μmol／LVK2组、联合用药组（1．0μmol／LATO＋5．0μmol／LVK2），培养48h后，应用AnnexinV／PI法检测细胞凋亡水平。结果@ATO、VK：单独用药可抑制HL-60细胞的生长，并呈时间和剂量依赖性，24、48、72h的IC50分别为（22．86±2．44）、（6．66±0．34）、（4．14±0．41）和（18．40±1．12）、（13．48±0．73）、（8．95±0．40）μmol／L；②ATO、VK2联合用药时、CI〈1，二者呈协同抑制效应；③与对照组[（4．38±0．56）％]比较，1．0μmol／LATO组[（5．76±1．63）％]和5．0μmol／LVK2组[（6．38±1．42）％]HL一60细胞凋亡率未见明显改变（P均〉0．05），而联合用药组[（44．18±8．42）％]HL一60细胞的凋亡率明显增高（P〈0．01），且联合用药组明显高于两个单独用药组（P均〈0．01）。结论ATO、VK2联合应用可增加对HL-60细胞的增殖抑制作用，二者联用表现为协同效应，诱导凋亡可能参与了这种协同作用。
Objective To investigate the therapeutic effects of arsenic trioxide（ATO） plus vitamin K2（VK2） on proliferation of HL-60 Cells from acute promyelocytic leukemia cell line and explore the possible mechanism. Methods ①HL-60 cells were exposed to ATO（O.0, 0.5, 1.0, 2.0, 4.0 μmol/L）, VK2（0.0, 2.5, 5.0, 10.0, 20.0 μmol/L）, or both of different concentrations （0.5 μmol/L ATO ± 2.5 μmol/L VK2, 1.0 μmol/L ATO ± 5.0 Ixmol/L VK2, 2.0 μmol/L ATO ± 10.0 μmol/E VK2, 4.0 μmol/L ATO ± 20.0 μmol/L VK2） for 24, 48 or 72 h, respectively. The method of CCK-8 was used to assess the proliferation of HL-60 cells and the half inhibitory concentration（ICs0） of ATO or VK2 was calculated, respectively. ②Combination index （CI） was used to evaluate the combinative effect of the two treatments ： CI 〈 1, = 1 or 〉 1 indicated synergistic, additive, or antagonistic effect, respectively. ③After HL-60 cells were treated with 1.0 μmol/L ATO or 5.0 μmol/L VK2 individually or simultaneously for 48 h, Annnexin V/PI staining was performed to identify the apoptosis rate of each group. Untreated cells were used as control group. Results ①ATO or VK2 alone inhibited the proliferation of HL-60 cells in a concentrationand time dependent manner. The IC5o of ATO or VK2 at time Of 24, 48, 72 h were （22.86 ± 2.44）, （6.66 ± 0.34）, （4.14 ± 0.41） and （18.40 ± 1.12）, （13.48 ± 0.73）, （8.95 ± 0.40） μmol/L, respectively;②The combination of ATO and VK2 illustrated a synergistic effect with CI 〈 1. ③No statistical difference was found among control group [ （4.38 ± 0.56）%], 1.0 μmolfL ATO group [（5.76 ± 1.63）%] and 5.0 IxmolfL VK2 group [（6.38 ± 1.42）%] in the apoptosis rate （all P 〉 0.05 ）. However, the apoptosis rate of combined group did rise to （44.18 ± 8.42）%, with a significant improvement to that of VK2 or ATO group alone （all P 〈 0.01 ）. Conclusions The combination of VK2 and ATO exhibits an enhanced synergistieal inhibitive effect on proliferation of HL-60 cells, and apoptosis may be involved in this synergy in part.
出处
《中华地方病学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第3期258-262,共5页
Chinese Journal of Endemiology
基金
黑龙江省青年基金（QC2012C030）
黑龙江省卫生厅课题（2012-607）
