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浙江省重要蜱传病原体流行情况调查 被引量：6
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作者 王钊 陈学秋 +4 位作者 杜振东 吴飞 阳毅敏 赵明秀 杜爱芳 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期1222-1227,1276,共7页
从浙江省杭州、宁波、温州、绍兴、湖州、嘉兴、金华、衢州、台州和丽水等10个城市共采集蜱589只,通过形态学特征和分子生物学方法鉴定其种属,利用PCR方法检测每个蜱样品中是否含有巴贝斯原虫、立克次体、无形体和埃立克体4种病原体的D... 从浙江省杭州、宁波、温州、绍兴、湖州、嘉兴、金华、衢州、台州和丽水等10个城市共采集蜱589只,通过形态学特征和分子生物学方法鉴定其种属,利用PCR方法检测每个蜱样品中是否含有巴贝斯原虫、立克次体、无形体和埃立克体4种病原体的DNA,利用双重荧光定量PCR方法检测蜱是否携带非洲猪瘟病毒,运用最大似然估计法计算感染率并进行遗传进化分析。结果显示,本试验采集的蜱主要为血红扇头蜱和长角血蜱;5种蜱传病原体在浙江省优势蜱种中的流行率分别为巴贝斯原虫(5.09%)、立克次体(9.85%)、无形体(7.81%)、埃立克体(1.70%)和非洲猪瘟病毒(0%);在样品中检测到微小巴贝斯虫、牛巴贝斯虫、黑龙江立克次体、日本立克次体、嗜吞噬细胞无形体和查菲埃立克体,还发现几种病原体未定种。 展开更多
关键词 蜱传病原体 巴贝斯原虫 立克次体 无形体 埃立克体
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弓形虫tRNA硫化修饰酶TgMnmA基因缺失虫株的免疫保护性研究
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作者 史悦 阳毅敏 +4 位作者 陈学秋 夏洁 赵明秀 姚晨倩 杜爱芳 《中国兽医学报》 北大核心 2025年第4期724-730,共7页
为了评估弓形虫tRNA硫化修饰酶TgMnmA基因缺失虫株对ICR小鼠的免疫原性和免疫保护效果,本研究构建了RH△MnmA免疫的小鼠模型,通过腹腔注射10个RH△MnmA速殖子对小鼠进行免疫,30d后利用间接ELISA技术检测免疫后小鼠的特异性IgG抗体及其亚... 为了评估弓形虫tRNA硫化修饰酶TgMnmA基因缺失虫株对ICR小鼠的免疫原性和免疫保护效果,本研究构建了RH△MnmA免疫的小鼠模型,通过腹腔注射10个RH△MnmA速殖子对小鼠进行免疫,30d后利用间接ELISA技术检测免疫后小鼠的特异性IgG抗体及其亚型,制备脾淋巴细胞悬液,利用流式细胞术分析脾淋巴细胞亚群,并通过实时荧光定量PCR技术检测各细胞因子mRNA的相对表达水平;对免疫30d后的小鼠腹腔接种RH△ku80速殖子,5d后检测小鼠腹水、心脏、肝脏和脑的荷虫量,观察并记录小鼠感染后30d内的存活情况。结果表明,与对照PBS组相比,RH△MnmA免疫组产生了更高的IgG和IgG2a抗体水平,细胞因子IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-12和IFN-γ的mRNA相对表达水平都有不同程度的上升,小鼠脾淋巴细胞CD4^(+)和CD8a^(+)的数量也显著增加;同时,对于RH△ku80虫株的攻击,免疫组能够有效降低小鼠腹水和部分脏器的荷虫量,抑制虫体的体内繁殖,并显著提高小鼠的生存率。本研究结果显示,弓形虫TgMnmA基因缺失虫株能够诱导小鼠产生较强的体液和细胞免疫应答,并且针对RH△ku80虫株的感染提供良好的免疫保护,有成为候选抗弓形虫减毒活疫苗的潜力。 展开更多
关键词 弓形虫疫苗 硫化修饰酶 TgMnmA 免疫保护
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弓形虫泛素特异性蛋白酶TgUSP10的定位及其功能 被引量：1
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作者 陈璐璐 孙洪超 +5 位作者 阳毅敏 盛楷茵 姚晨倩 陈学秋 杨怡 杜爱芳 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期2444-2451,共8页
利用CRISPR/Cas9技术构建弓形虫泛素特异性蛋白酶TgUSP10的内源性标记虫株,经单克隆后通过PCR和Western blot对内源性标记虫株进行鉴定,并通过间接免疫荧光试验分析了TgUSP10蛋白的亚细胞定位与表达水平;同时,构建TgUSP10敲除虫株,经单... 利用CRISPR/Cas9技术构建弓形虫泛素特异性蛋白酶TgUSP10的内源性标记虫株,经单克隆后通过PCR和Western blot对内源性标记虫株进行鉴定,并通过间接免疫荧光试验分析了TgUSP10蛋白的亚细胞定位与表达水平;同时,构建TgUSP10敲除虫株,经单克隆后进行PCR鉴定,并通过噬斑、黏附/入侵、复制和逸出试验评估TgUSP10缺失对弓形虫体外增殖的影响。IFA结果显示,TgUSP10定位于细胞质,并在G1期、S期和分裂后期表达量较高;成功构建了TgUSP10敲除虫株,与RH△ku80虫株相比,TgUSP10敲除虫株形成噬斑的能力显著减弱;进一步分析体外增殖的具体过程后发现,TgUSP10敲除虫株的复制能力显著减弱,而黏附/入侵和逸出能力没有显著变化。结果表明,成功构建了TgUSP10的内源性标记虫株,TgUSP10定位于虫体细胞质,并对弓形虫体外增殖具有重要作用,为后续进一步阐明其功能和作用机制奠定基础。 展开更多
关键词 弓形虫 去泛素化酶 TgUSP10 CRISPR/Cas9
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