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《中国兽医学报》 CSCD 北大核心

作品数9595被引量37022H指数44
《中国兽医学报》是由中华人民共和国教育部主管、吉林大学主办的全国性专业性学术期刊,现任主编为我国著名的动物病毒学专家中国工程院院士金宁一研究员。《中国兽医学报》是我国畜牧兽医学领域的权威性核心期刊,在...查看详情>>
  • 曾用名 兽医大学学报
  • 主办单位吉林大学
  • 国际标准连续出版物号1005-4545
  • 国内统一连续出版物号22-1234/R
  • 出版周期月刊
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牛多杀性巴氏杆菌交叉免疫保护性抗原蛋白PmCQ2-5175的筛选及效果评价
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作者 熊盼 黄艳澜 +5 位作者 刘思渝 杨柳 赵光夫 李能章 何芳 彭远义 《中国兽医学报》 北大核心 2025年第5期963-970,共8页
A型多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)是引起牛肺炎等呼吸系统疾病的重要病原菌,严重制约我国养牛业的健康发展。目前,主要通过疫苗接种预防该病,但由于Pm血清型众多,导致疫苗交叉免疫保护作用较差。因此,研发具有交叉保护作用... A型多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)是引起牛肺炎等呼吸系统疾病的重要病原菌,严重制约我国养牛业的健康发展。目前,主要通过疫苗接种预防该病,但由于Pm血清型众多,导致疫苗交叉免疫保护作用较差。因此,研发具有交叉保护作用的疫苗对防控Pm感染具有重要意义。本课题组前期研究发现,PmCQ2Δcra对A、B、F等不同荚膜血清型菌株(PmA、PmB、PmF)均具有良好的免疫保护作用。转录组学测序分析结果提示,PmCQ2Δcra良好的交叉免疫保护作用可能与细菌表面保护性抗原的高表达有关。因此,本研究通过生物信息分析筛选并表达了4个假定免疫保护性抗原蛋白PmCQ2-5175、PmCQ2-6290、PmCQ2-0275和PmCQ2-2640,结果显示,这些假定抗原制备的亚单位疫苗对PmA感染小鼠的保护效力分别为62.5%、25%、12.5%和10%。其中,保护性最佳的单组分抗原疫苗PmCQ2-5175对PmB感染小鼠具有75%的交叉保护作用。此外,本研究筛选的PmCQ2-5175蛋白保护性优于已报道的Pm抗原蛋白plpE,且融合表达蛋白PmCQ2-5175-plpE对PmA的保护性优于单一蛋白。本研究为开发具有交叉免疫保护作用的Pm亚单位疫苗提供了重要的抗原靶标。 展开更多
关键词 多杀性巴氏杆菌 免疫保护 重组蛋白 小鼠
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柚皮素对镉致鸡内质网应激和自噬的影响及其肝脏保护作用
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作者 许冰 毛俊兵 +3 位作者 凌昊 石亚宁 汪纪仓 刘宗平 《中国兽医学报》 北大核心 2025年第8期1696-1704,1712,共10页
48只1日龄海兰褐蛋公鸡分为4组:对照组、镉(cadmium,Cd)组(150 mg/kg CdCl2)、柚皮素(naringenin,Nar)组(250 mg/kg Nar)、Cd+Nar组(150 mg/kg CdCl2+250 mg/kg Nar),饲养期为60d。第60天每组随机选取6只鸡,空腹24 h后,经静脉采血后脱... 48只1日龄海兰褐蛋公鸡分为4组:对照组、镉(cadmium,Cd)组(150 mg/kg CdCl2)、柚皮素(naringenin,Nar)组(250 mg/kg Nar)、Cd+Nar组(150 mg/kg CdCl2+250 mg/kg Nar),饲养期为60d。第60天每组随机选取6只鸡,空腹24 h后,经静脉采血后脱颈处死,收集肝脏并计算脏器系数,测定肝功能相关指标,制作病理切片并观察,荧光定量PCR和Western blot法检测相关基因mRNA和蛋白的表达量。结果显示,Cd处理导致鸡体质量极显著下降(P<0.01),肝脏系数极显著上升(P<0.01),血清中丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)以及乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)水平极显著增加(P<0.01),肝脏抗氧化能力极显著降低(P<0.01),内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)相关基因(GRP-78、PERK、eIF-2α、CHOP、ATF-4、ATF-6)和自噬相关基因(Atg-5、Beclin-1、LC3)mRNA的表达极显著上调(P<0.01),P62的mRNA的表达量极显著减少(P<0.01)。添加Nar后,Cd诱导的肝脏损伤明显缓解,肝功能指标改善,肝脏抗氧化能力极显著升高(P<0.01),ERS相关基因(GRP-78、PERK、eIF-2α、CHOP、ATF-4、ATF-6)和自噬相关基因(Atg-5、Beclin-1、LC3)mRNA的表达极显著下降(P<0.01),P62的mRNA的表达量极显著增高(P<0.01)。结果表明,Nar具有通过调控ERS和自噬机制缓解Cd致鸡肝损伤的潜力,为其在畜禽健康中的应用提供了理论支持。 展开更多
关键词 柚皮素 内质网应激 自噬
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新城疫病毒HN-mRNA疫苗在SPF鸡中的攻毒保护效果评价 被引量:2
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作者 崔苗苗 冯嘉轩 +5 位作者 李金斗 丁佳欣 郭春红 姜峰 刘晓雷 丁壮 《中国兽医学报》 北大核心 2025年第3期436-442,共7页
为评估新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)HN-mRNA疫苗提供的保护效率,本研究将HN-mRNA疫苗通过肌肉注射方式免疫SPF鸡,通过血凝抑制试验、淋巴细胞增殖试验、RT-qPCR和病理切片等方法评估HN-mRNA候选疫苗诱导的体液免疫、细胞免... 为评估新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)HN-mRNA疫苗提供的保护效率,本研究将HN-mRNA疫苗通过肌肉注射方式免疫SPF鸡,通过血凝抑制试验、淋巴细胞增殖试验、RT-qPCR和病理切片等方法评估HN-mRNA候选疫苗诱导的体液免疫、细胞免疫及攻毒保护效果。结果显示,2.5、5.0、7.5μg HN-mRNA以剂量依赖性的方式诱导血凝抑制抗体,其中7.5μg HN-mRNA诱导的HI抗体略高于商品弱毒疫苗(La Sota株)。此外,针对NDV灭活病毒的刺激,2.5、5.0、7.5μg HN-mRNA免疫组及商品疫苗组淋巴细胞均能发生增殖及活化。为进一步评估HN-mRNA免疫后提供的攻毒保护效果,将105 ELD50 NDV强毒株NA-1株采用滴鼻、点眼方式对7.5μg HN-mRNA免疫组和商品弱毒疫苗(La Sota株)及PBS组进行攻毒,结果显示7.5μg HN-mRNA免疫组和商品疫苗组存活率均为100%,且能保护组织器官免受病毒感染导致的损伤,并且7.5μg HN-mRNA免疫组相较于商品疫苗组能缩短体外排毒时间和体内病毒载量。本试验结果为NDV HN-mRNA候选疫苗的临床应用奠定基础,并为禽类新型mRNA疫苗的研发提供参考。 展开更多
关键词 新城疫病毒 HN-mRNA疫苗 血凝抑制抗体 攻毒保护效果评价
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血清Ⅲ型马立克病病毒单克隆抗体的制备及在疫苗蚀斑计数中的应用
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作者 李文超 刘丹 +5 位作者 杨承槐 李启红 李欣 张莹 毛娅卿 李俊平 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期258-263,共6页
通过制备马立克病病毒(Marek’s disease virus,MDV)血清Ⅲ型特异性单克隆抗体,并对其特性进行鉴定,为建立鸡马立克病(Marek’s disease,MD)二价活疫苗间接免疫荧光蚀斑计数方法奠定基础。以纯化的MDV血清Ⅲ型HVT Fc-126株免疫BALB/c小... 通过制备马立克病病毒(Marek’s disease virus,MDV)血清Ⅲ型特异性单克隆抗体,并对其特性进行鉴定,为建立鸡马立克病(Marek’s disease,MD)二价活疫苗间接免疫荧光蚀斑计数方法奠定基础。以纯化的MDV血清Ⅲ型HVT Fc-126株免疫BALB/c小鼠,采用常规单克隆抗体技术,经间接免疫荧光方法筛选杂交瘤细胞株;选取1株制备MDVⅢ型单克隆抗体,建立MD二价活疫苗的间接免疫荧光蚀斑计数方法。结果筛选出2株稳定分泌抗MDV血清Ⅲ型单克隆抗体的杂交瘤细胞株,并选择1D2株单抗建立了检测MD二价活疫苗的间接免疫荧光蚀斑计数方法,可快速准确地计数二价活疫苗中血清Ⅲ型病毒的蚀斑形成单位数(Plaque forming unit,PFU),与琼脂覆盖法相比,敏感性和特异性大大提高。因此,制备的MDV单克隆抗体具有良好的血清型特异性,可用于MD二价活疫苗的间接免疫荧光蚀斑计数。 展开更多
关键词 马立克病病毒 血清型 单克隆抗体 二价疫苗 蚀斑计数
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滑液支原体烯醇化酶在感染宿主中的反应原性和细胞黏附性
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作者 徐彬 孙玉 +12 位作者 王树 于岩飞 王晓丽 马孙婷 孙华伟 张敬峰 刘传敏 吕立新 冯志新 熊祺琰 邵国青 张小飞 欧阳伟 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期88-96,共9页
滑液支原体(Mycoplasma synoviae,MS)是一种重要的禽病病原,严重危害我国养禽业。本研究旨在分析MS烯醇化酶(enolase,Eno)参与病原致病和诱导感染宿主免疫相关的功能。对MS的Eno蛋白进行种内和种间同源性和进化树分析,并预测Eno的蛋白... 滑液支原体(Mycoplasma synoviae,MS)是一种重要的禽病病原,严重危害我国养禽业。本研究旨在分析MS烯醇化酶(enolase,Eno)参与病原致病和诱导感染宿主免疫相关的功能。对MS的Eno蛋白进行种内和种间同源性和进化树分析,并预测Eno的蛋白结合位点和B细胞表位。MS Eno在不同MS菌株间同源性较高,且有别于其他物种。B细胞表位广泛分布在Eno蛋白的各个部分,且大都与预测的蛋白结合位点有重合。进行Eno原核表达和纯化,制备兔抗Eno多克隆抗血清。利用Western blot分析Eno在MS感染鸡或灭活苗免疫鸡中的反应原性。结果显示,MS Eno与兔抗Eno多克隆抗血清、兔抗MS多克隆抗血清、灭活疫苗(HN01株或YBF-MS1株)高免鸡血清、HN01强毒攻毒后阳性鸡血清、3个不同地方来源的临床阳性鸡血清均能发生反应,说明其在疫苗免疫和病原感染鸡中均表现有反应原性。利用菌落印迹和双荧光检测分析并证实Eno为外膜蛋白。利用间接免疫荧光和ELISA板结合试验分析Eno对鸡滑膜鞘细胞(synovial sheath cells,SSCs)是否具有黏附素作用。试验证实Eno对SSCs具有黏附作用,且此黏附作用具有Eno浓度依赖性。以上证明MS Eno在病原感染和灭活苗免疫鸡中具有反应原性,并作为外膜锚定的细胞黏附素参与对关键宿主细胞SSCs的黏附,为后续深入研究Eno的致病和免疫相关功能提供了重要参考。 展开更多
关键词 滑液支原体 烯醇化酶 反应原性 细胞黏附
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抗菌药物减量对规模奶牛场抗生素抗性基因多样性的影响 被引量:1
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作者 魏玉杰 梁春彩 +2 位作者 王旭丹 李莹洁 刘聚祥 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期2031-2039,共9页
为研究抗菌药物减量使用对河北省规模奶牛场大肠杆菌耐药性的影响及奶牛肠道菌群抗生素抗性基因(antibiotic resistance genes,ARGs)和可移动遗传元件(mobile genetic elements,MGEs,如整合子和转座子等)多样性的影响,评估抗菌药物减量... 为研究抗菌药物减量使用对河北省规模奶牛场大肠杆菌耐药性的影响及奶牛肠道菌群抗生素抗性基因(antibiotic resistance genes,ARGs)和可移动遗传元件(mobile genetic elements,MGEs,如整合子和转座子等)多样性的影响,评估抗菌药物减量化行动的实施效果,自河北省不同地区的3个达标奶牛场和2个非达标奶牛场采集肛拭子样品和粪便样品,肛拭子样品中分离出大肠杆菌并检测其对16种抗菌药物的耐药性,分析两类奶牛场大肠杆菌耐药率的差异性。采取SYBR荧光染料法高通量实时荧光定量PCR技术检测奶牛粪便中的ARGs和MGEs,计算其相对丰度,分析两类奶牛场之间ARGs和MGEs的差异性以及两者之间的相关性。结果显示,两类奶牛场来源的大肠杆菌耐药率差异性较小,非达标场更易产生多重耐药菌株。15个样品中共检出192个ARGs和7个MGEs;ARGs相对丰度最高的为β-内酰胺类抗性基因,其次为四环素类抗性基因。部分达标奶牛场检出的ARGs和MGEs低于非达标场,揭示抗菌药物的大量使用可能与ARGs的产生与传播有关;MGEs检出数量与ARGs检出数量具有相关性,ARGs可能通过水平基因转移进行传播。结果表明,实施抗菌药物减量使用对抗生素耐药基因的多样性具有一定程度的影响,但在短期内对奶牛场的大肠杆菌耐药率和ARGs多样性影响不显著,不同地区之间差异性不大,这也揭示了奶牛场抗生素耐药性的普遍性。 展开更多
关键词 奶牛源大肠杆菌 耐药表型 抗生素抗性基因 可移动遗传元件 高通量荧光定量PCR
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2020-2022年山东地区H9N2亚型禽流感病毒的遗传进化分析 被引量:2
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作者 薛瑞雪 孙海峰 +7 位作者 邢林林 姜子昕 李玉杰 陈峰 蔺晓月 兰邹然 张月 王贵升 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期1611-1621,共11页
为了解山东省H9N2亚型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)流行及遗传变异情况,采用H9亚型AIV荧光定量RT-PCR方法对采集自山东部分地区有呼吸道症状养鸡场的492份鸡气管和肺脏组织样品进行检测,并对检测出的阳性样品进行鸡胚接种,利... 为了解山东省H9N2亚型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)流行及遗传变异情况,采用H9亚型AIV荧光定量RT-PCR方法对采集自山东部分地区有呼吸道症状养鸡场的492份鸡气管和肺脏组织样品进行检测,并对检测出的阳性样品进行鸡胚接种,利用Illumina Miseq测序平台将分离株进行全基因组测序,并构建了进化树,分析了与流感病毒传播能力及致病性相关的关键氨基酸位点的特征。结果显示,492份样品中有72份为H9亚型AIV阳性,阳性率14.63%,阳性样品经鸡胚传代后获得34株H9亚型AIV,通过全基因组测序后分析可得34株分离株均为H9N2亚型AIV。通过HA和NA基因进化树分析,34株分离株HA基因均属于Y280-like分支,NA基因均属于F/98-like分支,在此分支基础上,均存在明显的时间节点小分支,一支为“2013年以前分离株”分支,一支为“2013年以后分离株”分支。分离株HA裂解位点均为^(325)PSRSSR↓GLF^(333),符合低致病性AIV特征,所有病毒均发生了Q226L具有结合哺乳动物α-2,6受体的能力的氨基酸位点突变。内部基因哺乳动物适应性关键氨基酸位点中,所有病毒PB1蛋白发生了I^(368)V增强病毒在哺乳动物传播能力的氨基酸位点突变,部分毒株PB2蛋白发生I292V和A588V哺乳动物适应性增强的氨基酸位点突变。结果表明,山东省H9N2亚型AIV各基因节段存在不同程度的重组和基因变异情况,需加强病毒变异监测。 展开更多
关键词 禽流感病毒 H9N2亚型 遗传进化分析
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稳定表达狂犬病病毒糖蛋白293T细胞系的构建及免疫原性研究 被引量:1
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作者 汪芋 张守峰 +4 位作者 于婷婷 米立娟 么乃全 缪发明 扈荣良 《中国兽医学报》 CSCD 北大核心 2024年第11期2393-2399,共7页
为得到可用于狂犬病亚单位疫苗生产的高效表达狂犬病病毒(rabies virus, RABV)糖蛋白的细胞系,本研究以RT-PCR扩增获得RABV糖蛋白基因序列并克隆入慢病毒表达载体中。重组质粒pLV-RVG与包膜质粒pMD2.0G及包装质粒psPAX2共转染HEK-293T细... 为得到可用于狂犬病亚单位疫苗生产的高效表达狂犬病病毒(rabies virus, RABV)糖蛋白的细胞系,本研究以RT-PCR扩增获得RABV糖蛋白基因序列并克隆入慢病毒表达载体中。重组质粒pLV-RVG与包膜质粒pMD2.0G及包装质粒psPAX2共转染HEK-293T细胞,收获慢病毒并感染新的HEK-293T细胞,通过嘌呤霉素加压筛选获得293T-RVG细胞系。将此细胞系传代20代,间接免疫荧光法(IFA)及Western blot鉴定表明67 kDa的RABV-G蛋白在该细胞内能够高效表达;且细胞系冻融物293T-RVG辅以佐剂肌肉注射免疫小鼠,血清以FAVN法测定RABV中和抗体,在免疫14 d体内效价就可达到2.19 IU/mL,高于国际公认保护阈值(0.5 IU/mL)。本研究成功构建了稳定且高效表达RABV糖蛋白的细胞系293T-RVG,该细胞系能够对攻毒小鼠产生保护作用,可作为一种亚单位疫苗,具备用于大规模生产和应用潜能。 展开更多
关键词 狂犬病 狂犬病病毒糖蛋白 慢病毒 细胞系 免疫试验 亚单位疫苗
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检测牛肠道病毒RT-RAA-LFD方法的建立与初步应用 被引量:1
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作者 张福慧 郑学博 +5 位作者 崔续媛 章凡 张芷源 胡俊英 张群 王新平 《中国兽医学报》 CSCD 北大核心 2024年第11期2348-2355,共8页
本研究研发了一种基于重组酶介导核酸扩增(RAA)技术结合胶体金试纸条快速检测牛肠道病毒(BEV)的方法。以高度保守的BEV 5′UTR作为靶序列,设计出特异性引物,下游引物5′端标记生物素,探针5′端标记6-FAM,初步建立RT-RAA方法。将鼠源抗6-... 本研究研发了一种基于重组酶介导核酸扩增(RAA)技术结合胶体金试纸条快速检测牛肠道病毒(BEV)的方法。以高度保守的BEV 5′UTR作为靶序列,设计出特异性引物,下游引物5′端标记生物素,探针5′端标记6-FAM,初步建立RT-RAA方法。将鼠源抗6-FAM单克隆抗体作为金标抗体,链霉亲和素包被于检测线,羊抗鼠IgG包被于质控线,组装试纸条。将RAA技术与制备的胶体金试纸条相结合,建立起检测牛肠道病毒的RT-RAA-LFD方法,并对该方法的特异性、敏感性与重复性及临床应用等方面进行了评价。结果显示,该方法最佳引物浓度为5μmol/L,在35℃反应8 min即可完成对BEV核酸的扩增;该方法最低检测限为10^(1)拷贝/μL,且与牛病毒性腹泻病毒、牛细小病毒、口蹄疫病毒均无交叉反应;制备的试纸条于4℃条件下,有效期至少为90 d;74份临床样品检测结果显示,该方法与RT-PCR检测结果一致。上述结果表明,本研究建立的BEV RT-RAA-LFD方法灵敏度高、特异性强,且操作更加便捷,适用于临床现场检测,为BEV感染的诊断和流行病学调查提供了新的技术手段。 展开更多
关键词 牛肠道病毒 5′UTR RT-RAA-LFD 胶体金试纸条
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转录组揭示产气荚膜梭菌毒素诱导猪IPEC-J2细胞损伤中关键基因和通路
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作者 贺莹 白晓琴 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期1957-1964,1998,共9页
仔猪腹泻是由产气荚膜梭菌毒素引发的肠道疾病,本研究旨在通过研究与仔猪腹泻相关的关键基因和通路,揭示其对IPEC-J2细胞的损伤机制。使用产气荚膜梭菌毒素处理IPEC-J2细胞,并进行了转录组测序。通过分析差异表达基因的GO功能、KEGG通... 仔猪腹泻是由产气荚膜梭菌毒素引发的肠道疾病,本研究旨在通过研究与仔猪腹泻相关的关键基因和通路,揭示其对IPEC-J2细胞的损伤机制。使用产气荚膜梭菌毒素处理IPEC-J2细胞,并进行了转录组测序。通过分析差异表达基因的GO功能、KEGG通路和蛋白互作网络,确定了细胞损伤中的关键基因和通路。结果显示,相对于对照组,损伤组共检测到460个基因,其中419个基因上调,41个基因下调。KEGG分析进一步发现,Influenza A和NOD样受体信号通路较为显著,蛋白互作网络分析筛选出了8个核心基因的子网络,它们之间呈正相关,这些基因主要注释在Influenza A和NF-kappa B等信号通路上,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)试验进一步证实了RNA-seq测序结果可靠。产气荚膜梭菌毒素对猪IPEC-J2细胞的损伤主要涉及Influenza A、NOD样受体信号通路以及NF-kappa B等通路,MX2、MX1、DDX58、IFI44、ISG15等基因通过关键信号通路可能在猪小肠抵产气荚膜梭菌毒素过程中发挥了重要功能。这为进一步研究产气荚膜梭菌毒素引起仔猪腹泻的机制提供了新的见解。 展开更多
关键词 产气荚膜梭菌毒素 转录组 IPEC-J2细胞 通路
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Sirt1在氧化应激所致奶牛乳腺上皮细胞损伤中的保护作用
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作者 张宇飞 周博文 +3 位作者 程薪同 付守鹏 柳巨雄 郭文晋 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期1000-1007,共8页
旨在初步阐明Sirt1在奶牛乳腺氧化应激中对紧密连接的影响及机制。以奶牛乳腺上皮细胞(MAC-T)为研究对象,使用H2O2诱导细胞氧化应激构建细胞模型,添加Sirt1激动剂SRT 2104,使用流式细胞术检测细胞中活性氧的含量;通过RT-PCR检测Sirt1基... 旨在初步阐明Sirt1在奶牛乳腺氧化应激中对紧密连接的影响及机制。以奶牛乳腺上皮细胞(MAC-T)为研究对象,使用H2O2诱导细胞氧化应激构建细胞模型,添加Sirt1激动剂SRT 2104,使用流式细胞术检测细胞中活性氧的含量;通过RT-PCR检测Sirt1基因的转录水平;用Western blot检测Sirt1、ZO-1、Occludin、Cludin 3、p38MAPK、JNK、MLCK、MLC2的蛋白表达水平;通过细胞免疫荧光检测ZO-1、Occludin、Cludin 3的表达;同时使用试剂盒检测细胞的抗氧化能力。结果表明,H2O2刺激会显著抑制MAC-T细胞活性并抑制Sirt1基因的表达以及Sirt1、ZO-1、Occludin和Cludin 3的蛋白表达;SRT 2104可以有效改善H2O2刺激导致的ZO-1、Occludin和Cludin 3的蛋白表达下降;同时SRT 2104会增强细胞的抗氧化能力并抑制p38MAPK、JNK、MLCK蛋白的表达和MLC2的磷酸化。以上结果表明Sirt1通过抑制p38MAPK/JNK信号传导途径增强细胞的抗氧化能力和紧密连接蛋白表达。 展开更多
关键词 SIRT1 奶牛乳腺上皮细胞 紧密连接 P38MAPK JNK
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菊苣酸对磷酰胺氮芥诱导巨噬细胞免疫抑制的调节作用 被引量:1
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作者 冯晨婧 白莉霞 +7 位作者 杨亚军 刘希望 李世宏 秦哲 葛闻博 许笑 李剑勇 李存 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期319-326,共8页
用3μmol/L磷酰胺氮芥(phosphoramide mustard,PM)诱导RAW264.7细胞24 h,建立体外细胞免疫抑制模型;给予不同剂量(25、50、100μmol/L)的菊苣酸(chicoric acid,CA)干预细胞24 h,考察CA对免疫抑制的调节作用。利用CCK-8法检测细胞活力,... 用3μmol/L磷酰胺氮芥(phosphoramide mustard,PM)诱导RAW264.7细胞24 h,建立体外细胞免疫抑制模型;给予不同剂量(25、50、100μmol/L)的菊苣酸(chicoric acid,CA)干预细胞24 h,考察CA对免疫抑制的调节作用。利用CCK-8法检测细胞活力,中性红吞噬法检测细胞吞噬能力,ELISA试剂盒测定细胞IL-1β和IL-6表达,NO含量测定试剂盒测定细胞NO水平,实时荧光定量PCR测定IL-1β、IL-6和iNOS mRNA的相对表达量。结果显示,3μmol/L PM诱导RAW264.7细胞24 h后,巨噬细胞活力与吞噬能力显著降低(P<0.05),NO、IL-1β与IL-6的表达以及相应的mRNA相对表达量均显著下降(P<0.05),巨噬细胞免疫抑制模型成功建立;给予不同剂量(25、50、100μmol/L)的CA干预24 h后,巨噬细胞活力与吞噬能力显著增强(P<0.05),巨噬细胞NO、IL-1β与IL-6分泌水平以及相应的mRNA相对表达量明显升高(P<0.05)。结果表明,PM可以有效建立体外巨噬细胞免疫抑制模型,CA可能通过增强巨噬细胞活力与吞噬能力,促进炎症因子表达发挥免疫增强作用,从而提高机体免疫功能。本研究建立体外巨噬细胞免疫抑制模型,探究CA对PM诱导RAW264.7细胞免疫抑制的调节作用,为将CA开发为新型兽用免疫增强剂提供了理论基础。 展开更多
关键词 菊苣酸 磷酰胺氮芥 巨噬细胞 免疫抑制 免疫增强
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猪流行性腹泻病毒CH/GSMQ/2022株的分离鉴定与致病性 被引量:1
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作者 梁志博 张中旺 +5 位作者 张莉萍 于瑞明 潘丽 王永录 曾巧英 刘新生 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期2101-2109,2233,共10页
采集了我国甘肃省民勤县某养殖场疑似猪流行性腹泻发病猪的粪便和肠道内容物,通过RT-PCR方法对疑似阳性病料进行检测后,利用Vero细胞对其进行体外分离培养,对成功分离的病毒进行实验室鉴定,对其全基因组序列进行遗传进化分析,并通过动... 采集了我国甘肃省民勤县某养殖场疑似猪流行性腹泻发病猪的粪便和肠道内容物,通过RT-PCR方法对疑似阳性病料进行检测后,利用Vero细胞对其进行体外分离培养,对成功分离的病毒进行实验室鉴定,对其全基因组序列进行遗传进化分析,并通过动物回归试验对其致病力进行评价。结果显示,该猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)阳性病料处理液接种Vero细胞盲传至第4代时可观察到典型的合胞体病变现象,第6代病毒滴度达到10^(-4.75)TCID_(50)/mL;电镜观察可以看到直径约为100 nm、圆形、表面有明显囊膜和纤突的PEDV样病毒粒子;全基因组测序分析表明该毒株全长28085 bp,与经典毒株CV777代表的G1亚型毒株亲缘关系较远(同源性为96.6%),与G2b型毒株BJ-2011-1、IA1、USA/Colorado/2013和WELL同源性较高(为98.6%),表明该毒株属于G2b型流行毒株。动物回归试验结果显示,5日龄的仔猪在攻毒后12 h即出现呕吐、急性水样腹泻、消瘦和精神沉郁等临床症状,于24 h内症状加重而死亡,剖检后可以观察到感染仔猪的胃部肿胀,小肠高度臌气、肠壁薄而透明,内部还有未消化完的乳汁凝块。结果表明,本试验成功分离鉴定到1株PEDV G2b型流行毒株,并对其全基因组序列和致病性进行了分析,为今后针对PEDV基因功能、致病机制的研究及疫苗的开发提供了研究材料。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 分离鉴定 遗传进化 致病性
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新城疫、血清4型和8型禽腺病毒病二联三价嵌合型病毒样颗粒的构建及鉴定 被引量:2
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作者 郭春红 李金斗 +4 位作者 丁佳欣 冯嘉轩 陈凯楠 姜峰 丁壮 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期2087-2093,2115,共8页
基于昆虫杆状病毒表达系统和新城疫病毒样颗粒载体平台,采用间接免疫荧光、Western blot和透射电镜等方式,构建一种表面展示NDV HN蛋白、FAdV4 Fiber-2蛋白、FAdV-8a Fiber蛋白和FAdV-8b Fiber蛋白的二联三价嵌合型病毒样颗粒(ND-FAdV-4... 基于昆虫杆状病毒表达系统和新城疫病毒样颗粒载体平台,采用间接免疫荧光、Western blot和透射电镜等方式,构建一种表面展示NDV HN蛋白、FAdV4 Fiber-2蛋白、FAdV-8a Fiber蛋白和FAdV-8b Fiber蛋白的二联三价嵌合型病毒样颗粒(ND-FAdV-4/8a/8b cVLPs)。结果显示,成功构建了表达FAdV-8a Fiber和FAdV-8b Fiber蛋白的重组杆状病毒rBV-c8aFiber和rBV-c8bFiber。此外,ND-FAdV-4/8a/8b cVLPs各组分蛋白均正确表达,是一种约100 nm、具备囊膜和纤突的纳米颗粒,为新城疫、禽腺病毒病的防控提供了一种安全的病毒样颗粒新型疫苗候选株。 展开更多
关键词 新城疫 血清4型和8型禽腺病毒病 昆虫杆状病毒表达系统 嵌合病毒样颗粒
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中药复方“四神丸加减”对感染白痢沙门菌雏鸡免疫功能和肠道菌群的影响 被引量:2
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作者 成基 鞠天缘 +2 位作者 李童 胡桂秋 柳巨雄 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期1026-1031,共6页
鸡白痢沙门菌病是危害养鸡行业最严重的疾病之一。抗生素的过度使用导致动物源性细菌产生耐药性。而中药复方替代抗生素已成为相关研究的重点和热点。中药复方“四神丸加减”(Sishen Wan Plus and Minus, SSJ)具有涩肠止泻、益气活血、... 鸡白痢沙门菌病是危害养鸡行业最严重的疾病之一。抗生素的过度使用导致动物源性细菌产生耐药性。而中药复方替代抗生素已成为相关研究的重点和热点。中药复方“四神丸加减”(Sishen Wan Plus and Minus, SSJ)具有涩肠止泻、益气活血、清热利湿解毒等功能,但是SSJ对鸡白痢沙门菌病的影响尚缺乏研究。本研究旨在研究SSJ对感染白痢沙门菌雏鸡的免疫功能和肠道菌群的影响。将90只1日龄雏鸡均分为6组,空白对照组、鸡白痢沙门菌组、SSJ低剂量治疗组(0.4 g/kg)、SSJ中剂量治疗组(0.8 g/kg)、SSJ高剂量治疗组(1.6 g/kg)、抗生素组。通过16S rRNA测序和ELISA等技术探究SSJ对鸡白痢沙门菌病的影响。研究结果显示,SSJ能够显著降低由白痢沙门菌引起的雏鸡绒毛长度降低以及炎性因子水平的升高(P<0.05)。此外,SSJ也能显著缓解由白痢沙门菌引起的雏鸡免疫球蛋白指数的显著降低(P<0.05)。16S rRNA测序结果显示,高剂量SSJ能够显著增加菌群的多样性以及有益菌的丰度。以上结果证实,添加SSJ能够改善白痢沙门菌感染引起的雏鸡免疫功能减弱和肠道菌群多样性的减少。 展开更多
关键词 四神丸加减 鸡白痢 免疫球蛋白 炎性因子 肠道菌群
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布鲁菌二联BCSP31-L7/L12-IL-2嵌合病毒样颗粒疫苗候选株的构建与鉴定 被引量:1
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作者 邹映雪 黄天鸿 +6 位作者 冯嘉轩 丁佳欣 陈铭桦 陈凯楠 郭春红 张頔 丁壮 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期865-871,共7页
布鲁菌病的传统疫苗存在接种后干扰血清学诊断及可能出现毒力返强等缺点,严重干扰疫病监测,影响疫病净化。因此,本研究基于新城疫病毒样颗粒(ND virus like particles,ND VLPs)载体平台,利用昆虫杆状病毒表达系统和GPI锚定策略,以免疫... 布鲁菌病的传统疫苗存在接种后干扰血清学诊断及可能出现毒力返强等缺点,严重干扰疫病监测,影响疫病净化。因此,本研究基于新城疫病毒样颗粒(ND virus like particles,ND VLPs)载体平台,利用昆虫杆状病毒表达系统和GPI锚定策略,以免疫增强因子IL-2、高保守性的保护性抗原蛋白L7/L12(来源猪种S2株)和羊种BCSP31蛋白(来源羊种M5株)为靶点,构建绿色、安全的布鲁菌二联嵌合型病毒样颗粒新型疫苗候选株(BCSP31-L7/L12-IL-2 cVLPs)。PCR及免疫荧光结果表明成功构建了表达IL-2和L7/L12蛋白的重组杆状病毒,Western blot结果显示该cVLPs各组分蛋白正确表达,透射电镜观察可见表面展示纤突结构、大小约为100 nm的粒子,表明布鲁菌二联嵌合型病毒样颗粒BCSP31-L7/L12-IL-2 cVLPs构建成功。 展开更多
关键词 布鲁菌 新城疫病毒样颗粒载体 二联嵌合型病毒样颗粒疫苗 L7/L12蛋白 BCSP31蛋白
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黄芪多糖APS10-100组分免疫调节活性及其机制 被引量:8
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作者 李巍 陈贵才 +1 位作者 胡伟莲 戴德慧 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期1710-1719,共10页
为探索黄芪多糖APS10-100组分的单糖组成及对小鼠的免疫调节作用,通过柱前衍生化高效液相色谱法分析对比了黄芪多糖APS10-100组分及黄芪粗多糖中的单糖组成。96只ICR小鼠分为对照组、模型组、APS10-100及黄芪粗多糖低、中、高剂量给药组... 为探索黄芪多糖APS10-100组分的单糖组成及对小鼠的免疫调节作用,通过柱前衍生化高效液相色谱法分析对比了黄芪多糖APS10-100组分及黄芪粗多糖中的单糖组成。96只ICR小鼠分为对照组、模型组、APS10-100及黄芪粗多糖低、中、高剂量给药组(50,100,200 mg/kg)等8组,除对照组外,其余各组小鼠腹腔注射环磷酰胺(CTX)制备免疫抑制小鼠,给药组每日灌胃给药1次,共给药30 d。给药结束后测小鼠体质量,采血后脱颈处死各组小鼠,取肝脏、脾脏及胸腺等脏器测质量并计算脏器系数。采用ELISA法检测各组小鼠外周血中IFN-γ、IgG含量及肝组织中抗氧化指标超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),采用流式细胞术检测小鼠血液中T细胞分型。结果显示,黄芪多糖APS10-100组分单糖组成主要为GalA、Glc、Gal及Ara,物质的量的比率为0.43∶1.0∶0.16∶0.39,与黄芪粗多糖有所不同。与对照组比,高剂量APS10-100与黄芪粗多糖均能抵抗CTX所致的体质量下降(P>0.05)。与模型组比,高剂量APS10-100可极显著降低肝脏及脾脏指数、肝组织MDA含量(P<0.01),极显著升高外周血中IFN-γ、CD3^(+)CD4^(+)、CD3^(+)CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)及肝组织GSH-Px活性(P<0.01),显著升高外周血中IgG水平(P<0.05);高剂量黄芪粗多糖能显著降低肝脏指数(P<0.05),显著升高IFN-γ、CD3^(+)CD4^(+)及CD4^(+)/CD8^(+)(P<0.05)。结果表明,黄芪多糖APS10-100组分具有良好抗氧化活性,对CTX所致小鼠免疫抑制具有保护作用,其效果优于黄芪粗多糖。 展开更多
关键词 黄芪多糖 单糖组成 免疫调节 抗氧化 小鼠
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A型塞内卡病毒VP2蛋白单抗制备及阻断ELISA方法的建立 被引量:6
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作者 田占云 崔川 +4 位作者 李明珠 白若曼 安满鑫 袁万哲 李丽敏 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期872-879,共8页
为建立一种检测A型塞内卡病毒(SVA)抗体的阻断ELISA方法,本研究制备了VP2蛋白的单克隆抗体,使用重组VP2蛋白作为包被抗原,利用酶标单克隆抗体2D4^(E)作为标记抗体,对阻断ELISA的各个条件进行优化。结果显示,所制备的2株单克隆抗体均为I... 为建立一种检测A型塞内卡病毒(SVA)抗体的阻断ELISA方法,本研究制备了VP2蛋白的单克隆抗体,使用重组VP2蛋白作为包被抗原,利用酶标单克隆抗体2D4^(E)作为标记抗体,对阻断ELISA的各个条件进行优化。结果显示,所制备的2株单克隆抗体均为IgG1类,且具有良好的免疫反应性。建立的阻断ELISA方法抗原的最适包被质量浓度为4 mg/L;最佳封闭液为1%BSA;待检血清最佳稀释倍数为1∶4;酶标单抗2D4^(E)最佳稀释倍数为1∶3200;避光显色时间为10 min。该ELISA方法与猪流行性腹泻病毒(PEDV)阳性血清、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)阳性血清、猪伪狂犬病病毒(PRV)阳性血清不发生交叉反应,且灵敏性较好。重复性试验结果显示,该阻断ELISA方法的批内和批间变异系数均小于6%。利用该方法与间接免疫荧光(IFA)共同检测91份临床猪血清样本,总符合率为97.8%(89/91)。对河北部分地区372份猪血清样品进行检测,结果显示SVA抗体阳性率为7.8%(29/372),且在春夏两季阳性检出率比较高。研究结果表明,该阻断ELISA方法具有较高的特异性、敏感性和重复性,可应用于临床上猪血清样品的检测,为SVA的监测和防控提供了技术支持。 展开更多
关键词 A型塞内卡病毒 VP2蛋白 阻断ELISA 单克隆抗体
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BVDV感染对小鼠巨噬细胞IFN-β相关信号分子的影响 被引量:1
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作者 段明媚 曹唱唱 +10 位作者 赵心怡 陈斐 周彬 姜胜 邵春艳 周莹珊 董婉玉 杨杨 王晓杜 宋厚辉 宋泉江 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期1828-1836,共9页
为了探究致细胞病变型牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhealvirus,BVDV)对小鼠巨噬细胞IFN-β相关信号分子的影响,以0.1和3 MOI感染小鼠巨噬细胞RAW264.7,通过RT-qPCR、Western blot、ELISA等方法检测小鼠巨噬细胞中TLR37/TLR7、IRF... 为了探究致细胞病变型牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhealvirus,BVDV)对小鼠巨噬细胞IFN-β相关信号分子的影响,以0.1和3 MOI感染小鼠巨噬细胞RAW264.7,通过RT-qPCR、Western blot、ELISA等方法检测小鼠巨噬细胞中TLR37/TLR7、IRF3/IRF7、STAT1、IFN-β、ISG15/OAS1和USP18/SOCS1等因子的转录和表达水平差异,并对巨噬细胞中BVDV拷贝数进行检测。结果显示BVDV可以进入巨噬细胞细胞内,但病毒拷贝数不能随时间而增长。BVDV进入小鼠巨噬细胞先后上调TLR3和下调TLR7的转录水平,继而显著上调IRF3和IRF7转录水平,并呈现一定的剂量依赖性。STAT1和IFN-β的转录和表达也随BVDV感染而显著升高,而且IFN-β表达量随BVDV的病毒量和感染时间而增加。发挥抗病毒活性的ISG15和OAS1转录水平在BVDV感染前期出现显著升高,感染后期恢复正常,同时在感染后期干扰素负性调节因子USP18和SOCS1转录水平显著升高。所以致细胞病变型BVDV可以感染小鼠巨噬细胞,但不能复制,但可以通过TLR3/7-IRF3/7激活IFN相关信号通路,并接受负性调节因子的调控。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 小鼠 巨噬细胞 复制 干扰素
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《中国兽医学报》第七届编辑委员会委员名单
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《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期F0002-F0002,共1页
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