摘要
先挑取纯培养的粉尘螨,提取总的RNA,后采用RT-PCR方法进行反转录出cDNA.由cDNA提取出目的基因进行片段扩增,产物连接入T载体(pMD18-T).经扩增后,用EcoR I和Xho I双酶切,将目的基因分别连接到pET28和pET32的表达载体上,得到重组质粒pET28和pET32,即粉尘螨的基因克隆与表达载体构建成功.
The living mites of south China area which had been identified and cultured were picked, from which extractedthe total RNA. RT-PCR technology were used to clone the gene and then connected it to the T vector （pMD18-T）. After that,the expression vector （pET28 and pET32） was constructed for the new gene segment and were connect ed together.
出处
《江西师范大学学报（自然科学版）》
CAS
北大核心
2013年第2期159-161,共3页
Journal of Jiangxi Normal University(Natural Science Edition)
基金
国家"863"计划(2006AA02A231)
国家自然科学基金(81071388)
广东省自然科学基金(04554)
广东省高等学校国际暨港澳台科技合作创新平台项目(2012gjhz0009)
深圳市重点实验室组建项目(SW201110010)
深圳市科技计划基础研究重点项目(JCYJ20120613100657482)
深圳市南山区一般研发课题(KC2012JSYB0003A)资助项目
关键词
粉尘螨
Der
f15
克隆
载体构建
dermatophagoides farina
Der f15
cloning
vectorconstruction
