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限制热量摄入6个月对超重者寿命指标、代谢调节及氧化应激的影响——随机对照试验AuthorAffiliations:PenningtonBiomedicalResearchCenter.LouisianaStateUniversity.BatonRouge;andGarvan.InstituteforMedicalResearch.Dadinghurst,AustraIia(DrHeilbronn). 被引量:20
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作者 Leonie K. Heibronn Lilian de Jonge +13 位作者 Madlyn I. Frisard James P. DeLany D. Enette Larson-Meyer Jennifer Rood Tuong Nguyen Corby K. Martin Julia Volaufova Marlene M. Most Frank L. Greenway Steven R. Smith Walter A. Deutsch Donald A. Williamson Eric Ravussin 顾佳(译) 《美国医学会杂志(中文版)》 2006年第5期266-274,共9页
背景:长期限制热量摄入可延长啮齿类动物的寿命。但是,尚未有研究观测长期限制人体热量是否会影响其寿命及氧化应激指标,降低代谢率。 目的:在超重但不肥胖(体重指数为25—30)的人群中研究限制热量6个月伴/不伴运动对其产生的... 背景:长期限制热量摄入可延长啮齿类动物的寿命。但是,尚未有研究观测长期限制人体热量是否会影响其寿命及氧化应激指标,降低代谢率。 目的:在超重但不肥胖(体重指数为25—30)的人群中研究限制热量6个月伴/不伴运动对其产生的影响。 设计、地点及参试者:于2002年3月至2004年8月在位于路易斯安娜州首府巴顿鲁治的研究中心对48名不好动的健康人进行随机对照研究。 干预:参试者在6个月内随机分为4个组:对照组(饮食可维持体重);限制热量组(限制基线所需能量的25%);限制热量+运动组(限制12.5%的热量+运动增加12.5%的能耗);极低热量饮食组(每日摄入890keal,直至体重减少15%,随后采用维持体重的饮食)。 主要观测指标:机体组成;硫酸脱氢表雄酮(dehydroepiandrostemne sulfate,DHEAS)、葡萄糖及胰岛素水平;蛋白羰基化合物;DNA损伤;24小时能耗;核心体温。 结果:6个月时各组体重变化的均值(标准误)为:对照组-1.0%(1.1%);限制热量组-10.4%(0.9%);限制热量+运动组-10.0%(0.8%);极低热量饮食组-13.9%(0.7%)。6个月时,各干预组空腹血糖水平较基线明显降低(P均〈0.01),而DHEAS和葡萄糖水平没有改变。限制热量组及限制热量+运动组核心体温有所下降(P均〈0.05)。对机体组成进行校正后发现,对照组24小时静息能耗无变化,但限制热量组(-135kcal/d[42kcal/d])、限制热量+运动组(-117kcal/d[52kcal/d])和极低热量饮食组(-125kcal/d[35kcal/d])24小时静息能耗有所下降(P均〈0.008)。上述“代谢调节”(超出预计值的-6%)与对照组相比存在显著差异(P〈0.05)。6个月时,各组蛋白羰基化合物的浓度较基线时无变化,而各干预组DNA损伤有所减少(P〈0.005)。 结论:我们的研究结果显示,长期限制热量可降低人类寿命的2种指标(即空腹胰岛素水平和体温)。此外,我们的研究结果还支持下述理论,即限制热量能降低代谢率,且超过缩小代谢面积产生的相应效应。我们尚需开展远期研究来评价限制热量能否延缓人类衰老过程。 展开更多
关键词 随机对照试验 热量摄入 寿命指标 代谢调节 氧化应激 超重 低热量饮食 空腹血糖水平
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干扰素-γ诱导蛋白16调控天然免疫及病毒感染的研究进展
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作者 李向茸 董平安 +1 位作者 莫荣纤 冯若飞 《微生物学报》 北大核心 2026年第2期481-494,共14页
干扰素-γ诱导蛋白16(interferon gamma-inducible protein 16,IFI16)是含pyrin和造血表达、干扰素诱导特性和核定位(hematopoietic expression,interferon-inducible nature,and nuclear localization,HIN)结构域的蛋白质(pyrin and HI... 干扰素-γ诱导蛋白16(interferon gamma-inducible protein 16,IFI16)是含pyrin和造血表达、干扰素诱导特性和核定位(hematopoietic expression,interferon-inducible nature,and nuclear localization,HIN)结构域的蛋白质(pyrin and HIN domain-containing protein,PYHIN)家族的重要成员,其独特的分子结构使其能够识别细胞内的多种核酸分子。作为一种关键的免疫调节因子,IFI16可通过多种途径参与天然免疫信号转导,在宿主抗病毒防御中发挥重要作用。本文综述了IFI16的分子特征及其在天然免疫和病毒感染中的调控机制,为抗病毒感染的治疗靶点及药物开发提供理论依据。 展开更多
关键词 干扰素-γ诱导蛋白16 DNA传感器 天然免疫 病毒感染
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CHO细胞无血清悬浮培养技术生产重组蛋白的研究进展
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作者 杨妍梅 李殿玉 +1 位作者 谢晶莹 冯若飞 《药物生物技术》 2026年第1期141-148,共8页
中国仓鼠卵巢细胞是最广泛应用于生产重组蛋白的表达系统,无血清悬浮培养已成为并将长期成为CHO细胞培养的主导方式,近70%的重组治疗性蛋白是借助CHO悬浮细胞生产的。本文从CHO细胞系的演变、CHO细胞表达系统的优化、无血清悬浮CHO细胞... 中国仓鼠卵巢细胞是最广泛应用于生产重组蛋白的表达系统,无血清悬浮培养已成为并将长期成为CHO细胞培养的主导方式,近70%的重组治疗性蛋白是借助CHO悬浮细胞生产的。本文从CHO细胞系的演变、CHO细胞表达系统的优化、无血清悬浮CHO细胞的建立和无血清悬浮培养技术的生产应用等方面进行阐述,以期为重组蛋白在CHO细胞中生产提供一定的研究基础。 展开更多
关键词 CHO细胞 无血清悬浮培养 优化表达载体 重组治疗性蛋白 亚单位疫苗 单克隆抗体
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甘肃源牛病毒性腹泻病毒的分离鉴定及全基因序列分析
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作者 任晓婷 马晓霞 +4 位作者 安乐乐 王春林 刘泽煜 张丽娟 刘俊林 《中国畜牧兽医》 北大核心 2026年第3期1500-1511,共12页
【目的】了解甘肃地区牛群中牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)的流行株情况及其分子特征,为该地区BVDV防控提供参考。【方法】对前期检测为BVDV阳性的血清样本进行病毒分离,并利用靶向BVDV NS3蛋白的单克隆抗体对分... 【目的】了解甘肃地区牛群中牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)的流行株情况及其分子特征,为该地区BVDV防控提供参考。【方法】对前期检测为BVDV阳性的血清样本进行病毒分离,并利用靶向BVDV NS3蛋白的单克隆抗体对分离毒株进行间接免疫荧光试验(IFA)鉴定。根据分离株全基因组测序结果,对其全基因组、5´-UTR、Npro及E2基因序列分别进行系统发育分析和相似性比对,对分离毒株关键蛋白Npro和E2进行生物信息学分析,并进一步了解分离毒株基因组同义密码子使用模式。【结果】BVDV阳性血清样本接种MDBK细胞盲传5代后未观察到典型的细胞病变情况,分离获得1株非细胞病变型(NCP)BVDV毒株,命名为BVDV 24GS-19,提交NCBI(登录号:PV806860.1)。IFA结果显示,分离株接种细胞后可观察到特异性红色荧光。相似性比对显示,分离毒株与BVDV CH0513株(登录号:MH901135.1)相似性达97.02%;遗传进化分析表明该毒株为BVDV-1b型。生物信息学分析显示,分离株Npro和E2蛋白不稳定指数分别为49.11和57.61,且存在氨基酸突变位点和磷酸化位点;E2蛋白存在N-糖基化和C-甘露糖基化位点;E2蛋白中预测到2个抗原表位(第250—269、687—706位氨基酸处)。同义密码子使用模式分析显示,该毒株对脯氨酸、精氨酸、丙氨酸和苏氨酸的同义密码子使用存在偏好性。【结论】本研究分离获得1株NCP型BVDV流行毒株,经基因组和遗传演化分析鉴定为BVDV-1b亚型,其与分离株BVDV CH0513相似性较高。本试验结果为甘肃地区牛病毒性腹泻的防控和疫苗研发提供了数据支撑。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 分离鉴定 全基因序列 同义密码子
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小干扰RNA在抗病毒中的作用机制及应用现状
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作者 张雅欣 侯正阳 +2 位作者 谢晶莹 徐继英 冯若飞 《病毒学报》 北大核心 2026年第1期337-346,共10页
近年来,基于小干扰RNA(Small interfering RNA,siRNA)的抗病毒疗法得到迅速发展,研究人员可以根据不同需要对siRNA进行设计修饰、靶向递送等。siRNA具有特异性沉默作用,因此其可能成为未来治疗病毒感染和病毒相关疾病的重要工具之一。si... 近年来,基于小干扰RNA(Small interfering RNA,siRNA)的抗病毒疗法得到迅速发展,研究人员可以根据不同需要对siRNA进行设计修饰、靶向递送等。siRNA具有特异性沉默作用,因此其可能成为未来治疗病毒感染和病毒相关疾病的重要工具之一。siRNA的作用机制是通过与靶mRNA结合,诱导靶基因的降解或抑制其翻译,从而在转录后水平实现对目的基因的沉默。然而裸siRNA递送具有膜不透性,易被核酸酶降解,引起免疫反应等特点,因此需要对siRNA进行适当的设计修饰,并利用合适的递送载体来有效地将其转运至靶细胞中。本文综述了siRNA的作用机制、设计修饰、递送方式和体内外应用等,以期推动siRNA抗病毒应用研究。 展开更多
关键词 SIRNA设计 siRNA递送 抗病毒
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温度与时间对BVDV N^(pro)蛋白裂解活性的影响
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作者 任晓婷 安乐乐 +2 位作者 王春林 刘泽煜 马晓霞 《江苏农业学报》 北大核心 2026年第3期598-605,共8页
为探究牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)N^(pro)蛋白酶的自催化裂解活性及其关键调控因素,本研究通过构建含N^(pro)自切割位点的重组融合表达载体pET-28a-N^(pro)-C5-EGFP,采用大肠杆菌BL21(DE3)为工程菌,在不同温度... 为探究牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)N^(pro)蛋白酶的自催化裂解活性及其关键调控因素,本研究通过构建含N^(pro)自切割位点的重组融合表达载体pET-28a-N^(pro)-C5-EGFP,采用大肠杆菌BL21(DE3)为工程菌,在不同温度(16℃、25℃、30℃、37℃)及不同诱导时间(2 h、4 h、6 h、8 h、10 h)条件下进行重组蛋白诱导表达,并利用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)与蛋白质印迹法(Western blot)检测重组蛋白表达情况。结果表明,相对分子量4.54×10^(4)的N^(pro)-C5-EGFP融合蛋白在诱导条件下可自主裂解产生相对分子量为1.85×10^(4)的N^(pro)蛋白,且有完整的自催化活性。裂解率随诱导时间的延长呈显著线性升高趋势;随着温度的增加,裂解率呈先升高后降低的趋势,最适裂解温度为30℃。N^(pro)蛋白含有潜在的活性中心(Cys69-His49催化二元体),具备执行生物功能的空间构象。本研究结果不仅揭示了BVDV N^(pro)蛋白在原核系统表达后仍具有明显的自催化裂解活性,而且揭示了酶学行为受温度和诱导时间的协同调控。本研究结果为进一步研究BVDV N^(pro)的自裂解特性及后续作为抗病毒药物筛选靶点提供了依据。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 N^(pro) 原核系统 自裂解
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鸽源病毒多重TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用
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作者 安乐乐 宗保君 +2 位作者 任晓婷 张业涛 赵永清 《微生物学通报》 北大核心 2026年第1期499-518,共20页
【背景】鸽腺病毒(pigeon adenovirus,PiAdV)、鸽圆环病毒(pigeon circovirus,PiCV)与鸽疱疹病毒(pigeon herpesvirus,PiHV)是严重危害鸽群健康的主要病原体,常导致混合感染,给临床鉴别诊断带来困难。【目的】建立一种可用于同步检测Pi... 【背景】鸽腺病毒(pigeon adenovirus,PiAdV)、鸽圆环病毒(pigeon circovirus,PiCV)与鸽疱疹病毒(pigeon herpesvirus,PiHV)是严重危害鸽群健康的主要病原体,常导致混合感染,给临床鉴别诊断带来困难。【目的】建立一种可用于同步检测PiAdV、PiCV和PiHV的三重TaqMan荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)方法。【方法】通过查找GenBank发布的PiAdV、PiCV和PiHV基因组并加以比对获取其基因保守区域,在保守区域设计引物、探针和制备质粒标准品pMD19-T-PiAdVI、pMD19-T-PiAdVII、pMD19-T-PiCV及pMD19-T-PiHV;经反应体系优化,标准曲线绘制,评价方法的特异性、敏感性和重复性,建立可同步检测PiAdV、PiCV和PiHV的三重TaqMan RT-qPCR方法;使用该方法进行临床样本检测以评估其临床适用性。【结果】该PiAdV、PiCV和PiHV的三重TaqMan RT-qPCR方法标准曲线为y=–3.396x+43.210(R2=0.9983)、y=–3.540x+40.540(R2=0.9994)和y=–3.280x+38.470(R2=0.9984),线性关系良好;与鸽痘病毒、鸽轮状病毒等鸽子其他常见病原及禽腺病毒4型无交叉反应,特异性强;在敏感性方面,该方法的最低检出限分别为10 copies/μL、10 copies/μL和1 copy/μL,敏感度是常规PCR方法的100-1000倍,敏感性高;批内、批间重复性试验的变异系数均小于2.0%,重复性和稳定性良好。使用建立的PiAdV、PiCV和PiHV的三重TaqMan RT-qPCR检测方法对152份鸽子临床样本进行检测,RT-qPCR阳性检出率(PiAdV55.92%、PiCV 51.32%、PiHV 40.13%)略高于常规PCR方法,具有良好的临床适用性。【结论】本研究建立的PiAdV、PiCV和PiHV的三重TaqMan RT-qPCR检测方法标准曲线的线性关系良好、特异性强、敏感性高、重复性良好,可快速、高效、特异检测临床样本中的PiAdV、PiCV和PiHV,为PiAdV、PiCV和PiHV早期诊断、协同致病机制研究和流行病学调查提供一种高效的技术手段。 展开更多
关键词 鸽腺病毒 鸽圆环病毒 鸽疱疹病毒 多重TaqMan RT-qPCR 早期诊断 流行病学调查
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钠-葡萄糖共转运蛋白抑制剂在2型糖尿病治疗中的作用机制研究进展
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作者 叶卉 胡珊 +2 位作者 西伟刚 罗映生 苏经迁 《福建师范大学学报(自然科学版)》 北大核心 2026年第2期96-103,共8页
钠-葡萄糖共转运蛋白(sodium-glucose cotransporter,SGLT)抑制剂(主要包括SGLT1和SGLT2两个亚型)是一类基于非胰岛素依赖机制发挥降糖作用的2型糖尿病治疗药物,兼具减重及明确的心肾保护作用,临床价值显著。系统综述SGLT抑制剂的降糖... 钠-葡萄糖共转运蛋白(sodium-glucose cotransporter,SGLT)抑制剂(主要包括SGLT1和SGLT2两个亚型)是一类基于非胰岛素依赖机制发挥降糖作用的2型糖尿病治疗药物,兼具减重及明确的心肾保护作用,临床价值显著。系统综述SGLT抑制剂的降糖机制、心肾获益及潜在风险,并展望其未来研究方向与应用前景,旨在为该靶点的深度开发和个体化治疗策略的优化提供理论依据。 展开更多
关键词 SGLT抑制剂 2型糖尿病 SGLT1/2双抑制剂 口服降糖药 非胰岛素依赖机制
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IFN-γ在病毒感染中的作用及机制研究进展
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作者 高婉宁 王炎 +4 位作者 邵帅 范益阳 纪晓岚 张德荣 柏家林 《中国免疫学杂志》 北大核心 2026年第1期219-225,共7页
Ⅱ型干扰素(IFN-Ⅱ)由活化的T细胞、NK细胞、巨噬细胞、树突状细胞及B细胞等多种细胞分泌产生,通过经典JAK-STAT信号通路或与MAPK通路、NF-κB通路、PI3K/AKT通路等非经典信号通路协同或平行作用,诱导干扰素下游基因表达,实现抗病毒感... Ⅱ型干扰素(IFN-Ⅱ)由活化的T细胞、NK细胞、巨噬细胞、树突状细胞及B细胞等多种细胞分泌产生,通过经典JAK-STAT信号通路或与MAPK通路、NF-κB通路、PI3K/AKT通路等非经典信号通路协同或平行作用,诱导干扰素下游基因表达,实现抗病毒感染及调节固有或适应性免疫应答的作用。本文综述IFN-γ受体、IFN-γ介导的经典信号通路和非经典信号通路,以及IFN-γ在4种RNA病毒与3种DNA病毒中抗病毒机制的研究进展。 展开更多
关键词 IFN-Γ IFN-γ受体 信号通路 抗病毒机制
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牛病毒性腹泻病毒流行病学及防治研究进展
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作者 刘倩芸 安乐乐 +3 位作者 蓝秋菊 张胜卫 张丽娟 刘俊林 《动物医学进展》 北大核心 2026年第2期108-113,共6页
牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)广泛流行于全球牛群,是引起牛病毒性腹泻的重要病原体,对养牛业造成了巨大的经济损失。由于BVDV的基因组具有高度变异的遗传特性,随着其不断的流行与变异,出现了多种不同的基因亚型... 牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)广泛流行于全球牛群,是引起牛病毒性腹泻的重要病原体,对养牛业造成了巨大的经济损失。由于BVDV的基因组具有高度变异的遗传特性,随着其不断的流行与变异,出现了多种不同的基因亚型,且不同的基因亚型对易感动物的致病力、临床症状、免疫反应及传播途径等都具有多变性,新出现的基因亚型为BVDV的研究与防治带来了巨大的挑战。因此,研究BVDV全基因型的快捷检测方法,提高BVDV疫苗的高效广谱性和及时控制BVDV的流行具有重要意义。本文从BVDV的检测方法、BVDV在国内的流行情况以及BVDV疫苗等方面,对BVDV近年的流行及防控研究进展进行综述,为BVDV的防治手段提供参考。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 流行情况 检测方法 疫苗
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低氧诱导CD146影响凋亡相关因子在牦牛和黄牛小肠的表达差异分析
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作者 王军 张叶琼 +5 位作者 胡嘉琦 徐铭蔚 钟妍 蓝雯琳 谈笑 杨琨 《核农学报》 北大核心 2026年第4期712-723,共12页
为探究不同氧浓度条件下诱导CD146影响凋亡相关因子,及其在不同肠道组织中表达位点的差异,选取牦牛和黄牛的小肠组织(十二指肠、空肠和回肠)为研究对象,分析黑色素瘤细胞粘附因子(CD146)、低氧诱导因子1α(HIF-1α)、细胞凋亡相关因子... 为探究不同氧浓度条件下诱导CD146影响凋亡相关因子,及其在不同肠道组织中表达位点的差异,选取牦牛和黄牛的小肠组织(十二指肠、空肠和回肠)为研究对象,分析黑色素瘤细胞粘附因子(CD146)、低氧诱导因子1α(HIF-1α)、细胞凋亡相关因子淋巴细胞瘤2(Bcl-2)、Bcl-2家族相关蛋白Bax(Bax)、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶3(Caspase-3)和半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶9(Caspase-9)在牦牛和黄牛肠道的表达差异,并进行苏木精-伊红染色(H&E)、过碘酸雪夫染色(PAS)以及低氧相关因子免疫组化分析。H&E结果显示,肠道消化指标(V/C)值差异主要在十二指肠,且牦牛十二指肠V/C显著高于黄牛;PAS染色表达在纹状缘和中央乳糜管,并在潘氏细胞和杯状细胞强阳性表达,此外PAS在牦牛十二指肠阳性表达最高;免疫组化显示,CD146主要在肠黏膜层的细胞间质与十二指肠腺黏液细胞胞质强阳性表达,低氧相关因子还表达于杯状细胞、潘氏细胞、纹状缘等;组织表达差异集中于十二指肠,且存在物种差异。本研究结果可为后续探究CD146与低氧相关因子在牦牛和黄牛的肠道表达分布规律提供基础资料,并为探究牦牛在高原低氧适应机制提供参考依据。 展开更多
关键词 CD146 凋亡因子 小肠 表达差异性
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急性ST段抬高型心肌梗死患者发病至首次医疗接触时间和门-球时间延迟的影响因素
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作者 侯雅新 林飞 赵国安 《新乡医学院学报》 2026年第1期31-36,共6页
目的探讨急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者发病至首次医疗接触(S2FMC)时间和门-球(D2B)时间延迟的影响因素。方法选择2016年12月至2019年12月新乡医学院第一附属医院胸痛中心确诊为STEMI并行直接经皮冠状动脉介入治疗患者515例为研究... 目的探讨急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者发病至首次医疗接触(S2FMC)时间和门-球(D2B)时间延迟的影响因素。方法选择2016年12月至2019年12月新乡医学院第一附属医院胸痛中心确诊为STEMI并行直接经皮冠状动脉介入治疗患者515例为研究对象。收集患者临床资料,根据S2FMC和D2B时间将患者分为S2FMC时间≤180 min组(n=330)、S2FMC时间>180 min组(n=185)和D2B时间≤90 min组(n=415)、D2B时间>90 min组(n=100)。采用单因素和多因素二元logistic回归分析STEMI患者S2FMC和D2B时间延迟的影响因素。结果S2FMC时间延迟的影响因素单因素分析结果显示,S2FMC时间≤180 min组与S2FMC时间>180 min组患者的年龄、性别、吸烟史、睡眠状况、发病症状和发病时间比较差异有统计学意义(P<0.05);多因素二元logistic回归分析结果显示,女性、间断性胸痛/胸闷是S2FMC时间延迟的独立影响因素(P<0.05),同时发病时间在16:00-19:59时S2FMC时间不易延迟(P<0.05)。D2B时间延迟的影响因素单因素分析结果显示,D2B时间≤90 min组与D2B时间>90 min组患者是否饮酒及入院方式、心电图确诊时间、是否绕行急诊、S2FMC时间、导管室激活时间比较差异有统计学意义(P<0.05);多因素二元logistic回归分析结果显示,外院转入、导管室激活时间是D2B时间延迟的独立影响因素(P<0.05)。结论女性、间断性胸痛/胸闷对急性STEMI患者S2FMC时间延迟具有显著影响,发病时间在16:00-19:59时S2FMC时间不易延迟;外院转入和导管室激活时间可显著影响D2B时间。 展开更多
关键词 发病至首次医疗接触时间 门-球时间 急性ST段抬高型心肌梗死
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牛病毒性腹泻病毒非结构蛋白N^(pro)原核表达及多克隆抗体制备
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作者 张书斌 张艺馨 +3 位作者 李英奇 洪菊霜 Uyangaa Temuujin 周建华 《江西农业大学学报》 北大核心 2026年第1期186-195,共10页
【目的】牛病毒性腹泻病毒(BVDV)可严重损害牛群的繁殖性能、呼吸系统、消化功能及泌乳能力。该病毒编码的非结构蛋白N^(pro)具有高度保守性及蛋白酶水解活性,在介导免疫逃逸中发挥关键作用。本研究旨在原核表达BVDV非结构蛋白N^(pro)... 【目的】牛病毒性腹泻病毒(BVDV)可严重损害牛群的繁殖性能、呼吸系统、消化功能及泌乳能力。该病毒编码的非结构蛋白N^(pro)具有高度保守性及蛋白酶水解活性,在介导免疫逃逸中发挥关键作用。本研究旨在原核表达BVDV非结构蛋白N^(pro)及多克隆抗体制备,为深入研究N^(pro)蛋白功能提供物质基础。【方法】通过NCBI网站查找BVDV N^(pro)基因序列,利用相关生物信息学在线软件分析N^(pro)蛋白的理化性质,包括分子量、等电点(pI)、不稳定指数、脂肪族指数及平均亲水性等参数。设计同源重组引物并扩增目的基因N^(pro),克隆至pET-28a(+)载体上,构建重组质粒pET-28a(+)-N^(pro)。将测序正确的pET-28a(+)-N^(pro)质粒转化至E. coli BL21(DE3)表达感受态细胞,经诱导表达、镍柱纯化后的N^(pro)蛋白免疫小鼠进行多克隆抗体制备。采用Western blot鉴定多克隆抗体的反应原性。【结果】(1)信息学分析结果表明,N^(pro)蛋白有504个氨基酸,为胞外亲水性蛋白;N^(pro)蛋白无信号肽及跨膜结构域,二级结构主要由β-折叠和无规卷曲构成。(2)成功构建原核表达质粒pET-28a(+)-N^(pro),经双酶切鉴定及基因测序验证正确后,在大肠杆菌中诱导表达得到分子量约为18 ku重组蛋白N^(pro)。(3)将纯化获取的重组蛋白N^(pro)免疫小鼠制备多克隆抗体,经酶联免疫吸附试验(ELISA)和蛋白质印迹法(Western blot)检测显示,所得到的多克隆抗体效价达1∶409 600,具有良好的特异性、反应原性与免疫原性。【结论】本研究成功在大肠杆菌中高效表达并纯化出具有良好免疫原性的BVDV N^(pro)重组蛋白,所制备的高效价特异性多克隆抗体为深入研究该蛋白的生物学功能提供了有效工具。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 N^(pro)蛋白 原核表达 多克隆抗体
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Etiology and therapeutics for cognitive dysfunction in multiple system atrophy
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作者 Yasuo Miki Koichi Wakabayashi 《Neural Regeneration Research》 2026年第8期3549-3550,共2页
Neurodegenerative disease is characterized by the presence of inclusion bodies containing abnormal toxic proteins in the central nervous system.Physiologicalα-synuclein exists in the form of a monomer or dimer at the... Neurodegenerative disease is characterized by the presence of inclusion bodies containing abnormal toxic proteins in the central nervous system.Physiologicalα-synuclein exists in the form of a monomer or dimer at the presynaptic nerve terminal.It serves as a key molecule to modulate endocytosis and exocytosis.However,under pathological conditions,α-synuclein adopts different conformations,being converted into toxic oligomers.The molecular weight ofα-synuclein oligomers ranges from 25 to 180 kDa,and they do not form filamentous aggregates ofα-synuclein.Subsequently,α-synuclein oligomers change to aggregates,including protofibrils and fibrils(Miki et al.,2022).This process has been implicated in the pathogenesis of neurodegenerative diseases collectively termed synucleinopathies,which include Parkinson’s disease,dementia with Lewy bodies,and multiple system atrophy(MSA). 展开更多
关键词 toxic oligomersthe neurodegenerative disease SYNUCLEIN modulate endocytosis exocytosishoweverunder central nervous systemphysiological synuclein OLIGOMERS inclusion bodies cognitive dysfunction
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牙颈部外吸收的研究进展
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作者 陈然 边梦瑶 +3 位作者 赵瑾 钱琳娜 施莹 吴志芳 《浙江大学学报(医学版)》 北大核心 2026年第2期173-184,共12页
牙颈部外吸收(ECR)是一种起始于牙根颈部的进行性、破骨细胞介导的牙体硬组织破坏性疾病,具有隐匿性强、早期诊断困难的特点,可导致牙体组织严重破坏甚至牙齿丧失。ECR的发病机制可能与局部刺激、特定药物使用及部分系统性疾病等因素有... 牙颈部外吸收(ECR)是一种起始于牙根颈部的进行性、破骨细胞介导的牙体硬组织破坏性疾病,具有隐匿性强、早期诊断困难的特点,可导致牙体组织严重破坏甚至牙齿丧失。ECR的发病机制可能与局部刺激、特定药物使用及部分系统性疾病等因素有关,目前尚未完全阐明。锥形线束计算机体层扫描是现阶段实现病变三维评估和精确分期的关键手段。治疗须以三维评估为基础,依据病变范围、深度及牙髓受累情况制订阶梯化策略:对于早期及局限性病变,可采用生物活性材料进行微创修复;对于累及牙髓或范围广泛的病变,须综合考虑根管治疗、意向性再植术或联合引导组织再生技术;对于无法保留的患牙,则应选择以最终修复为导向的拔除或位点保存方案。本文系统阐述了ECR的发病相关因素、病理机制、临床表现及基于影像学的分类体系、诊断、治疗等进展,以期为该疾病的临床精准诊疗和决策提供理论依据。 展开更多
关键词 牙颈部外吸收 发病机制 临床表现 分类 治疗 锥形线束计算机体层扫描 综述
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Advances in epigenetic biomarker research in colorectal cancer 被引量:7
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作者 Xi Wang Ye-Ye Kuang Xiao-Tong Hu 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS 2014年第15期4276-4287,共12页
Colorectal cancer(CRC)causes approximately 600000deaths annually and is the third leading cause of cancer mortality worldwide.Despite significant advancements in treatment options,CRC patient survival is still poor ow... Colorectal cancer(CRC)causes approximately 600000deaths annually and is the third leading cause of cancer mortality worldwide.Despite significant advancements in treatment options,CRC patient survival is still poor owing to a lack of effective tools for early diagnosis and a limited capacity for optimal therapeutic decision making.Since there exists a need to find new biomarkers to improve diagnosis of CRC,the research on epigenetic biomarkers for molecular diagnostics encourages the translation of this field from the bench to clinical practice.Epigenetic alterations are thought to hold great promise as tumor biomarkers.In this review,we will primarily focus on recent advances in the study of epigenetic biomarkers for colorectal cancer and discuss epigenetic biomarkers,including DNA methylation,microRNA expression and histone modification,in cancer tissue,stool,plasma,serum,cell lines and xenografts.These studies have improved the chances that epigenetic biomarkers will find a place in the clinical practices of screening,early diagnosis,prognosis,therapy choice and recurrence surveillance for CRC patients.However,these studies have typically been small in size,and evaluation at a larger scale of well-controlled randomized clinical trials is the next step that is necessary to increase the quality of epigenetic biomarkers and ensure their widespread clinical use. 展开更多
关键词 Colorectal cancer Epigenetic biomarker DNA methylation MicroRNA biomarker Histone modification
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A review: Systematic research approach on toxicity model of liver and kidney in laboratory animals 被引量:7
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作者 Abbasali Abbasnezhad Fatemeh Salami Reza Mohebbati 《Animal Models and Experimental Medicine》 CAS CSCD 2022年第5期436-444,共9页
Therapeutic experiments are commonly performed on laboratory animals to inves-tigate the possible mechanism(s)of action of toxic agents as well as drugs or sub-stances under consideration.The use of toxins in laborato... Therapeutic experiments are commonly performed on laboratory animals to inves-tigate the possible mechanism(s)of action of toxic agents as well as drugs or sub-stances under consideration.The use of toxins in laboratory animal models,including rats,is intended to cause toxicity.This study aimed to investigate different models of hepatotoxicity and nephrotoxicity in laboratory animals to help researchers advance their research goals.The current narrative review used databases such as Medline,Web of Science,Scopus,and Embase and appropriate keywords until June 2021.Nephrotoxicity and hepatotoxicity models derived from some toxic agents such as cisplatin,acetaminophen,doxorubicin,some anticancer drugs,and other materials through various signaling pathways are investigated.To understand the models of renal or hepatotoxicity in laboratory animals,we have provided a list of toxic agents and their toxicity procedures in this review. 展开更多
关键词 ANIMAL drug toxicity drug-induced abnormality liver dysfunction renal injury
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Research progress in electrospinning engineering for all-solid-state electrolytes of lithium metal batteries 被引量:7
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作者 Manxi Wang Yaling Wu +14 位作者 Min Qiu Xuan Li Chuanping Li Ruiling Li Jiabo He Ganggang Lin Qingrong Qian Zhenhai Wen Xiaoyan Li Ziqiang Wang Qi Chen Qinghua Chen Jinhyuk Lee Yiu-Wing Mai Yuming Chen 《Journal of Energy Chemistry》 SCIE EI CAS CSCD 2021年第10期253-268,I0008,共17页
Owing to safety issue and low energy density of liquid lithium-ion batteries(LIBs),all-solid-state lithium metal batteries(ASLMBs)with unique all-solid-state electrolytes(SEs)have attracted wide attentions.This arises... Owing to safety issue and low energy density of liquid lithium-ion batteries(LIBs),all-solid-state lithium metal batteries(ASLMBs)with unique all-solid-state electrolytes(SEs)have attracted wide attentions.This arises mainly from the advantages of the SEs in the suppression of lithium dendrite growth,long cycle life,and broad working temperature range,showing huge potential applications in electronic devices,electric vehicles,smart grids,and biomedical devices.However,SEs suffer from low lithiumion conductivity and low mechanical integrity,slowing down the development of practical ASLMBs.Nanostructure engineering is of great efficiency in tuning the structure and composition of the SEs with improved lithium-ion conductivity and mechanical integrity.Among various available technologies for nanostructure engineering,electrospinning is a promising technique because of its simple operation,cost-effectiveness,and efficient integration with different components.In this review,we will first give a simple description of the electrospinning process.Then,the use of electrospinning technique in the synthesis of various SEs is summarized,for example,organic nanofibrous matrix,organic/inorganic nanofibrous matrix,and inorganic nanofibrous matrix combined with other components.The current development of the advanced architectures of SEs through electrospinning technology is also presented to provide references and ideas for designing high-performance ASLMBs.Finally,an outlook and further challenges in the preparation of advanced SEs for ASLMBs through electrospinning engineering are given. 展开更多
关键词 Solid-state composite electrolyte Lithium metal batteries Electrospinning engineering Organic/inorganic matrices
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不同温度和剪切速率下酥油的流变特性分析研究
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作者 刘红娜 岑怿萌 +3 位作者 闫立奇 张哲川 丁波 杨具田 《中国粮油学报》 北大核心 2025年第8期148-154,共7页
酥油在高原地区被作为抵御高寒高海拔重要的能量来源,但酥油的品质不稳定且利用率不高,从而限制了其在品质改良、新产品开发以及对生物活性成分提取的应用。研究不同温度和剪切速率下不同品种酥油的流变特性,选取来自于甘肃省甘南牧区... 酥油在高原地区被作为抵御高寒高海拔重要的能量来源,但酥油的品质不稳定且利用率不高,从而限制了其在品质改良、新产品开发以及对生物活性成分提取的应用。研究不同温度和剪切速率下不同品种酥油的流变特性,选取来自于甘肃省甘南牧区的牦牛、犏牛、奶牛酥油样品,分别在5、25、35℃时对酥油样品的稳态和动态剪切流变性进行测定。通过改变剪切速率从0.01 s^(-1)到100.00 s^(-1)来评估酥油的稳态剪切性能,改变频率扫描0.01~100.00 rad/s评估酥油的动态剪切性能。结果表明:在所选定的3个温度下,随剪切速率的增加酥油样品都表现出非牛顿剪切稀化的行为。随剪切速率和温度的增加所有酥油样品的剪切黏度都呈下降趋势,表明酥油的剪切黏度对温度具有高度依赖性。在物理状态方面,酥油质地柔软,随着温度的升高其储存模量(弹性)G'和损耗模量(黏性)G"都呈下降趋势。此外,在35℃时,牦牛酥油的整体稳定性比犏牛酥油和奶牛酥油更优良。研究表明酥油具有非牛顿流体性质,其流变特性对温度有高度的依赖性。 展开更多
关键词 酥油 流变特性 温度 剪切速率 储能模量 损耗模量
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新型光敏剂PEG-MTPABZ-PyC在光动力疗法治疗胃癌中的杀伤效果
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作者 陈玲娟 王琪 +9 位作者 王璐 沈翌飞 王海斌 王恒鑫 苏学杰 雷美煦 陈显侠 艾承锦 李一凡 周雅丽 《中南大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第7期1137-1144,共8页
目的:光动力疗法在实体瘤中的应用近来受到关注,光敏剂的效率是影响疗效的重要因素。本研究旨在探讨新型光敏剂PEG-MTPABZ-PyC应用光动力疗法杀伤胃癌细胞的效果。方法:应用PEG-MTPABZ-PyC干预胃癌细胞MKN45,利用高内涵活细胞成像系统... 目的:光动力疗法在实体瘤中的应用近来受到关注,光敏剂的效率是影响疗效的重要因素。本研究旨在探讨新型光敏剂PEG-MTPABZ-PyC应用光动力疗法杀伤胃癌细胞的效果。方法:应用PEG-MTPABZ-PyC干预胃癌细胞MKN45,利用高内涵活细胞成像系统检测光敏剂进入细胞的时间和在细胞中的定位;利用细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)法及流式细胞术检测应用光动力疗法后光敏剂对胃癌细胞的杀伤效果,并利用CCK-8法验证单纯PEG-MTPABZ-PyC光敏剂对细胞的毒性作用;采用2’-7’-二氯二氢荧光素二乙酸酯(2’-7’-dichlorodihydrofluo-rescein diacetate,DCFH-DA)法检测干预后细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)的产生情况。结果:单纯的PEG-MTPABZ-PyC光敏剂对细胞无杀伤作用,具有高效的细胞相容性,6 h内能够进入细胞内部,定位在溶酶体细胞器。经光动力光照治疗后光敏剂高效杀伤胃癌细胞,与对照组相比,杀伤效果显著增强(P<0.05),并且在细胞内产生大量ROS。结论:新型光敏剂PEG-MTPABZ-PyC在光动力疗法治疗胃癌中具备高效的杀伤力,具有较好的开发前景。 展开更多
关键词 新型光敏剂 PEG-MTPABZ-PyC 光动力疗法 胃癌 杀伤效果
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