摘要
伊氏锥虫是动物伊氏锥虫病的病原体，属动基体目原虫。动基体ＤＮＡ（Ｋｉｎ－ｅｔｏｐｌａｓｔＤＮＡ，简称ｋＤＮＡ）是该目原虫所特有的一种非染色体ＤＮＡ。因此，对ｋＤＮＡ进行ＰＣＲ扩增（ＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ，即聚合酶链反应）可用于鉴定和检测伊氏锥虫。本文以５’－ＣＡＡＣＧＡＣＡＡＡＧＡＧＴＣＡＧＴ－３’，５’－ＡＣＧＴＧＴＴＴＴＧＴＧＴＡＴＧＧＴ－３’为引物，对从伊氏锥虫直接抽提的总ＤＮＡ，ｋＤＮＡ以及ｋＤＮＡ基因重组子，经ＰＣＲ扩增后，在含有０．５μｇ／ｍｌＥＢ的２％琼脂糖凝胶上电泳，紫外光检测，均显示有一条桔红色的荧光带，与ＤＮＡ分子量标准对照分析，扩增的ＤＮＡ片段分子量在６００ｂｐ以下，与实验设计的扩增片段长度相符，而总ＤＮＡ不加聚合酶反应体系和总ＤＮＡ对照均无此片段。表明实验所设计引物对伊氏锥虫微环ＤＮＡ具有特异性。本方法的建立为进一步研究我国伊氏锥虫ＤＮＡ工作打下了基础。
Abstract Trypanosoma evansi is a protozoa parasite causing widespread disease in lanimalsof different species in China.Kinetoplast DNA (kDNA)is a specific non-chromosome DNAof T. Evanst.So Amplification of kDNA by polymerase chain reaction (PCR)can beused in detection and characterization of T.Evansi.A polymerase chain reaction has been established to detect the whole DNA. kDNA and kDNA gene clone.The amplified fragment isbelow 600 bp.The result shows that the designed primer is specific to Trypanosoma evansi.
出处
《中国兽医寄生虫病》
CAS
1996年第1期9-11,共3页
Chinese Journal of Veterinary Parasitology
基金
国家青年科学基金
