猪CD163基因的单碱基编辑研究 被引量：7

1

作者 赵为民 王慧利 +8 位作者 曹少先 郭日红 王泽平 陈哲 徐奎 付言峰 李碧侠 任守文 程金花 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期1041-1050,共10页

旨在利用YE1-BE3-FNLS载体对猪的CD163基因进行C>T的单碱基突变,形成终止密码子TAA,从而导致CD163基因翻译的提前终止。利用网站在猪CD163基因的第7外显子筛选到高效率的sgRNA序列使其符合C5位点,并且C5后续的两个碱基为AA,CAA与起... 旨在利用YE1-BE3-FNLS载体对猪的CD163基因进行C>T的单碱基突变,形成终止密码子TAA,从而导致CD163基因翻译的提前终止。利用网站在猪CD163基因的第7外显子筛选到高效率的sgRNA序列使其符合C5位点,并且C5后续的两个碱基为AA,CAA与起始密码子ATG之间的碱基数为3的整数倍。PCR扩增CD163-sgRNA和YE1-BE3-FNLS载体中的APOBEC-Cas9n-UGI片段,通过体外转录形成CD163-sgRNA和APOBEC-Cas9n-UGI mRNA。体外培养猪卵母细胞并进行孤雌激活,利用显微操作仪对孤雌胚胎进行CD163-sgRNA和APOBEC-Cas9n-UGI mRNA注射,待胚胎发育至桑椹胚和囊胚阶段,提取胚胎基因组DNA对单碱基编辑区域进行PCR扩增测序。结果显示,在49个候选sgRNA中成功筛选出一个CD163-sgRNA,利用PCR成功扩增了CD163-sgRNA和APOBEC-Cas9n-UGI片段,注射CD163-sgRNA和APOBEC-Cas9n-UGI mRNA后的猪孤雌胚胎发育到2~4细胞期。挑选注射的20个2~4细胞期胚胎经过PCR扩增与产物测序后发现有12个胚胎的CD163基因的第7外显子的预期位点C(num1479)>T,单碱基编辑效率约60%。对CD163-sgRNA的off-target分析发现,在错配3个碱基的情况下该CD163-sgRNA有5个off-target区域,对这5个区域进行PCR扩增和sanger测序分析后发现都没有发生C>T的突变。本研究利用YE1-BE3-FNLS工具在胚胎水平上对猪的CD163基因进行了单碱基编辑,成功使得该基因第7外显子预期位点(num1479)C变为T,从而使得密码子CAA变为TAA,可提前终止CD163基因的翻译。 展开更多

关键词 CRISPR/Cas9 单碱基编辑 CD163基因 猪

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山羊MC1R基因克隆、表达及其多态性研究 被引量：2

2

作者 李隐侠 张俊 +4 位作者 钱勇 孟春花 王慧利 钟声 曹少先 《江苏农业科学》 2020年第1期70-74,共5页

为研究黑色素皮质素受体1(MC1R)基因与山羊毛色形成的相关性,以苏淮山羊和波尔山羊为研究对象,克隆测序获得了山羊MC1R基因编码区全序列,实时定量荧光PCR(Real-Time PCR)检测其在苏淮山羊和波尔山羊耳组织中的表达水平,DNA池方法筛选其... 为研究黑色素皮质素受体1(MC1R)基因与山羊毛色形成的相关性,以苏淮山羊和波尔山羊为研究对象,克隆测序获得了山羊MC1R基因编码区全序列,实时定量荧光PCR(Real-Time PCR)检测其在苏淮山羊和波尔山羊耳组织中的表达水平,DNA池方法筛选其在山羊群体中的SNPs位点。结果发现,MC1R基因在苏淮山羊中全长954 bp,编码317个氨基酸残基。波尔山羊和苏淮山羊MC1R基因核苷酸和氨基酸序列一致性为99.79%和98.77%;系统进化分析发现,波尔山羊与苏淮山羊聚在一起后再与绵羊聚在一起。在苏淮山羊群体中发现183C/T和748T/G 2个突变位点,在波尔山羊群体中检测到701G/A突变。MC1R基因在波尔山羊耳组织中的表达水平高于苏淮山羊,但差异不显著。该研究显示MC1R基因可能在调控山羊毛色形成中发挥一定的作用。 展开更多

关键词 MC1R基因 实时定量荧光PCR(Real-Time PCR) 被毛 苏淮山羊 波尔山羊

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芳香烃受体与动物繁殖关系的研究进展

3

作者 李辉 赵为民 +6 位作者 莫殿宝 沈婕 赵蕾 戴超辉 付言峰 李碧侠 程金花 《中国畜牧杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期16-23,共8页

芳香烃受体(Aryl Hydrocarbon Receptor,AHR)是一种细胞内受体,也是一种重要的配体依赖性转录因子。现有研究发现AHR的配体和其生物学功能具有多样性,并且对动物繁殖活动有重要的调控作用,但具体机制尚不清晰。本文对AHR的配体、AHR在... 芳香烃受体(Aryl Hydrocarbon Receptor,AHR)是一种细胞内受体,也是一种重要的配体依赖性转录因子。现有研究发现AHR的配体和其生物学功能具有多样性,并且对动物繁殖活动有重要的调控作用,但具体机制尚不清晰。本文对AHR的配体、AHR在动物机体的分布与表达调控、AHR对激素分泌及生殖系统的作用、AHR多态性和拷贝数与产仔数关系等方面进行归纳分析,为扩展动物繁殖理论提供新思路和参考。 展开更多

关键词 芳香烃受体 配体 动物繁殖

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猪乳头性状生理学和遗传学研究进展 被引量：5

4

作者 周李生 赵为民 +3 位作者 涂枫 吴云鹤 任守文 方晓敏 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期384-390,共7页

猪乳头性状属于繁殖性状,直接影响母猪哺乳率和仔猪成活率,是种猪遗传改良的重要指标,揭示其遗传机理对提高种猪繁殖性能具有重要意义。猪乳头性状复杂多样,包括乳头数、乳头类型、乳头位置分布和波动不对称性现象等,但其遗传机制尚不... 猪乳头性状属于繁殖性状,直接影响母猪哺乳率和仔猪成活率,是种猪遗传改良的重要指标,揭示其遗传机理对提高种猪繁殖性能具有重要意义。猪乳头性状复杂多样,包括乳头数、乳头类型、乳头位置分布和波动不对称性现象等,但其遗传机制尚不清晰。本文对猪乳头及乳腺的形成与发育过程、猪乳头性状调控基因数量性状位点(quantitative trait locus, QTL)定位和候选基因等生理学和遗传学方面的研究进展进行了综述,旨在为今后鉴别影响猪乳头性状的因果突变和主效基因,揭示猪乳头在胚胎发育过程中产生数目、类型和位置差异的复杂遗传机制提供新的视角。 展开更多

关键词 猪 乳头性状 遗传研究

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猪lincRNA-CXCL 6调控LPS诱导炎症反应的机制研究 被引量：1

5

作者 邢菲 方晓敏 +8 位作者 杨晓阳 付言峰 陈哲 王丽 涂枫 任守文 李碧侠 陈杰 赵为民 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期927-935,共9页

[目的]本研究旨在探究猪长链非编码RNA lincRNA-CXCL 6调控脂多糖(LPS)诱导炎症反应的分子机制,为防御猪的细菌性疾病引起的炎症损伤提供新的思路。[方法]利用互补DNA(cDNA)末端快速扩增技术获得lincRNA-CXCL 6的全长序列,利用荧光定量P... [目的]本研究旨在探究猪长链非编码RNA lincRNA-CXCL 6调控脂多糖(LPS)诱导炎症反应的分子机制,为防御猪的细菌性疾病引起的炎症损伤提供新的思路。[方法]利用互补DNA(cDNA)末端快速扩增技术获得lincRNA-CXCL 6的全长序列,利用荧光定量PCR(qPCR)检测lincRNA-CXCL 6的表达模式。构建lincRNA-CXCL 6稳转的小鼠单核巨噬细胞白血病细胞(RAW264.7细胞),利用转录组测序分析lincRNA-CXCL 6对LPS刺激后的细胞信号通路影响;利用Western blot和qPCR验证lincRNA-CXCL 6通过细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)通路来调控LPS诱导的炎症因子表达。[结果]lincRNA-CXCL 6全长985 bp,包含2个外显子。lincRNA-CXCL 6在LPS和二酰脂肽(Pam2CSK4)刺激下表达量升高,并且随着LPS刺激时间的增加其表达量也逐渐升高;lincRNA-CXCL 6在猪成年组织中仅微弱表达于肺和小肠,且主要表达于细胞质中。lincRNA-CXCL 6过表达抑制了LPS诱导的白细胞介素1β(IL-1β)和白细胞介素6(IL-6)mRNA的转录。转录组数据显示,与对照相比,LPS刺激后,lincRNA-CXCL 6过表达组有104个基因上调和165个基因下调。基因本体分析(GO分析)显示:165个下调基因主要参与免疫相关的生物学过程。lincRNA-CXCL 6通过ERK1/2通路负调控IL-1β和趋化因子17(CCL 17)的转录表达。[结论]猪lincRNA-CXCL 6通过ERK1/2信号途径抑制LPS诱导的炎症因子表达。 展开更多

关键词 猪 长链非编码RNA 脂多糖 炎症反应 ERK1/2通路

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猪TGF-βⅡ型受体胞外域的表达及生物活性验证

6

作者 赵蕾 李辉 +6 位作者 覃水平 李碧侠 戴超辉 赵为民 付言峰 邓彦飞 程金花 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2024年第7期1268-1275,共8页

转化生长因子β1Ⅱ型受体(TGFⅡR)是TGF-β家族的主要受体。现有研究发现,TGF-β1在家畜繁殖活动中起着负调控作用,因此我们提出通过重组TGFⅡR胞外域蛋白质竞争性结合体内TGF-β1以改善家畜繁殖性能的新思路。首先,对猪TGFⅡR胞外域蛋... 转化生长因子β1Ⅱ型受体(TGFⅡR)是TGF-β家族的主要受体。现有研究发现,TGF-β1在家畜繁殖活动中起着负调控作用,因此我们提出通过重组TGFⅡR胞外域蛋白质竞争性结合体内TGF-β1以改善家畜繁殖性能的新思路。首先,对猪TGFⅡR胞外域蛋白质编码序列进行密码子优化并进行人工合成,将合成的基因片段插入原核表达载体pET-32a(+)中。然后,将重组表达载体转入BL21(DE3)表达菌株中,并筛选合适的乳糖诱导浓度、诱导时间,以获得最高表达效率。再然后,对重组蛋白质进行纯化、复性及质谱鉴定。最后,通过体外细胞试验对重组蛋白质的生物活性进行测定。结果表明,在培养温度为37℃、培养时间为8 h、乳糖诱导质量浓度为2.0 g/L的条件下,可以诱导重组蛋白质的高表达,用8 mol/L尿素对包涵体蛋白质进行溶解,再以生理盐水为透析液透析24 h后,可以获得纯度达80%以上的重组猪TGFⅡR胞外域蛋白,用该重组蛋白质处理猪颗粒细胞后,可显著抑制TGF-β1诱导的信号分子Smad3的磷酸化水平。可以看出,本研究中表达的重组猪TGFⅡR胞外域蛋白质具有较好的生物活性。研究结果可为进一步研究和开发有利于提高猪繁殖效率的产品奠定工作基础。 展开更多

关键词 转化生长因子β1Ⅱ型受体(TGFⅡR) 原核表达 TGF-Β1 生物活性

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苜蓿草粉对苏山猪屠宰性能、胴体品质和肉质性状的影响 被引量：16

7

作者 李碧侠 赵为民 +4 位作者 付言峰 涂枫 方晓敏 王学敏 任守文 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期1090-1098,共9页

本试验旨在探讨饲粮添加苜蓿草粉对苏山猪屠宰性能、胴体品质、肌肉脂肪酸和氨基酸含量的影响,从而确定苜蓿草粉作为饲粮粗纤维改善苏山猪胴体品质的可行性。试验选择健康、体重为(60.0±2.0)kg的苏山猪60头,随机分为4组,每组3个重... 本试验旨在探讨饲粮添加苜蓿草粉对苏山猪屠宰性能、胴体品质、肌肉脂肪酸和氨基酸含量的影响,从而确定苜蓿草粉作为饲粮粗纤维改善苏山猪胴体品质的可行性。试验选择健康、体重为(60.0±2.0)kg的苏山猪60头,随机分为4组,每组3个重复,每个重复5头,分别在基础饲粮中添加0(对照组)、10%(试验Ⅰ组)、15%(试验Ⅱ组)、20%(试验Ⅲ组)苜蓿草粉,预试期7 d,正试期80 d。结果表明:1)随着饲粮中苜蓿草粉添加量的增加,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组屠宰率、板油重、背膘厚均高于对照组,瘦肉率低于对照组,其中板油重和背膘厚与对照组相比差异达到极显著水平(P<0.01)。2)饲粮中添加苜蓿草粉对苏山猪肌肉颜色和失水率有显著影响(P<0.05),试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组背最长肌亮度值显著高于对照组(P<0.05),红度值和黄度值极显著低于对照组(P<0.01);试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组背最长肌失水率均低于对照组,其中试验Ⅱ、Ⅲ组与对照组相比差异达到显著水平(P<0.05)。3)饲粮中添加苜蓿草粉影响苏山猪肌肉脂肪酸和氨基酸组成,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组总单不饱和脂肪酸、必需氨基酸和鲜味氨基酸含量均高于对照组,其中试验Ⅰ组必需氨基酸和鲜味氨基酸含量与对照组相比差异达到极显著水平(P<0.01)。综上所述,饲粮中添加10%苜蓿草粉可以显著改善苏山猪肌肉颜色,提高苏山猪肌肉嫩度、鲜味,进而改善猪肉品质。 展开更多

关键词 苏山猪 苜蓿草粉 屠宰性能 胴体品质 肉质性状

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添加苜蓿草粉对育肥中后期苏山猪胴体性状和肉品质的影响 被引量：10

8

作者 李碧侠 赵为民 +6 位作者 王丽 付言峰 涂枫 王学敏 方晓敏 陈哲 任守文 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期4093-4101,共9页

本试验旨在探讨饲粮添加苜蓿草粉对育肥中后期苏山猪屠宰性能、胴体性状、肌肉脂肪酸和氨基酸含量的影响。选取健康、体重为(30.0±1.0)kg的苏山猪60头(公母各占1/2),随机分为4组,每组3个重复。对照组饲喂基础饲粮,育肥中期试验组... 本试验旨在探讨饲粮添加苜蓿草粉对育肥中后期苏山猪屠宰性能、胴体性状、肌肉脂肪酸和氨基酸含量的影响。选取健康、体重为(30.0±1.0)kg的苏山猪60头(公母各占1/2),随机分为4组,每组3个重复。对照组饲喂基础饲粮,育肥中期试验组在基础饲粮中分别添加5%(试验Ⅰ组)、10%(试验Ⅱ组)和15%(试验Ⅲ组)的苜蓿草粉;育肥后期试验组在基础饲粮中分别添加10%(试验Ⅰ组)、15%(试验Ⅱ组)和20%(试验Ⅲ组)的苜蓿草粉。预试期7 d,正试期128 d。结果表明:1)与对照组相比,饲粮中添加苜蓿草粉可极显著提高苏山猪板油重和背膘厚(P<0.01),对平均日增重、屠宰率和瘦肉率影响不显著(P>0.05)。2)试验组背最长肌水分和粗蛋白质含量均低于对照组,肌肉亮度(L)值高于对照组,红度(a)和黄度(b)值低于对照组,其中试验Ⅲ组与对照组差异达到极显著水平(P<0.01)。3)试验组背最长肌总饱和脂肪酸和总单不饱和脂肪酸含量高于对照组,总多不饱和脂肪酸含量低于对照组,差异均达到极显著水平(P<0.01)。试验组背最长肌葵酸、棕榈酸和十七烷酸等饱和脂肪酸含量均显著高于对照组(P<0.05);但亚油酸、二十碳二烯酸、二十碳三烯酸等多不饱和脂肪酸含量均极显著低于对照组(P<0.01)。4)试验组背最长肌氨基酸总量、必需氨基酸和鲜味氨基酸总量均高于对照组,其中试验Ⅲ组鲜味氨基酸含量与对照组差异达到极显著水平(P<0.01)。综上所述,苏山猪育肥中期添加10%苜蓿草粉,育肥后期添加15%苜蓿草粉可以显著改善苏山猪屠宰性能、胴体性状和肉品质。 展开更多

关键词 苏山猪 苜蓿草粉 屠宰性能 胴体性状 肉品质

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微贮对油菜秸秆营养成分及其在山羊瘤胃中降解特性的影响 被引量：13

9

作者 孟春花 乔永浩 +6 位作者 钱勇 王子玉 王飞 王慧利 李隐侠 张俊 曹少先 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期326-332,共7页

[目的]本试验通过研究乳酸菌微贮对油菜秸秆的感官指标、营养成分及其在山羊瘤胃里的降解特性的变化影响,旨在探索油菜秸秆饲料化利用的方法。[方法]将粉碎的油菜秸秆分成4组,对照组不做处理,3个微贮组分别添加不同比例(质量分数为40%、... [目的]本试验通过研究乳酸菌微贮对油菜秸秆的感官指标、营养成分及其在山羊瘤胃里的降解特性的变化影响,旨在探索油菜秸秆饲料化利用的方法。[方法]将粉碎的油菜秸秆分成4组,对照组不做处理,3个微贮组分别添加不同比例(质量分数为40%、55%和70%)水分后,再添加200 mL乳酸菌液(1.6×105 CFU·g-1)进行微贮,于处理后0、7、14和21 d采集样品,进行感官指标和营养成分分析,并采用尼龙袋法对微贮前后油菜秸秆的粗蛋白(CP)、中性洗涤纤维(NDF)和酸性洗涤纤维(ADF)的瘤胃降解率和有效降解率进行比较研究。[结果]微贮处理21 d后油菜秸秆松软,有清香味,适口性改善显著;CP含量升高,NDF和ADF含量下降;CP、ADF的有效降解率显著升高(P<0.05)。随着水分添加量的增加,CP的瘤胃有效降解率显著升高,ADF的瘤胃降解率下降。[结论]乳酸菌微贮能改善油菜秸秆的适口性,改善油菜秸秆的营养成分及其在瘤胃的降解特性,添加40%水分的油菜秸秆微贮21 d的综合效果更好。 展开更多

关键词 油菜秸秆 乳酸菌 微贮 瘤胃降解 山羊

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苜蓿草粉对苏山猪生长速度、血液生化指标及屠宰性能的影响 被引量：8

10

作者 李碧侠 赵为民 +4 位作者 付言峰 涂枫 王学敏 方晓敏 任守文 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2020年第11期2675-2680,共6页

【目的】本试验旨在研究饲粮中苜蓿草粉含量对生长期和育肥期苏山猪生长速度、血液生化指标、屠宰性能以及内脏器官发育的影响。【方法】选取健康、体重为(30.0±1.0)kg的苏山猪54头,采用单因子试验设计随机分为3组,每组3个重复,生... 【目的】本试验旨在研究饲粮中苜蓿草粉含量对生长期和育肥期苏山猪生长速度、血液生化指标、屠宰性能以及内脏器官发育的影响。【方法】选取健康、体重为(30.0±1.0)kg的苏山猪54头,采用单因子试验设计随机分为3组,每组3个重复,生长期分别在基础饲粮中添加0%(对照组)、10%(试验Ⅰ组)、15%(试验Ⅱ组)苜蓿草粉,育肥期分别在基础饲粮中添加0%(对照组)、15%(试验Ⅰ组)、20%(试验Ⅱ组)苜蓿草粉。预试期7 d,正试期124 d。试验结束后,每组随机选取6头猪屠宰。【结果】(1)少量添加苜蓿草粉可提高生长期苏山猪平均日增重,苜蓿草粉含量过多将降低生长期苏山猪平均日增重;苜蓿草粉可提高育肥期苏山猪平均日增重,但饲粮中苜蓿草粉对生长期和肥育期苏山猪平均日增重的影响均未达到显著水平(P>0.05)。(2)生长期,试验Ⅰ组和试验Ⅱ组各项血液生化指标与对照组间差异均未达到显著性水平(P>0.05);育肥期,试验Ⅰ组尿素氮浓度、总胆固醇浓度和高密度脂蛋白浓度均高于对照组和试验Ⅱ组,差异达到极显著水平(P<0.01)。(3)试验Ⅰ组和试验Ⅱ组板油重和胴体直长均高于对照组,且差异达到极显著水平(P<0.01);试验Ⅰ组和试验Ⅱ组背膘厚高于对照组,但差异未达到显著水平(P>0.05)。(4)试验Ⅱ组大肠重和小肠重均高于对照组和试验Ⅰ组,其中试验Ⅱ组大肠重极显著高于对照组和试验Ⅰ组(P<0.01)。在其余内脏器官指标上,试验Ⅰ组和试验Ⅱ组与对照组差异均未达到显著水平(P>0.05)。【结论】饲粮中添加苜蓿草粉可影响育肥期苏山猪的生长性能,苏山猪具有一定的耐粗饲性。 展开更多

关键词 苏山猪 苜蓿草粉 生长速度 血液生化指标 屠宰性能 内脏器官发育

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不同粗纤维水平日粮对育肥后期苏山猪生长性能和屠宰性能的影响 被引量：11

11

作者 李碧侠 赵芳 +5 位作者 赵为民 付言峰 涂枫 方晓敏 王学敏 任守文 《家畜生态学报》 北大核心 2017年第10期27-32,共6页

本试验旨在研究日粮中不同粗纤维水平对育肥后期苏山猪生长性能和胴体性能的影响。选用45头60kg左右苏山猪,随机分成A、B、C组,每组15头,分别采用8.35%,9.10%,11.39%粗纤维水平日粮进行饲喂。试验结束后,每组随机选取5头猪屠宰。结果表... 本试验旨在研究日粮中不同粗纤维水平对育肥后期苏山猪生长性能和胴体性能的影响。选用45头60kg左右苏山猪,随机分成A、B、C组,每组15头,分别采用8.35%,9.10%,11.39%粗纤维水平日粮进行饲喂。试验结束后,每组随机选取5头猪屠宰。结果表明:(1)日粮中粗纤维水平可影响苏山猪生长速度。B组平均日增重高于A组、C组,B组与A组间差异显著(P<0.05)。(2)日粮中粗纤维水平可影响苏山猪血液生化指标。B组尿素氮、总胆固醇、高密度脂蛋白显著高于C组(P<0.05);C组尿素氮显著高于A组(P<0.05)。(3)日粮中粗纤维水平可影响苏山猪屠宰性能。粗纤维水平升高,脂率呈下降趋势;B组、C组肉脂比均显著高于A组(P<0.05);B组小肠重量显著低于A组、C组(P<0.05);C组的大肠重量显著高于A组、B组(P<0.05)。心脏重量A组最高,B组最低,组间差异显著(P<0.05);A组肺重量显著高于B组(P<0.05)。本试验结果提示,适量提高日粮中粗纤维水平可提高苏山猪生长速度,降低育肥后期苏山猪的脂率,提高肉脂比;同时可影响育肥后期苏山猪小肠、大肠、心脏和肺的发育。 展开更多

关键词 育肥猪 日粮粗纤维 生长性能 屠宰性能 血清生化指标

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不同屠宰体重对苏山猪屠宰性能、胴体性状和肉品质的影响 被引量：7

12

作者 李碧侠 赵为民 +5 位作者 付言峰 周李生 王丽 任守文 方晓敏 王学敏 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第12期3659-3665,共7页

试验旨在探讨不同屠宰体重对苏山猪屠宰性能、胴体性状和肉品质的影响,从而确定苏山猪最佳屠宰体重。选用60头30 kg左右的苏山猪,公母各半,随机分成A、B、C组,每组20头,平均体重分别达到90、100、110 kg时,每组选取3头公猪、3头母猪进... 试验旨在探讨不同屠宰体重对苏山猪屠宰性能、胴体性状和肉品质的影响,从而确定苏山猪最佳屠宰体重。选用60头30 kg左右的苏山猪,公母各半,随机分成A、B、C组,每组20头,平均体重分别达到90、100、110 kg时,每组选取3头公猪、3头母猪进行屠宰性能、胴体性状和肉品质测定。结果表明:随着苏山猪屠宰体重的增加,各组屠宰性能存在较大差异,A组瘦肉率为63.18%,显著高于B、C组(P<0.05);C组板油重、肩部最厚处背膘厚、倒数第3~4肋骨处背膘厚显著高于A组(P<0.05);3个处理组屠宰率、皮率、骨率以及脂肪率等指标无显著差异(P>0.05);3个处理组背最长肌水分、粗蛋白质、粗脂肪无显著差异(P>0.05),但A组的粗灰分显著高于B、C组(P<0.05);B组肌肉L值为43.50,显著高于C组(P<0.05),C组pH 1 h和pH 24 h分别为6.40和5.83,显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)高于A、B组。随屠宰体重增长肌肉内饱和脂肪酸和单不饱和脂肪酸呈上升趋势,多不饱和脂肪酸呈下降趋势,其中C组饱和脂肪酸显著高于A组(P<0.05);A组总氨基酸、必需氨基酸和鲜味氨基酸均高于B、C组,但差异均未达到显著水平(P>0.05)。因此,综合考虑,苏山猪的最佳屠宰体重为90 kg左右。 展开更多

关键词 苏山猪 屠宰体重 屠宰性能 胴体品质 肉质性状

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瘦素受体对苏钟猪脂肪沉积调控的影响 被引量：5

13

作者 付言峰 李兰 +4 位作者 周艳红 李碧侠 方晓敏 王学敏 任守文 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期986-992,共7页

[目的]研究瘦素受体(leptin receptor,LEPR)的mRNA表达和编码序列单核苷酸多态性(c SNPs)对猪脂肪沉积性状的影响。[方法]本文旨在利用实时荧光定量PCR(RT-q PCR)方法和免疫印迹方法检测了该基因在高脂猪和低脂猪背最长肌、背膘、心、... [目的]研究瘦素受体(leptin receptor,LEPR)的mRNA表达和编码序列单核苷酸多态性(c SNPs)对猪脂肪沉积性状的影响。[方法]本文旨在利用实时荧光定量PCR(RT-q PCR)方法和免疫印迹方法检测了该基因在高脂猪和低脂猪背最长肌、背膘、心、肝和肾共5种组织样中的mRNA和蛋白表达量,利用直接测序方法检测了LEPR第18外显子c SNPs,并对LEPR表达量、编码序列单核苷酸多态位点与苏钟猪脂肪沉积相关性状进行了关联分析。[结果]RT-q PCR结果表明:LEPR mRNA在这5种组织中均有表达,且差异显著(P<0.05),其中背膘组织中的表达量显著高于其他组织(P<0.05),其次为背最长肌中的表达量,高脂猪的mRNA表达量显著高于低脂猪(P<0.05)。Western blot结果表明,LEPR蛋白在背膘和背最长肌中显著表达,且高脂猪的蛋白表达量显著高于低脂猪(P<0.05),说明猪脂肪沉积量越高,LEPR mRNA和蛋白表达量越高。PCR-sequencing结果表明,在LEPR c DNA的c.2841C>T位点处,T等位基因为脂肪沉积的优势等位基因。[结论]LEPR的表达对苏钟猪脂肪沉积调控有显著影响,其c.2841C>T位点可作为苏钟猪脂肪沉积肉质性状改良育种的分子标记。 展开更多

关键词 瘦素受体 表达 编码序列单核苷酸多态 脂肪沉积 苏钟猪

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放牧对育肥后期苏山猪生长性能、胴体性状和肌肉品质的影响 被引量：3

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作者 李碧侠 任守文 +3 位作者 赵为民 付言峰 王学敏 涂枫 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期3529-3536,共8页

本试验旨在研究放牧对育肥后期苏山猪生长性能、胴体性状以及肌肉中氨基酸和脂肪酸含量的影响。选取健康、体重为(75.0±2.0) kg的苏山猪80头(公母各占1/2),随机分为放牧组和对照组,每组2个重复,每个重复20头。放牧组猪群每天11:00... 本试验旨在研究放牧对育肥后期苏山猪生长性能、胴体性状以及肌肉中氨基酸和脂肪酸含量的影响。选取健康、体重为(75.0±2.0) kg的苏山猪80头(公母各占1/2),随机分为放牧组和对照组,每组2个重复,每个重复20头。放牧组猪群每天11:00—17:00在果园中放牧,自由采食黑麦草、俄罗斯草等青绿饲料。对照组猪群舍饲。预试期7 d,正试期30 d。结果表明:1)放牧组平均日增重和屠宰率均低于对照组,差异达到显著水平(P<0.05);放牧组胴体骨率高于对照组,差异达到极显著水平(P<0.01)。2)放牧组背最长肌失水率低于对照组,差异达到极显著水平(P<0.01);亮度(L^(*))值和红度(a^(*))值高于对照组,黄度(b^(*))值低于对照组,但差异均未达到显著水平(P>0.05)。3)放牧组背最长肌中不饱和脂肪酸含量高于对照组,总饱和脂肪酸含量低于对照组,但差异均未达到显著水平(P>0.05)。放牧组背最长肌中缬氨酸含量高于对照组,胱氨酸含量低于对照组,差异均达到极显著水平(P<0.01)。4)放牧组背最长肌中总必需氨基酸、总鲜味氨基酸和总氨基酸含量均低于对照组,但差异未达到显著水平(P>0.05)。放牧组背最长肌中棕榈油酸含量高于对照组,差异达到显著水平(P<0.05);月桂酸、硬脂酸、花生酸等饱和脂肪酸含量低于对照组,且差异均达到极显著水平(P<0.01)。综上所述,育肥后期苏山猪进行放牧对其生长性能影响不显著,但对其胴体性状和肌肉品质具有一定程度的改善作用,是生产优质猪肉的一种重要养殖模式。 展开更多

关键词 放牧 苏山猪 生长性能 胴体性状 肌肉品质

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SIRT1基因对猪卵巢颗粒细胞中生殖激素受体基因表达量的影响 被引量：4

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作者 李碧侠 赵芳 +1 位作者 任守文 付言峰 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2016年第1期123-127,共5页

为了探讨SIRT1基因在猪卵巢颗粒细胞生殖激素分泌中的作用,采用白藜芦醇和尼克酰胺处理猪卵巢颗粒细胞,检测猪卵巢颗粒细胞中SIRT1基因和生殖激素受体表达水平,分析SIRT1基因与生殖激素受体表达量的相关性。结果表明,白藜芦醇和尼克酰... 为了探讨SIRT1基因在猪卵巢颗粒细胞生殖激素分泌中的作用,采用白藜芦醇和尼克酰胺处理猪卵巢颗粒细胞,检测猪卵巢颗粒细胞中SIRT1基因和生殖激素受体表达水平,分析SIRT1基因与生殖激素受体表达量的相关性。结果表明,白藜芦醇和尼克酰胺可剂量依赖性地调节猪卵巢颗粒细胞中SIRT1基因表达,SIRT1基因表达量的升高可引起ER2、FSHR、LHR表达量上调,其相关系数分别为0.820 6、0.519 7和0.140 7。说明,SIRT1基因参与猪卵巢颗粒细胞生殖激素受体表达调控,可影响猪卵巢颗粒细胞生殖激素分泌。 展开更多

关键词 猪 卵巢颗粒细胞 SIRT1 生殖激素受体

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山羊MC4R基因多态性与体质量性状的关联性分析 被引量：4

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作者 张俊 李隐侠 +3 位作者 钱勇 王慧利 孟春花 曹少先 《江苏农业科学》 2019年第19期53-56,共4页

为探讨黑素皮质素受体4(MC4R)基因多态性对山羊体质量的影响,以波尔山羊为研究对象,采用池DNA为模板,PCR扩增MC4R基因,Sanger测序法筛选其在波尔山羊中的SNPs位点,PCR-RFLP方法进行多态位点分型,单因素方差分析不同基因型间波尔山羊各... 为探讨黑素皮质素受体4(MC4R)基因多态性对山羊体质量的影响,以波尔山羊为研究对象,采用池DNA为模板,PCR扩增MC4R基因,Sanger测序法筛选其在波尔山羊中的SNPs位点,PCR-RFLP方法进行多态位点分型,单因素方差分析不同基因型间波尔山羊各月龄体质量的差异。结果表明,编码区502 bp处新检测到A/G单碱基颠换,位于Bse JⅠ酶切位点内,在波尔山羊群体中存在AA(0.7791)、AG(0.2025)和GG(0.0184)3种基因型,关联分析发现AA基因型个体初生体质量、1周龄体质量显著高于AG基因型(P<0.05),1周龄体质量极显著高于GG基因型(P<0.01),2周龄、2月龄、3月龄体质量显著高于GG型(P<0.05)。连锁分析发现,A502G、C693T、A946C和C986T位点共存在8种不同的基因型组合,AACCAACC型个体初生体质量显著高于AGCCAACC型(P<0.05),AACCAACT型个体周岁体质量显著高于AACTACCC型和AGCTACCC型(P<0.05)。综上所述,MC4R基因的A502G位点A基因对山羊早期体质量增加更有利,基因型组合AACCAACT对山羊周岁体质量增加更有利,可以作为山羊生长性状选择的候选分子标记。 展开更多

关键词 山羊 黑素皮质素受体4(MC4R) 多态性 体质量性状 关联性分析

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去乙酰化酶SIRT1过表达对猪卵巢颗粒细胞中AMPK活性的影响 被引量：2

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作者 赵芳 任守文 +2 位作者 赵为民 付言峰 李碧侠 《湖南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期166-171,共6页

构建猪SIRT1基因全长编码区(coding region sequence,CDS)的真核表达载体,转染猪原代卵巢颗粒细胞,探讨SIRT1基因过表达对猪卵巢颗粒细胞中AMPK基因的转录及其蛋白活性的影响。测序结果表明,猪SIRT1基因的CDS区全长大小为2 229 bp,与NCB... 构建猪SIRT1基因全长编码区(coding region sequence,CDS)的真核表达载体,转染猪原代卵巢颗粒细胞,探讨SIRT1基因过表达对猪卵巢颗粒细胞中AMPK基因的转录及其蛋白活性的影响。测序结果表明,猪SIRT1基因的CDS区全长大小为2 229 bp,与NCBI发布的猪SIRT1基因m RNA序列(EU030283.2)一致;转染p EGFP–C1–SIRT1载体的颗粒细胞中SIRT1的m RNA表达水平和蛋白表达水平极显著高于空载体对照组(P<0.01);p EGFP–C1–SIRT1转染组细胞中,AMPK–α1和AMPK–α2基因的m RNA表达量显著高于空载体对照组,且细胞中AMPKαThr172位点的磷酸化水平显著升高(P<0.05)。结果表明,体外培养的原代猪卵巢颗粒细胞中的SIRT1基因过表达使AMPK的表达显著增加,影响AMPK的活性,推测SIRT1可能通过AMPK在猪卵巢颗粒细胞凋亡过程中发挥重要的调控作用。 展开更多

关键词 猪 卵巢颗粒细胞 沉默信息调节因子1(SIRT1) 腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)

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猪单核源性巨噬细胞受FSL-1刺激后lncRNAs的鉴定与特征分析 被引量：2

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作者 赵为民 方晓敏 +5 位作者 涂枫 周李生 李碧侠 王学敏 付言峰 任守文 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2019年第2期346-356,共11页

lncRNA是新近发现的一种具有重要功能的RNA分子,在各种生理活动中发挥着重要作用。为鉴定猪单核源性巨噬细胞受FSL-1刺激后相关的lncRNA,利用二代测序技术结合生物信息学对lncRNA进行了组装与特征分析。结果显示FSL-1刺激成功地构建了... lncRNA是新近发现的一种具有重要功能的RNA分子,在各种生理活动中发挥着重要作用。为鉴定猪单核源性巨噬细胞受FSL-1刺激后相关的lncRNA,利用二代测序技术结合生物信息学对lncRNA进行了组装与特征分析。结果显示FSL-1刺激成功地构建了细胞炎症模型,试验组与对照组共鉴定到1 056个lncRNA转录本,其对应于831个基因座,这些lncRNA的平均长度为1 643 bp,平均外显子数为2.4个。相对于对照组,试验组有51个lncRNA上调表达,44个lncRNA下调表达。在上调lncRNA两侧相邻的蛋白质编码基因参与免疫反应、炎症反应、病毒反应等通路,而在下调lncRNA两侧相邻的蛋白质编码基因参与的通路较少,不参与上述通路。定量PCR结果显示挑选的4个lncRNA的差异倍数与RNA-Seq的结果相似,其中上调的lncRNA呈现一定的组织特异表达,而下调的lncRNA呈现多组织表达。这些结果为进一步研究lncRNA在FSL-1介导的炎症反应中的作用奠定了基础。 展开更多

关键词 猪 lncRNA 单核源性巨噬细胞 FSL-1 炎症

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猪PKM2基因在肺炎支原体感染3D4/21细胞后的互作蛋白质鉴定与分析 被引量：2

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作者 赵为民 涂枫 +6 位作者 王丽 任守文 付言峰 李碧侠 徐小波 陈哲 方晓敏 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2019年第6期1381-1389,共9页

通过构建含有HA标签的PKM2过表达质粒转染3D4/21细胞,利用免疫共沉淀(Co-IP)与液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)技术分析与鉴定猪PKM2基因在肺炎支原体感染猪肺泡巨噬细胞3D4/21后的互作蛋白质,并对这些互作蛋白质进行GO与KEGG通路分析。结... 通过构建含有HA标签的PKM2过表达质粒转染3D4/21细胞,利用免疫共沉淀(Co-IP)与液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)技术分析与鉴定猪PKM2基因在肺炎支原体感染猪肺泡巨噬细胞3D4/21后的互作蛋白质,并对这些互作蛋白质进行GO与KEGG通路分析。结果显示肺炎支原体感染3D4/21细胞后,PKM2在mRNA水平和蛋白质水平上表达上调,其表达水平呈现剂量与时间依懒性。免疫共沉淀反应结果显示IP与IgG组共鉴定到72个蛋白质,这2组鉴定到的蛋白质数分别为60和19,其中7个蛋白质在2组中同时鉴定到。GO分析结果表明IP组的互作蛋白质主要参与了NAD代谢过程、NADH代谢过程、肌原纤维组装、NADH再生和葡萄糖代谢丙酮酸等生物过程,其中大多数与能量代谢有关。KEGG pathway分析结果表明互作蛋白质参与了致病性大肠杆菌感染、军团杆菌病、糖酵解/糖异生、丙酮酸代谢和癌症中的中枢碳代谢等通路,这些通路与细菌感染和能量代谢有关。 展开更多

关键词 猪 PKM2基因 肺炎支原体 互作蛋白质 免疫共沉淀

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6种进口猪精液常温保存稀释粉的效果比较 被引量：3

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作者 徐小波 严敏 +2 位作者 欧正铨 任宪路 师蔚群 《江苏农业科学》 2019年第9期201-203,共3页

为了解进口猪精液常温保存稀释粉的实际应用效果,选购市场上常见的6种进口稀释粉进行比较试验。结果表明:随着常温保存时间的延长,不同稀释粉组间,活力下降速度存在差异,其中DILTEC和CXM下降最快,PRIMXCELL组下降最慢。精子有效存活时... 为了解进口猪精液常温保存稀释粉的实际应用效果,选购市场上常见的6种进口稀释粉进行比较试验。结果表明:随着常温保存时间的延长,不同稀释粉组间,活力下降速度存在差异,其中DILTEC和CXM下降最快,PRIMXCELL组下降最慢。精子有效存活时间差异很大,由长到短的顺序为PRIMXCELL>ACTIYE>XINZUAN>SpermPro>CXM>DILTEC;总存活时间也是PRIMXCELL最长,达到384h以上;保存120h顶体完整率存在显著差异,从高到低顺序为PRIMXCELL>SpermPro>XINZUAN>ACTIYE>CXM>DILTEC。说明法国的PRIMXCELL稀释粉最好,有效存活时间242h,总存活时间384408h,保存120h顶体完整率79.6%。 展开更多

关键词 公猪精液 稀释粉 常温保存 精子活力 顶体完整率

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