摘要
通过对pBC1中的乳腺特异表达启动子成分进行分析,鉴定了位于β酪蛋白启动子上游两个EcoRⅠ位点(-89^-94和-120^-125)之间的缺失片段,31bp的缺失使得该载体中的一个乳控盒元件(-112^-141)和一个乳腺因子识别序列(-92^-102)遭到破坏,并使得位于TATA框上游的所有启动子成分发生了位置改变。通过与山羊β酪蛋白启动子序列进行比较,设计并合成了缺失片段,经一系列的酶切和连接处理,使得该缺失得到了修复,修复后的载体具有所有乳蛋白表达需要的启动子调控原件。本试验结果为利用修复后的乳腺特异高效表达载体进行乳腺生物反应器的研究奠定了分子生物学基础。
An deletion fragment between two EcoR Ⅰ sites upstream of β-casein promoter in pBC1 mammary gland specific expression vector was identified by promoter elements analysis.The 31bp deletion destroyed a milk box element and a mammary gland factor recognition sequence,and changed position of all promoter elements upstream of TATA box.After alignment with goat β-casein gene promoter sequence,the deletion fragment was synthesized and repaired by a series of restriction enzyme digestion and ligation processes.The result of this experiment will make a good foundation for the study of mammary gland bioreactor with this repaired mammary gland specific expression vector.
出处
《青岛农业大学学报（自然科学版）》
2010年第3期228-231,共4页
Journal of Qingdao Agricultural University(Natural Science)
基金
国家转基因生物新品种培育重大专项(2008ZX08007-001和2009ZX08009-156B)资助
关键词
乳腺特异表达载体
β酪蛋白
启动子
修复
mammary gland specific expression vector
β-casein gene
promoter
repairment
