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黑曲霉(Aspergillus niger)启动子的克隆及其序列特征 被引量:2
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作者 罗新梅 陈宏 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1999年第4期428-436,共9页
应用启动子筛选载体(Promoter-trapvector)pLX2A构建了1个黑曲霉(Asperyillusniger)基因组文库。这个载体含有1个潮霉素B(Hy)磷酸转移酶编码基因(hph),它能以启动子活性选择DNA片段。用这个基因组文库转化大肠杆菌,获得了8000... 应用启动子筛选载体(Promoter-trapvector)pLX2A构建了1个黑曲霉(Asperyillusniger)基因组文库。这个载体含有1个潮霉素B(Hy)磷酸转移酶编码基因(hph),它能以启动子活性选择DNA片段。用这个基因组文库转化大肠杆菌,获得了80000转化子菌落,其中94%含有插入片段。用这个基因库的质粒DNA转化黑曲霉,产生了53个抗潮霉素B(HyR)菌落。21个转化子的Southern杂交分析证明,hph基因已整合到黑曲霉基因组上。用同胞选择法(Sibselection)从此基因库中识别出1个有功能的启动子PX27,并测出了其2条DNA链的序列。它的序列与已知数据库中的序列没有明显的相似性。与已知黑曲霉启动子序列的比较分析得知,黑曲霉启动子含有共同序列CTTCTC,或许这个共同序列对黑曲霉启动子的结构是重要的。 展开更多
关键词 黑曲霉 启动子 筛选载体 克隆 序列特征
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