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四引物扩增受阻突变体系PCR检测水稻白叶枯病抗性基因xa5的优化与应用
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作者 何开碧 武帅民 +4 位作者 尤一航 李瑶 王平 印汉 夏志辉 《种子》 北大核心 2025年第3期222-226,共5页
xa5是水稻抗白叶枯病的隐性基因,其与显性感病等位基因Xa5的功能差异源于Xa5基因开放阅读框116号和117号的TC碱基被替换为AG。为开发稳定且易于识别的共显性功能标记以辅助分子育种,基于四引物扩增受阻突变体系PCR(Tetra-primer ARMS-P... xa5是水稻抗白叶枯病的隐性基因,其与显性感病等位基因Xa5的功能差异源于Xa5基因开放阅读框116号和117号的TC碱基被替换为AG。为开发稳定且易于识别的共显性功能标记以辅助分子育种,基于四引物扩增受阻突变体系PCR(Tetra-primer ARMS-PCR)原理,设计了六组四引物组合。通过优化引物设计及反应体系,筛选出可在1%琼脂糖凝胶电泳中清晰区分xa5纯合子(400/157 bp)、Xa5纯合子(400/289 bp)及杂合子(400/289/157 bp)的共显性标记(组合T5)。该标记经F_(2)群体验证符合孟德尔分离规律(χ^(2)=0.93),且抗病表型与基因型一致。 展开更多
关键词 白叶枯病 xa5 四引物扩增受阻突变体系PCR 功能标记
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水稻抗白叶枯病基因xa5的原核表达及蛋白纯化 被引量:2
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作者 范玉龙 张梦诗 +2 位作者 李明容 翟文学 夏志辉 《热带农业科学》 2015年第3期36-40,共5页
水稻是重要的粮食作物,其产量高低与病虫害等因素密切相关,由黄单胞杆菌引起的水稻白叶枯病是导致水稻产量减少的主要病害之一。控制白叶枯病最安全、经济有效的方法是培育抗病品种,隐性抗病基因xa5是重要的水稻白叶枯病抗性基因。通过... 水稻是重要的粮食作物,其产量高低与病虫害等因素密切相关,由黄单胞杆菌引起的水稻白叶枯病是导致水稻产量减少的主要病害之一。控制白叶枯病最安全、经济有效的方法是培育抗病品种,隐性抗病基因xa5是重要的水稻白叶枯病抗性基因。通过构建显性及隐性xa5基因的原核表达载体(PGEX-4T-1-Xa5和PGEX-4T-1-xa5),转化大肠杆菌BL21,经0.2 mmol/L IPTG 28℃诱导4 h,表达显性Xa5和隐性xa5蛋白;结合western-blotting分析,结果表明表达的蛋白是带有GST标签的融合蛋白,最后利用谷胱甘肽亲和层析柱将蛋白纯化,为后期研究xa5基因的功能提供基础。 展开更多
关键词 水稻 白叶枯病 xa5 原核表达 蛋白纯化 western-blotting
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水稻抗白叶枯病Ⅴ型菌xa5基因利用现状及前景 被引量:5
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作者 成太辉 陈深 +4 位作者 杨健源 朱小源 伍圣远 洪启金 曾列先 《广东农业科学》 CAS 2020年第1期92-97,共6页
近年,水稻白叶枯病强毒菌系Ⅴ型菌在华南稻区快速发展,已上升为优势种群,并向浙江、江苏等南方稻区蔓延。在Ⅴ型菌重发稻区水稻品种普遍发病较重,对水稻生产威胁很大,加强抗病品种的选育和推广刻不容缓。防治水稻白叶枯病最经济有效的... 近年,水稻白叶枯病强毒菌系Ⅴ型菌在华南稻区快速发展,已上升为优势种群,并向浙江、江苏等南方稻区蔓延。在Ⅴ型菌重发稻区水稻品种普遍发病较重,对水稻生产威胁很大,加强抗病品种的选育和推广刻不容缓。防治水稻白叶枯病最经济有效的措施是利用抗病基因培育抗病品种推广种植。广东省农业科学院植物保护研究所与广州市番禺区农业科学研究所合作,利用携带抗Ⅴ型菌隐性基因xa5的国际水稻品种IRBB5,结合稻瘟病抗源,应用杂交、复交、系谱选育和抗病性同步鉴定等方法,先后选育出抗白叶枯病强毒菌系Ⅴ型菌(1~3级),兼抗稻瘟病(中抗至高抗),米质优良(广东省标优质3级),产量与主栽品种相当(与区试对照品种比较)系列水稻新品种白香占、白粳占和白丝占,这些抗病新品种在粤西沿海白叶枯病强毒系Ⅴ型菌重发区推广种植,突显出利用品种抗性防控白叶枯病的优势和广泛的应用前景。 展开更多
关键词 水稻 xa5基因 白叶枯病Ⅴ型菌 抗病育种
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A Single-Tube, Functional Marker-Based Multiplex PCR Assay for Simultaneous Detection of Major Bacterial Blight Resistance Genes Xa21, xa13 and xa5 in Rice 被引量:1
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作者 S.K. Hajira R.M. Sundaram +14 位作者 G.S.Laha A.Yugander S.M.Balachandran B.C.Viraktamath K.Sujatha C.H.Balachiranjeevi K.Pranath M.Amla S.Bhaskar V.Abhilash H.K.Mahadevaswamy M.Kousik T.DilipKumar G.Harika G.Rekha 《Rice science》 SCIE CSCD 2016年第3期144-151,共8页
In marker-assisted breeding for bacterial blight(BB) resistance in rice, three major resistance genes, viz., Xa21, xa13 and xa5, are routinely deployed either singly or in combinations. As efficient and functional mar... In marker-assisted breeding for bacterial blight(BB) resistance in rice, three major resistance genes, viz., Xa21, xa13 and xa5, are routinely deployed either singly or in combinations. As efficient and functional markers are yet to be developed for xa13 and xa5, we have developed simple PCR-based functional markers for both the genes. For xa13, we designed a functional PCR-based marker, xa13-prom targeting the In Del polymorphism in the promoter of candidate gene Os8N3 located on chromosome 8 of rice. With respect to xa5, a multiplex-PCR based functional marker system, named xa5 FM, consisting of two sets of primer pairs targeting the 2-bp functional nucleotide polymorphism in the exon II of the gene TFIIA5(candidate for xa5), has been developed. Both xa13-prom and xa5 FM can differentiate the resistant and susceptible alleles for xa13 and xa5, respectively, in a co-dominant fashion. Using these two functional markers along with the already reported functional PCR-based marker for Xa21(p TA248), we designed a single-tube multiplex PCR based assay for simultaneous detection of all the three major resistance genes and demonstrated the utility of the multiplex marker system in a segregating population. 展开更多
关键词 RICE BACTERIAL blight resistance xa5 xa13 XA21 FUNCTIONAL MARKER multiplex PCR
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Utilization Situation and Prospect of Gene xa5 Against Pathotype Ⅴ of Rice Bacterial Blight
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作者 Taihui CHENG Shen CHEN +4 位作者 Jianyuan YANG Xiaoyuan ZHU Shengyuan WU Qijin HONG Liexian ZENG 《Agricultural Biotechnology》 CAS 2020年第6期17-21,共5页
In recent years,the strong virulence pathotype Ⅴ of rice bacterial blight grew up quickly in Southern China,which has become a major population and spread to the rice regions of Jiangsu and Zhejiang provinces in Sout... In recent years,the strong virulence pathotype Ⅴ of rice bacterial blight grew up quickly in Southern China,which has become a major population and spread to the rice regions of Jiangsu and Zhejiang provinces in Southern China.Since pathotype Ⅴ caused serious bacterial blight disease in rice production regions,it is urgent to breed and promote resistant varieties against pathotype Ⅴ.The most economic and effective measure to control rice bacterial blight is to breed resistant cultivars for widely planting using resistance genes.The Institute of Plant Protection,Guangdong Academy of Agricultural Sciences,and Agricultural Science Research Institute of Panyu District of Guangzhou used IRBB5 carrying the recessive xa5 gene from IRRI that is resistant to pathotype Ⅴ to breed resistant varieties with rice blast resistance source,through hybridization,multiple cross,pedigree selection and synchronous resistance evaluation.We successfully bred series of new resistant rice varieties such as Baijiangzhan,Baijingzhan and Baisizhan,which showed resistance to strong virulence pathotype Ⅴ(grade 1-3)of bacterial blight and rice blast(mediate to high resistance),good grain quality(level 3 of rice quality of Guangdong),and yield equivalent to major cultivars(compared with region trial control cultivars of Guangdong).These new resistant varieties were promoted and planted in the strong virulence pathotype Ⅴ region along the west coast of Guangdong,which showed favorable superiority and wide application prospect in controlling rice bacterial blight with resistance varieties. 展开更多
关键词 RICE xa5 gene PathotypeⅤof rice bacterial blight Breeding for disease resistance
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黄单胞菌(Xanthomonas campestris)XA5-5β-葡萄糖苷酶基因的克隆与表达 被引量:6
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作者 邹文 刘纯强 +1 位作者 高东 王祖农 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第4期271-278,共8页
以黄单胞菌(Xanthomonas campestris)XA5-5为供体菌,广泛寄主质粒pRK404为载体,在大肠杆菌中克隆了一个β-葡萄糖苷酶基因,重组质粒pLZS1外源片段为1.1kb,将pLZS1接合导入黄单胞菌XA5-5,得到了克隆子XA5-5(pLZS1).以水杨苷为底物,XA5-5(... 以黄单胞菌(Xanthomonas campestris)XA5-5为供体菌,广泛寄主质粒pRK404为载体,在大肠杆菌中克隆了一个β-葡萄糖苷酶基因,重组质粒pLZS1外源片段为1.1kb,将pLZS1接合导入黄单胞菌XA5-5,得到了克隆子XA5-5(pLZS1).以水杨苷为底物,XA5-5(pLZS1)的酶活性大大高于E.Coli JM83(pLZS1).并且质粒在XA5-5中能相对稳定地存在.初步结果表明,所克隆的基因编码的产物对于水杨苷底物有较强的亲和力,并可以在一定程度上降低XA5-5中酶与pNPG底物的亲和力,使其酶活减小. 展开更多
关键词 黄单胞菌 β 葡萄糖甙酶 基因
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水稻含隐性抗白叶枯病基因xa5的24kb片段的鉴定与基因预测 被引量:7
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作者 钟义明 江光怀 +4 位作者 陈学伟 夏志辉 李晓兵 朱立煌 翟文学 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第19期2057-2061,共5页
水稻xa5基因是具有重要研究和育种价值的隐性广谱抗白叶枯病基因。利用水稻品系IR24及其近等基因系IRBB5(含xa5基因)杂交组合,构建了含4892个单株的F_2定位群体。同时,利用与xa5连锁的RFLP标记筛查含xa5基因的水稻抗性品系IRBB56的BAC文... 水稻xa5基因是具有重要研究和育种价值的隐性广谱抗白叶枯病基因。利用水稻品系IR24及其近等基因系IRBB5(含xa5基因)杂交组合,构建了含4892个单株的F_2定位群体。同时,利用与xa5连锁的RFLP标记筛查含xa5基因的水稻抗性品系IRBB56的BAC文库,构建了一个覆盖目标基因位点的长约213 kb的跨叠克隆群。根据国际水稻基因组和中国超级杂交稻基因组序列,以及跨叠克隆群的部分亚克隆测序,设计了一系列SSLP和CAPS标记对目标基因进行精细遗传定位。xa5基因定位在2个CAPS标记K5和T4之间且与T2共分离,标记K5和T4之间的遗传距离为0.3 cM,物理距离约为24 kb。对xa5基因所在的24 kb片段DNA序列进行基因预测,揭示出可能编码ABC转运蛋白和转录因子TFIIA小亚基的2个基因。对这一区段及其编码基因的功能研究将阐明xa5抗白叶枯病的分子机制。 展开更多
关键词 水稻 含隐性抗白叶枯病基因 xa5基因 24kb片段 基因鉴定 基因预测 跨叠克隆群 抗病机制
原文传递
水稻抗白叶枯病种质资源筛选及抗性基因鉴定 被引量:2
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作者 钟小惠 蒋哲 +4 位作者 陆守腾 黄福钢 王彩先 农保选 邱永福 《华南农业大学学报》 CSCD 北大核心 2024年第2期199-206,共8页
【目的】筛选抗水稻白叶枯病Ⅴ和Ⅸ型菌的水稻品种。【方法】以97个收集自热带亚热带地区的抗褐飞虱水稻品种为待测样品,水稻白叶枯病Ⅴ、Ⅸ型菌为菌种。用剪叶接种法鉴定水稻在苗期和成株期的抗白叶枯病能力并划分抗性等级。对抗性表... 【目的】筛选抗水稻白叶枯病Ⅴ和Ⅸ型菌的水稻品种。【方法】以97个收集自热带亚热带地区的抗褐飞虱水稻品种为待测样品,水稻白叶枯病Ⅴ、Ⅸ型菌为菌种。用剪叶接种法鉴定水稻在苗期和成株期的抗白叶枯病能力并划分抗性等级。对抗性表现优异的品种构建定位群体,并进行基因定位及克隆。【结果】筛选出苗期抗Ⅴ型菌的水稻品种20个,成株期8个,2个时期均表现为中抗及以上的品种4个;苗期抗Ⅸ型菌的水稻品种34个,成株期9个,2个时期均表现为中抗及以上的品种1个。其中,供试水稻品种‘BX02’在2个时期对Ⅴ型菌株抗性表现极佳。‘BX02’与‘9311’杂交构建的F2遗传群体,抗性位点被定位在5号染色体,极大似然函数值达到40.6,该区间包含已克隆的水稻抗白叶枯病Ⅴ型菌xa5基因,序列扩增分析验证为白叶枯抗性基因xa5。【结论】筛选出在2个时期均抗白叶枯病Ⅴ型菌的水稻品种4个,抗Ⅸ型的水稻品种1个,为水稻抗白叶枯种质资源筛选提供了基础材料。 展开更多
关键词 稻种资源 水稻白叶枯病 基因定位 xa5 抗性基因
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Identification and gene prediction of a 24 kbregion containing xa5,a recessive bacterial blight resistance gene in rice(Oryza sativa L.)
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作者 ZHONGYiming JIANGGuanghuai +4 位作者 CHENXuewei XIAZhihui LIXiaobing ZHULihuang ZHAIWenxue 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 2003年第24期2725-2729,共5页
Rice xa5 gene provides recessive, race-specific resistance to bacterial blight disease caused by the pathogen Xanthomonas oryzae pv. oryzae and has great value for re-search and breeding. In an effort to clone xa5, an... Rice xa5 gene provides recessive, race-specific resistance to bacterial blight disease caused by the pathogen Xanthomonas oryzae pv. oryzae and has great value for re-search and breeding. In an effort to clone xa5, an F2 popula-tion of 4892 individuals was developed from the xa5 near isogenic lines, IR24 and IRBB5. A fine mapping procedure was conducted and tightly linked RFLP markers were used to screen a BAC library of IRBB56, a resistant rice line con-taining the xa5 gene. A 213 kb contig covering the xa5 locus was constructed. According to the sequences from the Inter-national Rice Genome Sequening Project (IRGSP), the Chi-nese Superhybrid Rice Genome Project (SRGP) and some sub-clones of the contig, twelve SSLP and CAPS markers were developed for fine mapping. The xa5 gene was mapped to a 0.3 cM interval between markers K5 and T4, which spanned an interval of approximately 24 kb, co-segregating with marker T2. Sequence analysis of the 24 kb region re-vealed that an ABC transporter and a basal transcription factor (TFIIa) were potential candidates for the xa5 resis-tance gene product. The molecular mechanism by which the xa5 gene provides recessive, race-specific resistance to bacte-rial blight will be elucidated by the functional tests of the 24 kb DNA and the candidate genes. 展开更多
关键词 细菌疫病 抗病性基因 DNA
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兼抗白叶枯病和细条病水稻材料的创新及育种利用 被引量:4
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作者 罗同平 黄春东 +7 位作者 张月雄 秦媛媛 岑贞陆 刘驰 韦敏益 秦钢 马增凤 黄大辉 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2022年第9期2038-2045,共8页
【目的】探讨抗白叶枯病兼抗细条病基因在杂交稻抗性改良利用中的可行性,为丰富我国水稻育种遗传基础提供参考依据。【方法】利用分子标记方法对102份水稻品种资源(材料)进行抗白叶枯病兼抗细条病xa5基因筛选。以携带xa5基因且对白叶枯... 【目的】探讨抗白叶枯病兼抗细条病基因在杂交稻抗性改良利用中的可行性,为丰富我国水稻育种遗传基础提供参考依据。【方法】利用分子标记方法对102份水稻品种资源(材料)进行抗白叶枯病兼抗细条病xa5基因筛选。以携带xa5基因且对白叶枯病和细条病具有良好兼抗性的亲本为抗源,与感病栽培稻杂交,通过系谱法,结合分子标记辅助选择,培育优良杂交稻恢复系。优良恢复系与不育系组配出强优势组合,分析强优势组合的抗性和综合农艺性状。【结果】从102份水稻品种资源(材料)中筛选出兼抗白叶枯病和细条病xa5基因的稻种资源17份,经抗性鉴定,DP3、IRBB5、N36、N776、N777、N779和P89对白叶枯病和细条病均表现较好的兼抗性。以广恢998为母本、以DP3与9311的杂交后代优良单株Y240-1为父本进行杂交,结合分子标记辅助选择,经多代自交选育,培育出含xa5基因的优良恢复系野香占。以野香占为父本、不育系平丰A为母本组配出强优势杂交组合平丰优香占。该组合对白叶枯病和细条病均表现为中抗,同时中抗稻瘟病,米质达到部标2级优质米标准。【结论】抗水稻白叶枯病兼抗细条病的xa5基因具有部分显性效应,可用于杂交水稻育种改良;培育出含有野生稻血缘的野香占能组配出中抗白叶枯病和细条病强优势水稻杂交组合,有助于丰富和拓宽水稻育种遗传基础。 展开更多
关键词 水稻 xa5基因 育种 白叶枯病 细条病
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水稻白叶枯病基因的作用机制与育种应用 被引量:3
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作者 李香荣 何秀英 +6 位作者 陈浩 陆展华 王晓飞 王石光 方志强 巫浩翔 刘维 《广东农业科学》 CAS 2022年第9期31-41,共11页
水稻是世界上最重要的粮食作物之一,水稻病害是其产量损失的重大威胁,由革兰氏阴性菌稻黄单胞杆菌所引起的白叶枯病是严重影响水稻产量的三大主要病害之一。传统的化学防治方法存在很多弊端,抗白叶枯病水稻品种的培育是世界公认防治该... 水稻是世界上最重要的粮食作物之一,水稻病害是其产量损失的重大威胁,由革兰氏阴性菌稻黄单胞杆菌所引起的白叶枯病是严重影响水稻产量的三大主要病害之一。传统的化学防治方法存在很多弊端,抗白叶枯病水稻品种的培育是世界公认防治该病害最为安全、有效的手段,抗病种质资源鉴定与抗性基因挖掘是抗病品种培育的前提。在自然和人工双重选择压力下,白叶枯病菌不断变异,陆续出现了新型致病变种,主栽品种逐渐失去抗病性,因此发掘和鉴定更多的持久抗病基因显得非常必要。对已克隆的16个白叶枯病抗性基因进行简要归类,并从基因的发现、定位、克隆、作用机制等方面对广谱抗白叶枯病且应用较好的3个基因Xa23、Xa7和xa5进行详细阐述,对白叶枯病抗性育种方法分子标记辅助选择育种、转基因育种和基因标记育种进行介绍。此外,结合不同白叶枯病基因的自身特性及当前育种利用中存在的问题,展望白叶枯广谱抗病分子育种的未来方向。 展开更多
关键词 水稻 白叶枯病 XA23 Xa7 xa5 育种应用
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