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公众气候变化健康素养测评方法建立与评价 被引量:1
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作者 马怡然 王裕 +3 位作者 吕祎然 赵文轩 班婕 李湉湉 《环境卫生学杂志》 2026年第2期151-156,172,共7页
目的建立适用于我国公众的气候变化健康素养测评方法,为量化评估公众应对气候变化健康素养提供科学手段。方法基于《公众应对气候变化健康素养及释义》国家指南文件,结合国内外健康素养相关进展和专家意见,编制公众气候变化健康素养测... 目的建立适用于我国公众的气候变化健康素养测评方法,为量化评估公众应对气候变化健康素养提供科学手段。方法基于《公众应对气候变化健康素养及释义》国家指南文件,结合国内外健康素养相关进展和专家意见,编制公众气候变化健康素养测评量表,并于2024年5月至12月开展25个城市的人群素养调查,评价和检验量表信效度。结果研究构建的气候变化健康素养测评量表涵盖“掌握基本知识和理念”“提高自身技能”“培养健康生活方式和行为”三个维度,共计30个测评题目。预调查重测信度的相关系数为0.83,构成信度中克朗巴赫α系数(Cronbach’sα)为0.85,Kaiser-Meyer-Olkin(KMO)指数为0.92(Bartlett球形检验P<0.05)。正式调查构成信度中Cronbach’sα为0.85,KMO指数为0.91(Bartlett球形检验<0.05),表明量表信效度稳定,可信度高。结论本研究编制的量表具有良好的信度和效度,为气候变化健康素养提供了一套标准化的测评工具,可用于评价公众气候变化健康素养水平。 展开更多
关键词 气候变化健康素养 量表 信效度检验
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柯萨奇病毒A16小鼠适应过程中VP1位点突变与复制动力学的相关性研究
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作者 李慧洁 王蕊 +4 位作者 李冀琛 段伟 梁钰材 孙强 张勇 《病毒学报》 北大核心 2026年第1期23-36,共14页
目的阐明柯萨奇病毒A16(Coxsackievirus A16,CVA16)在跨宿主适应过程中毒力增强的分子基础,并构建从母株(P0株)到小鼠适应株(P5株)的表型与遗传演化框架,为解析其宿主适应性机制提供理论依据。方法以临床分离的CVA16母株(P0株)为起始毒... 目的阐明柯萨奇病毒A16(Coxsackievirus A16,CVA16)在跨宿主适应过程中毒力增强的分子基础,并构建从母株(P0株)到小鼠适应株(P5株)的表型与遗传演化框架,为解析其宿主适应性机制提供理论依据。方法以临床分离的CVA16母株(P0株)为起始毒株,通过在ICR乳鼠体内连续传代构建小鼠适应性毒株,建立P0株至P5株的完整演化谱系。利用全基因组测序技术比较P0株与P5株的遗传变异差异,结合RD细胞感染实验与乳鼠攻毒实验,系统评估不同代次毒株的体外复制能力、体内致病性及靶器官组织病理学改变。通过病毒结合试验与内化试验,解析CVA16毒力增强的可能分子机制。结果基因组比对分析明确了P0株与P5株间的变异特征,其中VP1的关键突变定位于病毒入侵相关功能区域。体内外表型验证显示,P5株相较于P0母株呈现显著增强的复制能力与致病性:在RD细胞中可诱导更高水平的病毒颗粒产生及病毒RNA复制;对乳鼠攻毒后,能引发快速体重下降、后肢麻痹等典型症状,且致死率达100%;在乳鼠骨骼肌、肺和脊髓中,病毒滴度显著升高,并造成更严重的组织炎性浸润与结构损伤。机制研究证实,P5株毒力升高主要与病毒内化效率及后续胞内复制能力的提升有关,而病毒与宿主细胞的初始结合能力无显著差异。结论本研究揭示CVA16在小鼠适应过程中,其毒力增强是由多层次遗传变异驱动的结果,其中病毒进入效率和胞内复制能力的提升是关键调控因素。本研究为理解CVA16跨宿主适应机制及神经系统致病机理提供了试验证据,也为靶向病毒结构功能域的抗病毒药物研发及疫苗设计奠定了基础。 展开更多
关键词 柯萨奇病毒A16 小鼠适应株 VP1突变 病毒内化 致病性
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中国埃可病毒3型基因特征研究
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作者 朱成林 赵晓虹 +17 位作者 周蕾 林婕 肖金波 祝双利 冀天娇 王东艳 杨倩 苏飞 刘瑞芳 杨建芳 杨澜 肖凯涛 邵珂欣 高尚 徐亚北 李晓梅 严冬梅 张勇 《病毒学报》 北大核心 2026年第1期1-13,共13页
目的为了揭示埃可病毒3型(Echovirus 3,E3)的分子进化特征与流行规律,完善其基因分型方法,阐明其在中国及全球的分子流行病学特征,为E3的防控策略制定提供科学依据。方法基于本实验室收集的2003-2023年30株E3毒株,对全长VP1区进行扩增... 目的为了揭示埃可病毒3型(Echovirus 3,E3)的分子进化特征与流行规律,完善其基因分型方法,阐明其在中国及全球的分子流行病学特征,为E3的防控策略制定提供科学依据。方法基于本实验室收集的2003-2023年30株E3毒株,对全长VP1区进行扩增、测序,并结合GenBank中全球99条E3 VP1全长序列(45条中国序列和54条国外序列)进行系统发育分析。利用BEAST X软件估计进化速率、共同祖先时间(The most recent common ancestor,tMRCA)及有效种群大小,对代表性毒株进行全基因组测序与重组分析。结果75株中国E3分离株与原型株Morrisey的VP1区核苷酸相似度为79.7%–82.8%。系统进化分析将全球E3划分为A–E五个基因型,其中C和D基因型可进一步划分为C1–C6和D1–D4亚型。C基因型为全球当前优势基因型,中国优势基因型与全球一致。全球E3 VP1区平均进化速率为2.95×10^(-3)每个碱基每年,最近共同祖先追溯至1944年,中国E3分离株起源较晚(tMRCA为1981年)。全球E3经历了从A基因型到B、C、D基因型共同流行再到C基因型主要流行的更替,而中国流行的E3起源于1981年,由B基因型更替到C基因型。VP1区氨基酸突变位点分析发现不同基因型存在特异性突变位点,这为C基因型取代B基因型提供了线索。全基因组重组分析提示E3在非结构蛋白区(P2、P3)与EV-B组其他血清型存在重组。结论本研究完善了全球E3基于全长VP1的基因分型方法,揭示了E3在中国及全球的分子流行特征,明确了其进化历程和基因型更替规律,发现了不同基因型的特异性突变位点,证实了E3存在重组现象,为其防控策略制定提供了关键依据。 展开更多
关键词 埃可病毒3型(E3) 基因型 分子流行病学 进化遗传学 基因重组
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肠道病毒B75型感染2日龄IFNAR^(-/-)乳鼠的特征研究
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作者 韩晓梅 张珂艺 +7 位作者 路环环 李冀琛 肖金波 李慧洁 赵营颖 孙强 刘志军 张勇 《病毒学报》 北大核心 2026年第1期60-70,共11页
目的近年来,新型肠道病毒B75型(Enterovirus B75,EV-B75)在全球多地出现病例,可引起急性弛缓性麻痹等严重症状。但因病例稀少,其致病机制及引发严重疾病的机制尚未明确。本研究旨在通过构建EV-B75感染动物模型,明确其致病性和组织嗜性,... 目的近年来,新型肠道病毒B75型(Enterovirus B75,EV-B75)在全球多地出现病例,可引起急性弛缓性麻痹等严重症状。但因病例稀少,其致病机制及引发严重疾病的机制尚未明确。本研究旨在通过构建EV-B75感染动物模型,明确其致病性和组织嗜性,为后续研究其致病机理等提供基础。方法以2日龄I型干扰素受体缺陷型(Type I interferon receptor gene-knockout,IFNAR^(-/-))乳鼠为实验对象,经肌肉注射构建EV-B75感染模型,并通过体重检测、临床评分,生存率监测和测定各脏器组织中病毒载量来评估其致病性。采用HE染色观察组织病理变化,对肌肉组织进行RNA测序并通过GO、KEGG分析差异表达基因功能与通路。结果感染乳鼠自第2天起出现生长迟滞,至第6天时实验组平均体重(1.7g)显著低于对照组(3.6g)。在感染后第4天,90%的乳鼠出现后肢麻痹症状,并于第6天全部死亡。脑和骨骼肌中病毒载量持续升高,并于第6天达到峰值(分别为10^(5.5)TCID_(50)、10^(7)TCID_(50))。多脏器出现炎症损伤,以脑部水肿、骨骼肌纤维排列紊乱及断裂溶解最为突出。转录组测序分析共鉴定出1870个差异表达基因,显著富集于炎症小体激活、活性氧代谢、T细胞活化及JAK-STAT等免疫相关通路。结论EV-B75在IFNAR^(-/-)乳鼠中表现出强神经侵袭性和高致病性,骨骼肌或为早期主要复制靶器官,病毒可经其扩散至脑等组织;差异表达基因在JAK-STAT等信号通路中显著富集,提示该通路异常激活及介导的过度炎症反应,可能是EV-B75感染后病毒复制增强、组织严重损伤的关键机制。本感染模型为探索EV-B75的致病机制及潜在抗病毒策略提供了重要实验平台。 展开更多
关键词 肠道病毒B75 IFNAR^(-/-)乳鼠模型 致病性 转录组测序
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携带增强绿色荧光蛋白的重组甲型流感病毒构建及体外应用
5
作者 李佳 王东红 +8 位作者 蒋宇婕 韩瑞雯 楚巧鸿 王瑭琪 刘冠雅 张雪洁 黄保英 邓瑶 谭文杰 《微生物学报》 北大核心 2025年第10期4607-4620,共14页
【目的】构建表达增强绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)报告基因的重组甲型流感病毒,并研究其体外生物学特性、抗病毒药物筛选及中和抗体检测的应用。【方法】运用流感病毒反向遗传学技术在H1N1-PR8病毒神经氨酸... 【目的】构建表达增强绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)报告基因的重组甲型流感病毒,并研究其体外生物学特性、抗病毒药物筛选及中和抗体检测的应用。【方法】运用流感病毒反向遗传学技术在H1N1-PR8病毒神经氨酸酶(NA)基因的C端插入EGFP基因,成功构建并拯救出重组甲型流感病毒,命名为PR8NAEGFP/WSN。采用逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)与测序分析验证EGFP插入位置的准确性及遗传稳定性;通过EGFP报告基因表达、复制动力学分析和空斑形态观察,对重组病毒(PR8NAEGFP/WSN)和对照病毒(PR8NA/WSN,无EGFP插入)进行鉴定;采用病灶形成试验(focus-forming assay,FFA)、定量聚合酶链式反应(quantitative polymerase chain reaction,q PCR)和EGFP荧光检测,评估流感病毒阳性药物法匹拉韦的体外抗病毒药效;同时采用病灶减少中和试验(focus reduction neutralization test,FRNT)和报告基因活性检测,开展甲型流感病毒(influenza A virus,IAV)中和抗体检测。【结果】重组病毒(PR8NAEGFP/WSN)在鸡胚中经过5代盲传后仍能保持遗传稳定。与PR8NA/WSN相比,该重组病毒在48 h测得的病毒滴度略低,结晶紫噬斑形态与对照病毒相似。采用重组病毒测得的法匹拉韦半数有效浓度(half maximal effective concentration,EC50)与对照病毒一致,且通过FFA、q PCR和EGFP荧光等多种检测方法所得的EC50值之间具有良好的相关性。FRNT和EGFP荧光测定的中和抗体滴度相关系数r为0.9304,结果具有良好的一致性。【结论】携带报告基因的重组流感病毒为IAV的基础研究、抗病毒药物和疫苗评价提供了实时可视化的工具。 展开更多
关键词 甲型流感病毒 反向遗传学 报告基因 体外应用 抗病毒药物 中和抗体
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基于多种机器学习算法鉴定四个靶基因作为儿童急性轮状病毒感染的分子生物标志物的研究 被引量:2
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作者 王雪琪 黄龙 +6 位作者 张锦华 郑港 王怡鹏 何文俊 刁美 庞立丽 黄涛 《病毒学报》 北大核心 2025年第2期446-461,共16页
轮状病毒引起的儿童腹泻通常表现为严重的腹泻、呕吐和脱水,尤其对免疫系统尚未完全成熟的儿童构成较大健康威胁。尽管现有的诊断方法如PCR和ELISA在临床实践中被广泛应用,但仍面临准确性、时效性和成本等方面的挑战。因此,本研究提出... 轮状病毒引起的儿童腹泻通常表现为严重的腹泻、呕吐和脱水,尤其对免疫系统尚未完全成熟的儿童构成较大健康威胁。尽管现有的诊断方法如PCR和ELISA在临床实践中被广泛应用,但仍面临准确性、时效性和成本等方面的挑战。因此,本研究提出了一种结合生物信息学和机器学习技术的创新分析框架。通过整合来自多个队列的基因表达数据,识别出了与急性轮状病毒感染高度相关的分子生物标志物,并验证了其在不同临床组中的特异性。研究发现,四个基因(CD1C、IFI27、IFI44和IFI44L)的组合在急性轮状病毒感染组与健康组之间表现出显著的差异表达,与其他常见病原引起的腹泻相比,这一组合具有更高的特异性。这些发现为儿童轮状病毒腹泻的早期诊断提供了重要的见解,并为开发快速、灵敏且经济高效的临床诊断工具奠定了基础。此外,通过功能富集分析和免疫细胞浸润分析,揭示了这些基因在免疫反应中的潜在作用,特别是在免疫调节和细胞修复中的关键角色。本研究的结果为急性轮状病毒感染的早期诊断和个性化治疗提供了重要的依据和参考。 展开更多
关键词 腹泻 轮状病毒 分子生物标志物 机器学习 免疫细胞浸润
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缺失F1L对重组复制缺陷痘苗病毒天坛株在小鼠中免疫原性与免疫保护效果的影响 被引量:1
7
作者 刘士元 任皎 +7 位作者 赵莉 吴依依 刘冠雅 韩一泽 黄保英 王文玲 田厚文 谭文杰 《病毒学报》 北大核心 2025年第2期334-343,共10页
痘苗病毒(Vaccinia virus,VACV)广泛用于疫苗与重组病毒载体。国内拥有自主知识产权的复制缺陷型痘苗病毒天坛株(Non-replicating Tiantan strain Vaccinia virus,NTV)作为新型猴痘疫苗近期已获得临床试验批准。前期研究中,本课题组通... 痘苗病毒(Vaccinia virus,VACV)广泛用于疫苗与重组病毒载体。国内拥有自主知识产权的复制缺陷型痘苗病毒天坛株(Non-replicating Tiantan strain Vaccinia virus,NTV)作为新型猴痘疫苗近期已获得临床试验批准。前期研究中,本课题组通过回插基因C7L获得了重组病毒NTV-C7L(J),然而该重组病毒的免疫原性未得到明显改善,迫切需要进一步改进。本研究利用同源重组技术对NTV-C7L(J)进行了二次基因改造,构建了缺失F1L基因的重组病毒NTV-ΔF1L-C7L(J)。BALB/c小鼠免疫结果表明,105 PFU免疫剂量二次肌肉注射,NTV-ΔF1L-C7L(J)可诱导出较强体液免疫反应和CD8^(+)T细胞反应,其水平明显高于NTV与NTV-C7L(J)免疫组。与2×10^(5) PFU剂量复制型痘苗病毒天坛株(Vaccinia virus Tiantan strain,VTT)组尾部划痕单剂免疫组相比,NTV-ΔF1L-C7L(J)抗体应答低但细胞免疫反应强。初次免疫后第42d采用致死剂量(107 PFU)VACV WR株进行小鼠滴鼻攻毒,NTV-ΔF1L-C7L(J)加强免疫组与VTT单剂免疫组均可提供完全保护,且攻毒后前者小鼠体重保护明显优于后者;但NTV与NTV-C7L(J)免疫组仅呈现部分保护(分别为60%和90%)。研究结果表明∶F1L基因的缺失明显提高了NTV及NTV-C7L(J)的免疫原性与免疫保护效果,且安全性优于VTT。本研究为开发新型痘苗病毒载体及更加安全高效阻断猴痘的疫苗提供了新思路和实验依据。 展开更多
关键词 痘苗病毒 天坛株 复制缺陷 F1L 免疫原性 保护
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西尼罗病毒和基孔肯雅病毒双价重组DNA疫苗的构建及在小鼠中诱导的免疫应答研究 被引量:1
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作者 舒畅 李梦哲 +7 位作者 翟程程 赵志敏 单徐畅 邴佳洛 祁振勇 邓瑶 翟德胜 谭文杰 《病毒学报》 北大核心 2025年第3期713-724,共12页
构建西尼罗病毒(West nile virus,WNV)与基孔肯雅病毒(Chikungunya virus, CHIKV)的新型双价重组DNA疫苗并在小鼠中评价其免疫原性。本研究以WNV的prM-E蛋白和CHIKV的C-E3-E2-6K-E1或E3-E2-6K-E1蛋白为靶抗原,构建了WNV和CHIKV双价重组... 构建西尼罗病毒(West nile virus,WNV)与基孔肯雅病毒(Chikungunya virus, CHIKV)的新型双价重组DNA疫苗并在小鼠中评价其免疫原性。本研究以WNV的prM-E蛋白和CHIKV的C-E3-E2-6K-E1或E3-E2-6K-E1蛋白为靶抗原,构建了WNV和CHIKV双价重组DNA疫苗VRC-PrME-2A-CE和VRC-PrME-2A-E。转染HEK293T细胞后通过Western blot验证目的蛋白的表达。两剂次同源免疫小鼠,通过ELISA和Elispot进行体液与细胞免疫检测,并与表达WNV-XJ11129-3株的prM-E蛋白的WNV单价DNA疫苗VRC-prME和表达CHIKV 181/clone25的C-E3-E2-6K-E1蛋白的CHIKV单价DNA疫苗VRC-CE进行比较。结果显示,双价DNA疫苗构建成功。重组双价DNA疫苗单剂或加强免疫小鼠后均能诱导较高水平抗原特异性IgG,且与单价疫苗滴度相当。细胞免疫检测结果显示:加强免疫后VRC-PrME-2A-CE表现出针对CHIKV E1和CHIKV E2最高的分泌IFN-γ的T细胞水平,但与单价疫苗VRC-CE无统计学差异。本研究成功构建两款针对WNV和CHIKV的双价DNA疫苗,免疫小鼠后可以诱导产生良好的体液和细胞免疫应答,本研究为新型WNV和CHIKV双价基因工程疫苗的研发应用提供了实验参考。 展开更多
关键词 西尼罗病毒 基孔肯雅病毒 DNA疫苗 小鼠 免疫原性
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埃可病毒11型不同基因型间交叉中和效应及抗原性变异的初步研究 被引量:1
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作者 刘莹 李冀琛 +6 位作者 王蕊 李慧洁 梁钰材 段伟 肖金波 孙强 张勇 《病毒学报》 北大核心 2025年第2期291-300,共10页
埃可病毒11型(Echovirus 11,E11)是一种常被检出的肠道病毒,近年来在亚洲与欧洲地区多次报道由E11引发新生儿重症病例甚至导致死亡。自1994年E11在我国被首次检出后,其基因型历经多次更替。为探究基因型更替与型间交叉中和能力是否存在... 埃可病毒11型(Echovirus 11,E11)是一种常被检出的肠道病毒,近年来在亚洲与欧洲地区多次报道由E11引发新生儿重症病例甚至导致死亡。自1994年E11在我国被首次检出后,其基因型历经多次更替。为探究基因型更替与型间交叉中和能力是否存在相关性,本研究选取了曾经在中国流行的A1、A2、C1、C3、D5以及E基因型的代表性毒株,依次进行噬斑试验、浓缩、纯化和灭活,随后与铝佐剂混合,于第0周、第2周、第4周,分三次对6周龄雌性BALB/c小鼠进行免疫。在末次免疫1周后,采集小鼠抗血清进行交叉中和效果评估。中和实验结果表明,不同基因型间的交叉中和能力存在显著差异。部分毒株能够突破前代毒株所形成的免疫保护屏障,这一现象与E11流行基因型转换的规律相契合。其中,D5基因型毒株展现出较高的免疫原性以及较为广谱的交叉保护特性,具备作为理想疫苗候选株的特征。同时,当前流行的D5基因型毒株抗血清对C1和C3基因型毒株提供的交叉保护作用有限,提示未来有可能出现新的基因型更替。此外,通过序列分析发现,VP1-BC loop和VP2-EF loop区域的差异可能对E11毒株的抗原性产生影响,进一步揭示了E11免疫逃逸的潜在机制。本研究系统地探讨了E11的交叉免疫效应及其对基因型更替的影响,为制订E11感染的防控策略和开展疫苗研发提供了重要的参考依据。 展开更多
关键词 肠道病毒 埃可病毒11型 基因分型 交叉中和 血清保护
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2023年福建省急性出血性结膜炎病原体鉴定及基因进化分析 被引量:1
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作者 周蕾 朱颖 +13 位作者 冀天娇 杨倩 刘娜 祝双利 肖金波 于力恒 郭琴 刘莹 李冀琛 栗凡 肖梦怡 张勇 何文祥 严冬梅 《病毒学报》 北大核心 2025年第2期301-309,共9页
本研究利用国家疾病监测信息管理系统,对2023年福建省急性出血性结膜炎(Acute hemorrhagic conjunctivitis,AHC)的暴发进行了描述性流行病学分析,并采集40份AHC患者眼结膜拭子进行病原学鉴定和基因进化分析。结果显示,福建省2023年AHC... 本研究利用国家疾病监测信息管理系统,对2023年福建省急性出血性结膜炎(Acute hemorrhagic conjunctivitis,AHC)的暴发进行了描述性流行病学分析,并采集40份AHC患者眼结膜拭子进行病原学鉴定和基因进化分析。结果显示,福建省2023年AHC报告病例数6024例,发病率14.38/10万。5-14岁的发病儿童占发病总数的59.8%,学生、农民和幼托儿童为主要发病人群占比84.7%。40份拭子分离到26株柯萨奇病毒A组24型变异株(Coxsackievirus A24 variant,CVA24v)。基于3C和VP1区域的基因进化树表明福建26株CVA24v属于GⅣ基因型。3株福建CVA24v的全基因组序列结果显示其在5’UTR区和3C区与EV-C96存在重组。 展开更多
关键词 急性出血性结膜炎 柯萨奇病毒A组24型变异株 基因进化分析 重组
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2023年中国5岁以下儿童肠道腺病毒分子特征分析
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作者 董梦洁 车如意 +8 位作者 熊光萍 王宏 李金松 孙晓曼 李利利 范佳欣 唐晓苹 张无敌 李丹地 《中国人兽共患病学报》 北大核心 2025年第9期887-892,共6页
目的深入探究我国5岁以下急性胃肠炎患儿中肠道人腺病毒(Human Adenovirus,HAdV)的分子特征与遗传进化规律,为疾病防控提供基础数据。方法收集2023年中国5岁以下因急性胃肠炎住院和门诊患儿的8074份粪便样本,采用实时荧光检测技术筛查HA... 目的深入探究我国5岁以下急性胃肠炎患儿中肠道人腺病毒(Human Adenovirus,HAdV)的分子特征与遗传进化规律,为疾病防控提供基础数据。方法收集2023年中国5岁以下因急性胃肠炎住院和门诊患儿的8074份粪便样本,采用实时荧光检测技术筛查HAdV,对阳性样本进行测序,并运用GenBank、BioAider和MEGA11.0等生物信息学软件进行基因分型、同源性及系统发育分析。结果8074份样本中HAdV阳性370例(4.58%),包括2种肠道HAdV基因型,HAdV-F41占比高达98.09%,其次为HAdV-F40(1.90%)。结论我国5岁以下急性胃肠炎患儿中HAdV-F41是最优势基因型,生物信息学分析显示我国HAdV主要流行谱系为谱系1和2,暂未受到欧洲地区的谱系3影响。对HAdV开展系统长期监测,有助于揭示HAdV在中国的多样性及其进化规律,为制定更有效的防控策略提供科学依据。 展开更多
关键词 人肠道腺病毒 基因型 急性胃肠炎 分子特征
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C3L敲除改变痘苗病毒天坛株生物学特性并降低小鼠体内致病性
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作者 韩一泽 翟玉倩 +7 位作者 吴长城 刘士元 任皎 赵莉 陈思研 田厚文 王文玲 谭文杰 《病毒学报》 北大核心 2025年第2期344-353,共10页
痘苗病毒C3L编码的补体控制蛋白(Vaccinia virus complement control protein,VCP)具有抑制补体系统激活等生物学功能,但其对病毒复制扩散及致病性的影响及具体机制尚不明确。本研究利用CRISPR/Cas9技术将痘苗病毒天坛株(Vaccinia virus... 痘苗病毒C3L编码的补体控制蛋白(Vaccinia virus complement control protein,VCP)具有抑制补体系统激活等生物学功能,但其对病毒复制扩散及致病性的影响及具体机制尚不明确。本研究利用CRISPR/Cas9技术将痘苗病毒天坛株(Vaccinia virus Tiantan strain,VTT)C3L缺失构建了重组病毒rVTT-mCherryΔC3L,并通过细胞和小鼠模型系统评估其生物学特性。结果显示:在HeLa、Vero和BHK-21细胞中,rVTT-mCherryΔC3L(MOI=0.01)的复制效率与VTT无显著差异,但感染48h后形成的免疫噬斑面积显著增大(分别为VTT的1.3倍、2.1倍和1.6倍,P<0.01);滴鼻感染BALB/c小鼠后,5×10^(4) PFU rVTT-mCherryΔC3L感染的小鼠,体重下降幅度减轻且恢复时间提前,5×10^(5) PFU感染时存活率显著高于VTT组(100%vs 16.7%)。研究结果表明,C3L缺失虽未显著影响病毒复制能力,但细胞间扩散能力增强,而小鼠体内毒力降低。该研究为痘苗病毒减毒疫苗设计及抗正痘病毒策略提供了重要理论依据。 展开更多
关键词 痘苗病毒天坛株 C3L 重组痘苗病毒 细胞间扩散 致病性
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2021-2022年中国12省5岁以下人星状病毒分子流行病学特征研究
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作者 董梦洁 熊光萍 +9 位作者 范佳欣 车如意 唐晓苹 张无敌 庞立丽 章青 孔翔羽 李希希 王宏 李丹地 《病毒学报》 北大核心 2025年第1期107-116,共10页
为了解2021-2022年我国5岁以下儿童中病毒性急性胃肠炎患者HAstV的分子特征及遗传进化规律。对1236份5岁以下急性胃肠炎住院或门诊患儿粪便样本采用实时荧光法筛查HAstV,在HAstV阳性样本中随机选择30例用RT-PCR法扩增并送公司测序,测序... 为了解2021-2022年我国5岁以下儿童中病毒性急性胃肠炎患者HAstV的分子特征及遗传进化规律。对1236份5岁以下急性胃肠炎住院或门诊患儿粪便样本采用实时荧光法筛查HAstV,在HAstV阳性样本中随机选择30例用RT-PCR法扩增并送公司测序,测序成功的HAstV序列利用生物信息学分析软件GenBank、BioAider、MEGA11.0、DNASTAR和BEAST软件对其进行基因分型、遗传进化及贝叶斯分析。2021-2022年我国HAstV阳性率为4.05%(50/1236),测序获得24条基因序列,鉴定结果显示,HAstV-1为主要基因型(66.67%),其次为HAstV-4(20.83%),HAstV-5(8.33%)和HAstV-2(4.16%)。HAstV-1平均进化率约为6.3×10^(-4)(HPD95%2.2×10^(-4)~1.1×10^(-3))替换/位点/年;HAstV-4平均进化率约为7.5×10^(-4)(HPD95%4.9×10^(-4)~1.0×10^(-3))替换/位点/年。本研究显示,2021-2022年我国HAstV基因型别多样,HAstV-1和HAstV-4占比较高且进化速率低。本研究了解我国HAstV的遗传变异情况,为今后病毒防控和疫苗的研发提供一定的基础数据。 展开更多
关键词 星状病毒 分子特征 基因型 平均进化率
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真核系统表达细菌鞭毛蛋白及其TLR5佐剂活性的体外验证
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作者 尹晓萱 李东蔚 +3 位作者 章青 王宏 孔翔羽 段招军 《病毒学报》 北大核心 2025年第6期1812-1820,共9页
在真核表达系统中构建并表达鼠伤寒沙门杆菌鞭毛蛋白(Salmonella typhimurium flagellin,FliC)和蜡样芽孢杆菌鞭毛蛋白(Bacillus cereus flagellin,BcFlg),评估其对Toll样受体5(Toll like receptor 5,TLR5)的刺激活性,为后续基于真核表... 在真核表达系统中构建并表达鼠伤寒沙门杆菌鞭毛蛋白(Salmonella typhimurium flagellin,FliC)和蜡样芽孢杆菌鞭毛蛋白(Bacillus cereus flagellin,BcFlg),评估其对Toll样受体5(Toll like receptor 5,TLR5)的刺激活性,为后续基于真核表达载体的鞭毛蛋白佐剂及疫苗的研究提供基础。在真核表达载体上分别插入FliC和BcFlg的编码序列,并进行去糖基化和添加信肽修饰,Western blot验证转染HEK293A细胞后分泌性表达的鞭毛蛋白。以人结肠腺癌细胞系Caco-2为模型,检测不同浓度鞭毛蛋白刺激细胞后白细胞介素-8(Interleukin-8,IL-8)分泌水平。在真核表达系统成功构建并表达FliC和BcFlg,两者均可显著诱导Caco-2细胞分泌IL-8,且呈现剂量依赖性,更重要的是,两种去糖基化鞭毛蛋白组的IL-8分泌量均优于糖基化组。基于真核表达载体构建和表达的细菌鞭毛蛋白在体外细胞模型中展现出较好的TLR5激动活性,且去糖基化修饰显著增强了活性,为进一步通过动物实验评价糖基化位点修饰与否的鞭毛蛋白作为疫苗内置佐剂的活性奠定了基础。 展开更多
关键词 鞭毛蛋白 疫苗佐剂 真核表达载体
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重组蛋白疫苗呼吸道黏膜佐剂的种类和研究进展
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作者 胡宏俏 江洁 +2 位作者 曹蕾 李海 张燕 《病毒学报》 北大核心 2025年第4期1269-1279,共11页
呼吸道黏膜佐剂能够增强重组蛋白疫苗在呼吸道黏膜的免疫应答,是近年来疫苗研究中的重要领域之一。黏膜佐剂主要包括聚合物类、细菌毒素类、模式识别受体激动剂类、细胞因子类和小分子多肽类等,它们通过不同作用机制提高重组蛋白疫苗的... 呼吸道黏膜佐剂能够增强重组蛋白疫苗在呼吸道黏膜的免疫应答,是近年来疫苗研究中的重要领域之一。黏膜佐剂主要包括聚合物类、细菌毒素类、模式识别受体激动剂类、细胞因子类和小分子多肽类等,它们通过不同作用机制提高重组蛋白疫苗的免疫原性。黏膜佐剂的作用机制主要包括促进抗原的摄取与呈递、激活先天免疫应答、诱导黏膜免疫部位的特异性免疫应答及调节免疫微环境等。不同作用机制的黏膜佐剂联合使用可以显著提升免疫效果。本研究对常见的呼吸道黏膜佐剂及其研究进展进行综述,为开发安全有效的呼吸道黏膜疫苗提供系统的理论基础和实践指导,以期促进呼吸道黏膜佐剂技术的进一步创新和应用。 展开更多
关键词 呼吸道病毒 黏膜佐剂 重组蛋白疫苗
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肠道病毒D68型VP1-N90K突变增强其在乳鼠感染致病力研究
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作者 段伟 李冀琛 +4 位作者 李慧洁 王蕊 梁钰材 孙强 张勇 《病毒学报》 北大核心 2025年第6期1710-1722,共13页
肠道病毒D68(Enterovirus D68,EV-D68)与儿童严重呼吸道感染和急性弛缓性脊髓炎(Acute flaccid myelitis,AFM)相关,但其导致瘫痪的分子机制尚未阐明。为深入探究这一机制,本研究以2018年从儿童患者体内分离的一株EV-D68(D2基因亚型)为... 肠道病毒D68(Enterovirus D68,EV-D68)与儿童严重呼吸道感染和急性弛缓性脊髓炎(Acute flaccid myelitis,AFM)相关,但其导致瘫痪的分子机制尚未阐明。为深入探究这一机制,本研究以2018年从儿童患者体内分离的一株EV-D68(D2基因亚型)为亲本株,通过构建ICR小鼠适应性株,成功获得了P0代至P9代的系列传代毒株。经全基因组测序分析,显示VP1-N90K是唯一位于病毒与受体结合区的位点,也是P2代与P4代毒株之间的唯一氨基酸差异位点。体内体外实验显示VP1-N90K突变可导致小鼠出现更强的致病性和细胞病变效应(Cytopathic effect,CPE)。为揭示VP1-N90K突变增强病毒致病性的分子基础,通过分子模拟技术分析发现VP1-N90K突变显著增强与宿主受体的结合亲和力。综上,本研究得出核心结论:VP1-N90K是增强EV-D68神经毒力的关键突变。该突变通过优化VP1与宿主受体的结合能力,显著促进病毒在宿主细胞表面的吸附、内化过程,以及在神经细胞内的复制效率,最终导致AFM瘫痪表型的发生。本研究结果为EV-D68致病机制的深入解析提供了关键实验依据,也为针对性抗病毒策略(如靶向VP1受体结合域的药物研发)的制定奠定了重要基础。 展开更多
关键词 肠道病毒D68(EV-D68) VP1-N90K 致病力 唾液酸(SA) MFSD6
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融合表达新型冠状病毒RBD与N蛋白的重组腺病毒构建及免疫原性研究
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作者 张鹏 毛彤瑶 +2 位作者 姜苏芮 李丹地 段招军 《中国人兽共患病学报》 北大核心 2025年第8期845-851,共7页
目的研究融合表达新型冠状病毒(Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)Omicron变异株受体结合域蛋白(RBD)与衣壳蛋白(N)的非复制型5型重组腺病毒的免疫原性,旨在为开发针对SARS-CoV-2 Omicron变异株的高效疫苗... 目的研究融合表达新型冠状病毒(Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)Omicron变异株受体结合域蛋白(RBD)与衣壳蛋白(N)的非复制型5型重组腺病毒的免疫原性,旨在为开发针对SARS-CoV-2 Omicron变异株的高效疫苗提供理论依据和实验基础。方法利用重叠PCR方法获得RBDgs3N片段,同源重组得到质粒pKAd5ESRBDgs3N,重组质粒转染HEK293细胞后收获和扩增重组病毒,氯化铯密度梯度离心法纯化病毒,有限稀释分析法测定病毒滴度,Western blot方法鉴定融合蛋白表达情况。将重组腺病毒肌注免疫BALB/c小鼠,利用间接ELISA方法和酶联免疫斑点技术检测小鼠特异性免疫应答。结果体外纯化获得滴度为1.168×10^(10)IU/mL的重组腺病毒AdV5-RBDgs3N。重组腺病毒体外感染HEK293细胞可成功表达RBDgs3N融合蛋白。单剂肌注免疫能显著诱导小鼠产生针对新冠野毒株(WT)和变异株(Delta,Omicron)RBD的IgG抗体,抗体滴度分别为10^(3.6778)、10^(3.8785)、10^(4.4549),针对保守的N蛋白产生的特异性抗体滴度为10^(4.9422)。RBD特异性细胞免疫的IFN-γ水平为1452 SFC/10^(6)个细胞。结论本研究构建的RBD和N基因融合的非复制型5型重组腺病毒能在BALB/c小鼠体内分别诱导高水平的针对RBD和N蛋白的特异性抗体及RBD特异的细胞免疫,为进一步评价该重组腺病毒作为潜在新冠疫苗提供了研究基础。 展开更多
关键词 SARS-CoV-2疫苗 腺病毒载体 细胞免疫 体液免疫
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肠道病毒病的防控现状、核心难题及创新方向
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作者 肖金波 张勇 《病毒学报》 北大核心 2025年第6期1691-1701,共11页
肠道病毒病是由肠道病毒(Enterovirus,EV)感染引起的一组疾病,从传统的脊髓灰质炎(Poliomyelitis)到现今常见的手足口病(Hand,foot,and mouth disease,HFMD),一直是全球公共卫生领域的重要问题。在肠道病毒病防控过程中,口服脊髓灰质炎... 肠道病毒病是由肠道病毒(Enterovirus,EV)感染引起的一组疾病,从传统的脊髓灰质炎(Poliomyelitis)到现今常见的手足口病(Hand,foot,and mouth disease,HFMD),一直是全球公共卫生领域的重要问题。在肠道病毒病防控过程中,口服脊髓灰质炎减毒活疫苗(Oral poliovirus vaccine,OPV)和注射脊髓灰质炎灭活疫苗(Inactive poliovirus vaccine,IPV)为全球根除脊髓灰质炎行动(Global polio eradication initiative,GPEI)提供了有力支持,同时,肠道病毒病疫情监测体系的建立也有效提升了应对能力。然而,肠道病毒病的疾病负担依然较重,其传播途径多样,且病毒基因组易变异,导致防控工作面临持续挑战。本文介绍肠道病毒病的基本特征与防控现状,强调加强防控的必要性,并提出相应策略,为疾病防控和公共卫生风险管理提供参考。 展开更多
关键词 肠道病毒 肠道病毒病 疫苗 监测体系 预防控制
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人类星状病毒分子流行病学及检测方法研究进展
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作者 董梦洁 李丹地 《病毒学报》 北大核心 2025年第4期1252-1260,共9页
人类星状病毒(Human astrovirus,HAstV)自1975年被发现,一直被视作引发儿童病毒性急性肠胃炎的重要病原体之一。目前已知的HAstV分为三个类别:经典HAstV(HAstV 1~8)、HAstV-MLB(MLB1~3)和HAstVVA(VA1~5),HAstV感染症状通常为自限性,但... 人类星状病毒(Human astrovirus,HAstV)自1975年被发现,一直被视作引发儿童病毒性急性肠胃炎的重要病原体之一。目前已知的HAstV分为三个类别:经典HAstV(HAstV 1~8)、HAstV-MLB(MLB1~3)和HAstVVA(VA1~5),HAstV感染症状通常为自限性,但在部分免疫功能低下患者中,可能引发严重感染。本文聚焦于HAstV的分子流行病学及检测方法的研究进展。 展开更多
关键词 星状病毒 监测方法 分子流行病学
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细菌鞭毛蛋白作为疫苗佐剂的研究进展
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作者 尹晓萱 李东蔚 段招军 《病毒学报》 北大核心 2025年第6期1953-1962,共10页
开发有效提高特异性免疫反应质量和强度的佐剂是目前疫苗研制的重要领域,更是解决部分现有疫苗免疫原性较差的关键手段。细菌鞭毛蛋白作为一种病原体相关分子模式(PAMPs),可以激活Toll样受体5(TLR5)和NOD样受体4(NLRC4),进而激发宿主的... 开发有效提高特异性免疫反应质量和强度的佐剂是目前疫苗研制的重要领域,更是解决部分现有疫苗免疫原性较差的关键手段。细菌鞭毛蛋白作为一种病原体相关分子模式(PAMPs),可以激活Toll样受体5(TLR5)和NOD样受体4(NLRC4),进而激发宿主的先天免疫和适应性免疫,发挥免疫佐剂效应。鞭毛蛋白作为一种新型的天然免疫佐剂,具备多种作用方式,既能单独与抗原蛋白协同作用,又能与抗原蛋白融合表达后共同作用,还可以锚定在病毒样颗粒表面发挥作用,其在预防和治疗性疫苗中均有较好的免疫增强作用,目前已有鞭毛蛋白作为佐剂的疫苗进入临床试验阶段。本文主要综述鞭毛蛋白作为疫苗佐剂的研究进展,旨在推动我国细菌鞭毛蛋白作为佐剂的疫苗研发。 展开更多
关键词 鞭毛蛋白 佐剂 疫苗
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