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大肠杆菌tRNA^(Leu)的基因克隆、高效表达和纯化 被引量:4

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摘要 用化学法合成的tRNALeu1 和tRNALeu2 的基因分别连接到 pTrc99B质粒载体上 ,转化到大肠杆菌MT10 2中 .DNA测序筛选得到与已知tRNALeu1 和tRNALeu2 的基因顺序完全相同的克隆 .对带有tRNALeu1 和tRNALeu2 基因的 2个转化子 (MT Leu1和MT Leu2 )表达条件进行了优化 ,MT Leu1和MT Leu2总tRNA中的亮氨酸接受活力分别达到 810 pmol/A2 6 0 和 5 60 pmol/A2 6 0 :tRNALeu1 占MT Leu1总tRNA的5 0 % ;tRNALeu2 占MT Leu2总tRNA的 3 0 % .经DEAE Sepharose、BD -纤维素层析柱 ,可分别将MT Leu1和MT Leu2的总tRNA纯化到 160 0pmol/A2 6 0 .首次准确地测得了 2种等受体tRNALeu的氨酰化反应动力学常数 .
出处 《中国科学(C辑)》 CSCD 1998年第3期193-198,共6页 Science in China(Series C)
基金 国家自然科学基金资助项目 !(批准号 :395 70 16 4)
  • 相关文献

参考文献2

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  • 2施建军,生物化学与生物物理学报,1988年,20卷,76页

同被引文献19

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引证文献4

二级引证文献3

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