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H5N1亚型禽流感病毒NS1基因的克隆与表达 被引量：1

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摘要 根据GenBank中收录的H5N1亚型禽流感病毒NS1基因序列设计合成了一对引物AI-N1/AI-N2,利用RT-PCR方法扩增AIVNS1基因并克隆到pMD18-T载体上,对所得到的重组质粒进行酶切分析及序列测定,与GenBank中收录的其他分离株NS1基因进行序列比较分析,同源性达96%~99%,含有NS1基因的1个开放性阅读框（ORF）。将该基因克隆到pET-28a中构建NS1基因原核表达质粒pET/NS1,转化E.coli BL21（DE3）感受态细胞,在IPTG诱导下获得了预期的蛋白表达,所表达的蛋白质分子质量约为30kD。Western-blotting结果表明表达的NS1蛋白有良好的生物学活性,与H5N1 AIV感染鸡血清发生特异性反应,而与H5N1 AIV灭活疫苗免疫鸡血清无反应,为建立区分野毒AIV感染家禽与AIV灭活疫苗免疫家禽ELISA方法的建立提供了生物学材料。
作者 李茜 刘新文 刘水清 高轩 李明义
机构地区 河北农业大学动物科技学院 青岛易邦生物工程有限公司 内蒙古农业大学
出处 《上海畜牧兽医通讯》 2007年第2期26-28,共3页 Shanghai Journal of Animal Husbandry and Veterinary Medicine
基金 国家十一五攻关项目
关键词 禽流感病毒 非结构蛋白 基因克隆与分析 基因表达
分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]
  • 相关文献

参考文献8

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二级参考文献59

共引文献127

同被引文献9

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引证文献1

二级引证文献5

上海畜牧兽医通讯
2007年 第2期

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