摘要
为了构建猪细胞色素P450 3A22 基因重组腺病毒载体,并检测其在CHO 细胞中的表达。扩增了CYP3A22 基因,并将其插入到腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV 中,构建pAdTrack-3A22 重组体,pAdTrack-3A22 与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1 在大肠杆菌BJ5183 中进行同源重组,生成重组腺病毒质粒pAdEasy-3A22。脂质体介导pAdEasy-3A22 转染HEK-293A 细胞,包装成完整的重组腺病毒rAD-3A22。用rAD-3A22 感染CHO 细胞,用Realtime PCR 和Western-blot 检测CYP3A22 基因和蛋白表达情况。成功构建了CYP3A22 重组腺病毒并证实其在CHO 细胞中表达,以期为后续实验研究提供参考。
