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鼠伤寒沙门菌yibT基因缺失株的构建及其生物学特性分析 被引量：3
1
作者 王涛 赵威 +3 位作者 裴芳樱 岳敏 王文魁 齐永华 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期338-345,共8页
为了探讨yibT基因对鼠伤寒沙门菌生物学特性的影响,采用λ-red同源重组技术构建鼠伤寒沙门菌CVCC541的yibT基因缺失株CVCC541ΔyibT,同时利用表达质粒pET28a构建yibT缺失株的基因回补株CVCC541ΔyibT/pyibT,研究野生株、缺失株、回补株... 为了探讨yibT基因对鼠伤寒沙门菌生物学特性的影响,采用λ-red同源重组技术构建鼠伤寒沙门菌CVCC541的yibT基因缺失株CVCC541ΔyibT,同时利用表达质粒pET28a构建yibT缺失株的基因回补株CVCC541ΔyibT/pyibT,研究野生株、缺失株、回补株之间的生长特性、生化特性、遗传稳定性、生物膜形成和应激环境抵抗力等生物学特性。结果表明,本研究成功构建了yibT基因缺失株CVCC541ΔyibT及其回补株CVCC541ΔyibT/pyibT,yibT基因的缺失不影响细菌的生化特性,该缺失株具有良好的遗传稳定性,但其生长特性较野生株及其回补株显著减缓,生物膜形成能力相较于野生株及其回补株有所减弱,缺失株在热应激环境以及正丁醇压力下表现出更强的耐受力。综上所述,yibT基因的缺失会影响鼠伤寒沙门菌的生长特性、生物膜形成、应激环境抵抗力和细菌形态等生物学特性,并且yibT基因可能影响鼠伤寒沙门菌菌膜的流动性。 展开更多
关键词 鼠伤寒沙门菌CVCC541 yibt基因 流动性 环境应激 耐受性
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YibT介导鼠伤寒沙门氏菌生物膜形成的分子机制研究 被引量：1
2
作者 岳敏 赵威 +5 位作者 王涛 李明杰 王冰冰 韩甜 齐永华 刘兴友 《动物医学进展》 北大核心 2022年第6期46-51,共6页
为了研究yibT基因在鼠伤寒沙门氏菌增殖过程中的作用及分子调控机制,采用基因工程方法提取沙门氏菌的RNA,反转录成cDNA,然后利用实时荧光定量PCR技术(RT-qPCR)检测WT、WTΔyibT、WTΔyibT/pyibT的lptA-G和Lpt转运蛋白及csgD、rpoS的信... 为了研究yibT基因在鼠伤寒沙门氏菌增殖过程中的作用及分子调控机制,采用基因工程方法提取沙门氏菌的RNA,反转录成cDNA,然后利用实时荧光定量PCR技术(RT-qPCR)检测WT、WTΔyibT、WTΔyibT/pyibT的lptA-G和Lpt转运蛋白及csgD、rpoS的信使核糖核酸(mRNA)表达水平,研究yibT基因对沙门氏菌生物膜形成的影响。结果表明,yibT基因缺失后,可不同程度致使转运蛋白lptA-G的mRNA表达水平下调(P<0.05),其中lptB下调最为显著(P<0.01);yibT缺失可导致csgD表达量(P<0.05)和rpoS表达量显著下调(P<0.01);当yibT回补过表达后可致csgD、rpoS的mRNA表达水平均有不同程度的上调(P<0.05);同时,yibT基因的缺失可导致yecF和uspB的mRNA表达水平均不同程度的下降(P<0.05)。因此,推测yibT基因可能通过参与介导脂多糖的转运与合成来影响鼠伤寒沙门氏菌的生物膜形成,其可能是一种全局转录调控因子或DNA聚合酶,通过影响菌体DNA的复制而调控鼠伤寒沙门氏菌的多个生物学过程。 展开更多
关键词 鼠伤寒沙门氏菌 yibt基因 生物膜 基因转录水平
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鼠伤寒沙门菌yibT和csgD双基因缺失株的构建及对生物膜形成的影响
3
作者 刘晓彤 王冰冰 +3 位作者 王治梅 刘菲凡 赵威 齐永华 《福建农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期879-887,共9页
【目的】通过构建鼠伤寒沙门菌(Salmonella typhimurium)yibT、csgD双基因缺失株及缺失株的回补株,探究其对鼠伤寒沙门菌生物膜形成的影响,以期为沙门菌的有效防控提供新策略。【方法】以鼠伤寒沙门菌野生株CVCC541(wild-type,WT)为研... 【目的】通过构建鼠伤寒沙门菌(Salmonella typhimurium)yibT、csgD双基因缺失株及缺失株的回补株,探究其对鼠伤寒沙门菌生物膜形成的影响,以期为沙门菌的有效防控提供新策略。【方法】以鼠伤寒沙门菌野生株CVCC541(wild-type,WT)为研究对象,利用λ-red同源重组技术构建yibT和csgD基因缺失株;利用重组载体技术构建其基因回补株;利用结晶紫染色法比较鼠伤寒沙门菌突变株生物膜形成能力的差异;通过苯酚-硫酸法测定胞外多糖含量、半固体平板测定运动能力的变化;比较不同突变菌株自聚集能力的变化;通过扫描电镜观察生物膜结构;最后利用荧光定量PCR技术鉴定生物膜形成过程中关键基因的mRNA表达水平。【结果】成功构建了鼠伤寒沙门菌yibT和csgD的双基因缺失株WTΔyibTΔcsgD和csgD基因单缺失株WTΔcsgD及基因缺失株的回补株WTΔcsgDΔyibT/pcsgD和WTΔcsgD/pcsgD。yibT和csgD基因的缺失降低了生物膜的形成能力、胞外多糖含量和自聚集能力,增强了运动能力;invF和sdiA基因的mRNA表达水平下降。【结论】yibT和csgD基因缺失会降低鼠伤寒沙门菌的生物膜形成能力。 展开更多
关键词 鼠伤寒沙门菌 yibt基因 csgD基因 生物膜
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