钩吻生物碱是引起钩吻中毒的主要成分,严重威胁人民群众的生命健康。该文建立了分散固相萃取-高效液相色谱串联质谱(high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry,HPLC-MS/MS)法同时快速分析食品中10种钩吻生物碱...钩吻生物碱是引起钩吻中毒的主要成分,严重威胁人民群众的生命健康。该文建立了分散固相萃取-高效液相色谱串联质谱(high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry,HPLC-MS/MS)法同时快速分析食品中10种钩吻生物碱的方法。食品样品经1%(体积分数)HCl超声提取后调pH值至11~12,加入乙腈涡旋振荡提取后,以NaCl辅助分层离心,上清液经无水Na_(2)SO_(4)和C18脱水净化后,离心所得上清液吹干复溶,在电喷雾正离子模式(ESI^(+))下,采用多反应监测模式,以0.1%氨水-10 mmol/L乙酸铵溶液和乙腈为流动相,经Hilic(2.1 mm×100 mm×1.7μm)柱梯度洗脱分离测定,采用基质标曲外标法定量。结果表明,钩吻生物碱的基质效应为13.1%~3692.7%,在0.5~10.0 ng/mL线性良好,相关系数(R)在0.995以上,检出限和定量限分别为0.075~0.225 ng/g和0.250~0.750 ng/g,在4种食品基质中3个水平的加标回收率为79.3%~118.7%,相对标准偏差为0.1%~12.1%(n=6)。该方法操作简单、高效、灵敏度高,对误食钩吻引起的急性中毒事件诊断并采取必要措施保障生命安全具有重要现实意义。展开更多
文摘该研究以1株高毒力持留基因型(Hypervirulent Persistent Genotypes,HVPG)小肠结肠炎耶尔森氏菌Y2844为宿主菌,从广州市污水样本中分离纯化一株新型小肠结肠炎耶尔森氏菌烈性噬菌体vB_YenP_WW1(WW1)。WW1的全基因组序列长度为39589 bp,同噬菌体Escherichia phage P483的核苷酸序列相似性最高(92.77%)。耐受性实验结果表明,WW1能耐受较宽的温度(4~50℃)和pH值(5~11);消杀实验结果表明,WW1在28℃,8 h内显著抑制LB肉汤中小肠结肠炎耶尔森氏菌的生长。在4℃下作用24 h后,WW1可将猪肉表面小肠结肠炎耶尔森氏菌的数量由3.82 lg CFU/mL降低至2.67 lg CFU/mL,将牛奶中小肠结肠炎耶尔森氏菌的数量由5.41 lg CFU/mL降低至检测限以下。同时,WW1还可有效抑制小肠结肠炎耶尔森氏菌在聚乙烯及不锈钢表面形成的生物膜。综上所述,该研究分离的噬菌体WW1耐受性强,对小肠结肠炎耶尔森氏菌的生长及生物膜均具有显著的抑制作用,有望成为一种抑菌制剂用于防控食品及食品加工车间中污染的小肠结肠炎耶尔森氏菌。
