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TIF3转基因CHO和COS7细胞株的构建与鉴定 被引量：1
1
作者 雷毅雄 Pius Joseph +1 位作者 刘玉清 Tong-manOng 《四川大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期55-57,共3页
目的　构建 TIF3转基因 CHO和 COS7细胞株并对其构建的细胞株进行鉴定。方法　采用磷酸钙介导转染技术和 G4 18细胞筛选法 ,以 pc DNA3.1/ V5 - His- TOPO为表达载体 ,构建 TIF3转基因 CHO和 COS7细胞株 ;并应用 Western Blot技术对转... 目的　构建 TIF3转基因 CHO和 COS7细胞株并对其构建的细胞株进行鉴定。方法　采用磷酸钙介导转染技术和 G4 18细胞筛选法 ,以 pc DNA3.1/ V5 - His- TOPO为表达载体 ,构建 TIF3转基因 CHO和 COS7细胞株 ;并应用 Western Blot技术对转基因表达产物进行分析与鉴定。实验设计分无转染组、载体转染组和目的基因转染组。结果　在 7株转染的 CHO细胞株中 ,有 3株具有高效稳定表达的 TIF3编码蛋白质 ;在 4株转染的 COS7细胞株中有 2株同样具有高效稳定的 TIF3编码蛋白质表达。结论　本研究成功地构建了 3株 TIF3转基因 CHO细胞株和 2株 TIF3转基因 COS7细胞株 。 展开更多
关键词 TIF3cDNA 稳定转染 CHO细胞 COS7细胞 WESTERN BLOT
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TIF3镉应答基因的致癌性
2
作者 雷毅雄 Pius Joseph +1 位作者 陈家堃 Tong-man Ong 《环境与职业医学》 CAS 北大核心 2002年第4期216-218,共3页
[目的 ]前期研究发现 ,镉相关新基因TIF3 (基因文库添码 :AF2 710 72 )转染NIH3T3细胞可致其编码蛋白质表达升高而引起细胞转化。本研究的目的是对TIF3基因转化NIH3T3细胞的致癌能力和致瘤性进行鉴定。 [方法 ]软琼脂集落形成试验和裸... [目的 ]前期研究发现 ,镉相关新基因TIF3 (基因文库添码 :AF2 710 72 )转染NIH3T3细胞可致其编码蛋白质表达升高而引起细胞转化。本研究的目的是对TIF3基因转化NIH3T3细胞的致癌能力和致瘤性进行鉴定。 [方法 ]软琼脂集落形成试验和裸鼠成瘤试验。 [结果 ]所有 4株不同的TIF3转染的NIH3T3细胞在软琼脂培养中均显示锚非依赖性生长能力 ,形成明显的细胞集落。而非转化对照细胞在软琼脂上则无生长能力。转化细胞和对照细胞分别给裸鼠皮下注射 (每组 4只 ) ,4周后所有接种转化细胞的裸鼠全部长出大小不等的肿瘤 ,但非转化的对照细胞于第 5周后仍无 1只裸鼠出现肿瘤。提示TIF3转基因转化细胞属恶性转化细胞 ,具有一定的致癌能力和致瘤作用。 [结论 ]根据本研究结果及前期发现 。 展开更多
关键词 TIF3基因 镉 原癌基因 细胞转化 裸鼠 NIH3T3细胞 软琼脂集落形成
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