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HIV-1 gp41基因的分段克隆和表达 被引量：3
1
作者 赵茜 徐志凯 +7 位作者 阎岩 王海涛 吴兴安 张芳琳 刘勇 白文涛 罗雯 姜世勃 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期484-485,共2页
目的在大肠杆菌中表达HIV-1gp41N肽和C肽基因。方法用PCR方法从含HIV-1gp160基因的质粒中扩增HIV-1gp41N肽和C肽基因,重组入pGEX-4T-1载体,并亚克隆入pGEM7zf+中测定核苷酸序列,限制性酶切鉴定后进行原核表达。结果成功地扩增到HIV-1gp... 目的在大肠杆菌中表达HIV-1gp41N肽和C肽基因。方法用PCR方法从含HIV-1gp160基因的质粒中扩增HIV-1gp41N肽和C肽基因,重组入pGEX-4T-1载体,并亚克隆入pGEM7zf+中测定核苷酸序列,限制性酶切鉴定后进行原核表达。结果成功地扩增到HIV-1gp41N肽和C肽基因,酶切鉴定及测序结果与已知HIV-1亚型的gp41N肽区和C肽区基因序列一致,SDS-PAGE结果显示,表达出与预期分子量大小相同的蛋白。结论N肽和C肽基因的成功表达,为进一步研究其结构和功能奠定了基础。 展开更多
关键词 HIV-1 GP41 基因扩增 原核表达
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HIV-1囊膜糖蛋白gp41三聚体结构域基因的表达及其单克隆抗体的制备 被引量：1
2
作者 陈峥 徐志凯 +2 位作者 黄庆生 黎志东 姜世勃 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第7期487-489,共3页
目的 :表达HIV 1囊膜糖蛋白gp4 1三聚体结构域基因N5 1(L6 )C4 6融合蛋白 ,并制备针对该融合蛋白的单克隆抗体 (mAb) ,为筛选抗HIV多肽及分析gp4 1表位的免疫原提供抗体工具。方法 :在BL2 1(DE3)中诱导表达N5 1(L6 )C4 6融合蛋白 ,经mAb... 目的 :表达HIV 1囊膜糖蛋白gp4 1三聚体结构域基因N5 1(L6 )C4 6融合蛋白 ,并制备针对该融合蛋白的单克隆抗体 (mAb) ,为筛选抗HIV多肽及分析gp4 1表位的免疫原提供抗体工具。方法 :在BL2 1(DE3)中诱导表达N5 1(L6 )C4 6融合蛋白 ,经mAbNC 1鉴定后 ,采用小鼠腹股沟皮下NC膜免疫的方法免疫小鼠 ,并进行细胞融合、克隆化制备抗N5 1(L6 )C4 6mAb ,用ELISA法初步鉴定其特异性位点。结果 :获得了高表达的N5 1(L6 )C4 6融合蛋白 ,并能与识别特异性空间构象的mAbNC 1反应。用该融合蛋白免疫小鼠后 ,获得了 6株抗N5 1(L6 )C4 6的mAb ,这 6株mAb均特异识别兔抗N36 (L6 )C34抗体捕获的融合蛋白 ,但不与N36或C34多肽片段反应。结论 :得到高效表达融合蛋白N5 1(L6 )C4 6 ,并呈现gp4 1核心结构空间构象。用此蛋白免疫小鼠得到 6株特异结合gp4 展开更多
关键词 HIV-1 GP41 原核表达 单克隆抗体
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