摘要
目的 :分析抑癌候选基因NDRG2在人类乳腺肿瘤组织及乳腺癌细胞系中的表达情况 .方法 :收集 4种乳腺癌细胞系及 2 1例乳腺肿瘤组织及其癌旁组织 ,提取总RNA ,应用半定量RT PCR及RNA斑点杂交的方法检测NDRG2mRNA的表达水平 .为进一步分析Ndrg2蛋白质的表达水平 ,分别提取 2 1例组织及细胞系的总蛋白 ,应用蛋白印迹技术检测其Ndrg2的蛋白表达水平 ,同时运用免疫组化的方法检测 4种乳腺癌细胞系中Ndrg2的表达情况 .结果 :RT PCR结果显示 ,4种乳腺癌细胞系中 ,有 3种NDRG2mRNA水平明显降低 .2 1例乳腺肿瘤组织中 ,有 5例NDRG2的mRNA水平明显降低 .蛋白印迹结果显示 ,筛选出的 3种低表达NDRG2mRNA乳腺癌细胞系中 2种Ndrg2的蛋白表达明显降低 ,而有 1种Ndrg2的蛋白表达没有变化 .2 1例乳腺肿瘤组织中发现 5例Ndrg2的蛋白水平明显下降 ,与RT PCR检测结果一致 .免疫组化结果显示 ,4种乳腺癌细胞系中 ,2种细胞系Ndrg2的表达水平明显降低 ,1种细胞系Ndrg2表达水平没有明显变化 ,与蛋白印迹结果一致 .结论 :Ndrg2在某些乳腺肿瘤组织和乳腺癌细胞系中呈低表达 ,提示其可能对乳腺肿瘤的发生或发展有重要作用 ,这不仅为研究乳腺癌的发病机制进一步提供了线索 。
AIM: To analyze the expression level of candidate tumor suppressor gene NDRG2 in human breast cancer tissues and cell lines. METHODS: Four kinds of breast cancer cell lines and twenty one samples of breast cancer tissues with matched normal tissues were collected. The NDRG2 mRNA level was detected by semiquantitive RT PCR and RNA dot blot and the Ndrg2 protein level was analyzed by western blot and immunocytochemistry. RESULTS: The results of RT PCR and western blot detection indicated that five of the twenty one breast cancer tissues had low NDRG2 mRNA level and low protein level. Three of the four breast cancer cell lines had low NDRG2 mRNA level by RT PCR, and two of the four breast cancer cell lines had low Ndrg2 protein level by western blot and immunocytochemistry. CONCLUSION: NDRG2 has low expression in some breast cancer tissues and cell lines, which indicates that the low level NDRG2 may be engaged in the development of breast cancer tissues and cell lines.
出处
《第四军医大学学报》
北大核心
2004年第12期1065-1068,共4页
Journal of the Fourth Military Medical University
基金
国家自然科学基金资助项目 (30 0 70 773
30 1 71 0 4 4 )
全军科研基金面上项目 (0 1MA1 85)
陕西省自然科学基金资助项目 (2 0 0 1SM42 )
关键词
NDRG2
乳腺肿瘤
逆转录聚合酶链反应
印迹法
蛋白质
NDRG2
breast neoplasms
reverse transcriptase polymerase chain reaction
blotting, Western, protein