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新型鸭病毒性肝炎病毒巢式RT-PCR检测方法的建立及应用 被引量:5

Establishment and application of a nest RT-PCR method for detection of duck hepatitis virus new type
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摘要 根据GenBank上登录的新型鸭病毒性肝炎病毒(N-DHV)基因组序列,设计合成内外2对引物,优化PCR反应条件,建立了检测新型鸭肝炎病毒的巢式RT-PCR方法。结果显示,该方法对Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒(DHV-Ⅰ)、新城疫病毒(ND)、传染性法氏囊病毒(IBDV)、鸭病毒性肠炎病毒(DEV)、鸭细小病毒(DPV)的扩增结果均为阴性;该方法第1次扩增的敏感性是10pg,第2次扩增的敏感性是0.1pg,第2次比第1次扩增的敏感性高100倍。结果表明,建立的巢式RT-PCR方法具有特异性强、敏感性高、重复性好等优点,可以准确快速检测出极低含量的N-DHV,解决了新型鸭肝炎病毒不易在组织病料中检出困难的难题,为新型鸭病毒性肝炎的快速诊断、净化及深入研究奠定了基础。 Based on N-DHV gene sequence in primers,established a nested PCR for N-DH duck hepatitis virus type I (DHV- I ),New GenBank, synthesized outer V detection. The method wa castle disease virus (IBDV) ,duck enteritis virus (DEV), duck parvoviru neg 0.1 and and inner s used for infection b the PCR ative;the method sensitivity first amplification is 10 pg,the second amp pg,100 times higher than the first amplification. This method had good reproducibility,could be used for rapid diagnosis of N-DHV disease. lification two pairs of detection of ursal disease results were sensitivity is specificity, sensitivity
出处 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期341-344,351,共5页 Chinese Journal of Veterinary Science
基金 山东省优秀中青年科学家科研奖励基金资助项目(BS2011SW026)
关键词 新型鸭病毒性肝炎病毒 巢式RT-PCR 检测 duck hepatitis virus new type nest RT-PCR detection
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