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丙型肝炎病毒Core蛋白类病毒颗粒的表达及纯化

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摘要 目的通过PCR将丙肝病毒(HCV)Core与蜂毒素信号肽(Mel)进行融合,构建到pIZ/V5载体上获得pIZ/V5-Core-Mel表达载体。方法将pIZ/V5-Mel-core稳定转染Sf9细胞,经Zeocin抗性筛选,获得单克隆抗性细胞株。RT-PCR检测结果表明获得稳定表达Mel-core的细胞系Sf9-Core。对稳定细胞系Sf9-Core的上清进行离心纯化并Western印迹检测。结果在上清离心纯化的样品中有HCV Core形成的类病毒颗粒(VLPs)。透射电镜显示Core蛋白能自组装成直径约30 nm的球形颗粒。结论该研究成功构建了HCV Core与蜂毒素信号肽的融合蛋白并在Sf9细胞稳定表达,在细胞培养的上清中获得了VLPs。
作者 李祥 邹立林 吕建新 高基民
机构地区 温州医学院浙江省医学遗传学重点实验室浙江省模式生物技术与应用重点实验室
出处 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第21期4700-4703,共4页 Chinese Journal of Gerontology
基金 浙江省自然科学基金(No.Y208676)
关键词 丙型肝炎病毒 Core蛋白 类病毒颗粒
分类号 Q7 [生物学—分子生物学]
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参考文献16

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中国老年学杂志
2012年 第21期

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