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蜡梅金属硫蛋白基因的克隆与原核表达 被引量：1

Cloning and prokaryotic expression of a metallothionein cDNA from Chimonanthus praecox (L.) Link
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摘要 金属硫蛋白(metallothionein,MT)是一类富含Cys,能够结合重金属的低分子量蛋白质,广泛分布于生物界。在构建好的蜡梅花cDNA文库并进行EST分析的基础上,通过随机克隆测序得到了1个蜡梅金属硫蛋白的cDNA,命名为CpMetallothionein(CpMT)。CpMTcDNA全长为1083bp,基因内部含有一长度为240bp的开放阅读框,可编码79个氨基酸残基。将CpMT插入原核表达载体pET-32a,并转化Origami2感受态细胞。诱导表达产物经SDS-PAGE结果显示,目的蛋白约为30kD。表达的融合蛋白以包涵体和可溶性蛋白2种形式存在,用His-Bind蛋白纯化回收试剂盒对其进行纯化回收,得到了高纯度蛋白,为今后研究奠定基础。 金属硫蛋白(metallothionein,MT)是一类富含Cys,能够结合重金属的低分子量蛋白质,广泛分布于生物界。在构建好的蜡梅花cDNA文库并进行EST分析的基础上,通过随机克隆测序得到了1个蜡梅金属硫蛋白的cDNA,命名为CpMetallothionein(CpMT)。CpMTcDNA全长为1083bp,基因内部含有一长度为240bp的开放阅读框,可编码79个氨基酸残基。将CpMT插入原核表达载体pET-32a,并转化Origami2感受态细胞。诱导表达产物经SDS-PAGE结果显示,目的蛋白约为30kD。表达的融合蛋白以包涵体和可溶性蛋白2种形式存在,用His-Bind蛋白纯化回收试剂盒对其进行纯化回收,得到了高纯度蛋白,为今后研究奠定基础。
作者 秦平伟 段明革 孙文婷 李名扬 徐晶
机构地区 西南大学园艺园林学院 重庆市花卉工程技术研究中心 重庆城市管理职业学院
出处 《北京林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第S2期177-181,共5页 Journal of Beijing Forestry University
基金 重庆市教委科技项目(KJ070215)
关键词 金属硫蛋白 克隆 序列分析 原核表达 metallothionein cloning sequence analysis prokaryotic expression
分类号 S [农业科学]
  • 相关文献

参考文献11

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二级参考文献86

共引文献51

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引证文献1

二级引证文献2

北京林业大学学报
2010年 第S2期

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