摘要
目的:探讨长链非编码RNA MEG3对帕金森病的影响及其分子机制。方法:P12细胞培养12 h后分别加入0.0、0.5、1.0、2.0、4.0 mmol·L^(-1)的1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)处理构建帕金森疾病模型,以不添加任何物质的细胞作为空白对照(NC)组。同时将P12细胞分为MPP^(+)+pcDNA组、MPP^(+)+pcDNAMEG3组、MPP^(+)+anti-miR-con组、MPP^(+)+anti-miR-488-3p组、MPP^(+)+pc DNA-MEG3+miR-con组、MPP^(+)+pcDNA-MEG3+miR-488-3p组。实时荧光定量聚合酶链反应(RT-q PCR)检测miR-488-3p和MEG3表达水平;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞存活率;双荧光素酶报告实验检测MEG3和miR-488-3p的靶向关系;乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测LDH活力;流式细胞仪检测活性氧簇(ROS)含量;酶联免疫吸附(ELISA)法检测白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;Hoechst 33342染色检测细胞凋亡。结果:MPP+处理的P12细胞中MEG3表达水平显著降低,miR-488-3p表达水平显著升高,细胞存活率显著降低,LDH活性和ROS含量显著升高,IL-1β、TNF-α含量显著升高,细胞凋亡率显著升高(P<0.05)。MEG3靶向调控miR-488-3p表达。过表达MEG3和干扰miR-488-3p表达,MPP+处理的P12细胞中,LDH活性和ROS含量显著降低,细胞存活率显著升高,IL-1β、TNF-α含量显著降低,细胞凋亡率显著降低(P<0.05)。过表达miR-488-3p部分逆转过表达MEG3对MPP+处理P12细胞存活的促进作用,以及对氧化应激、凋亡和炎症因子分泌的抑制作用。结论:MPP^(+)可抑制P12细胞增殖,促进氧化应激产生、炎症因子分泌和细胞凋亡;过表达MEG3可促进细胞增殖,抑制氧化应激产生、炎症因子分泌和细胞凋亡。其机制可能与miR-488-3p表达相关,将可为帕金森病的防治提供新思路和新靶点。
出处
《现代医学》
2021年第7期769-775,共7页
Modern Medical Journal
基金
苏州市高新区医疗卫生科技计划项目(2016F004)
