摘要
蛋白质研讨班学员问：姜老师，您好!我是“第13期蛋白质分离纯化技术专题研讨班”的学员。我通过亲和纯化制备大量目的蛋白作为抗原用于免疫时，在蛋白质保存方面遇到了一些问题，想向您请教。开始制备量较少时，我通过冷冻干燥将蛋白制成冻干粉4℃保存，一周后进行免疫，发现蛋白复溶时出现了沉淀，将其作为疫苗用于免疫（免疫剂量1．5mg／m1），并且ELISA检测发现免疫效价很好。其后，我开始大量纯化抗原。并将纯化后的蛋白经过透析和浓缩后（储存前测的浓度约3mg／L）全部保存在-80℃冰箱里，使用的蛋白保护剂成分为：0．4％的甘油；0．5％的甘露醇；0．25％的甘氨酸；2．5％的海藻糖。经过一段时间将这些蛋白抽样去免疫发现免疫效价很差：超滤浓缩后-80℃冰箱储存三周，蛋白免疫效价远小于阳性对照；蔗糖浓缩后-80℃冰箱储存三个月，蛋白免疫效价远小于阳性对照。除此之外我还将冷冻干燥4℃保存的蛋白样品用于免疫，这批样品一年前免疫效价很好，但是现在效价也很低。对于以上结果，我认为是由于蛋白储存不当造成的。无法解决长期有效的保存蛋白这个问题，让我非常困扰。恳请您能在百忙之中给我指点迷津，非常感谢!
出处
《中国生物工程杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第12期46-46,共1页
China Biotechnology
