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4例A抗原表达减弱样本的血清学特点及基因序列分析
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作者 田稳 徐宁 +4 位作者 吴天鸽 史鸣昊 李峣 裴笑仙 于娜 《临床输血与检验》 2025年第2期186-191,共6页
目的对4例ABO血型正、反定型不符的样本进行血清学检测和基因序列分析,为患者的血型做出准确判断。方法血清学方法检测疑似A亚型的样本,对样本基因序列进行Sanger双向测序,软件分析对比,应用血清学联合基因检测分析基因型和表型。结果4... 目的对4例ABO血型正、反定型不符的样本进行血清学检测和基因序列分析,为患者的血型做出准确判断。方法血清学方法检测疑似A亚型的样本,对样本基因序列进行Sanger双向测序,软件分析对比,应用血清学联合基因检测分析基因型和表型。结果4例样本中2例基因序列分别与ABO*AEL.08/ABO*O.01.01和ABO*AEL.03/ABO*B.02相符,表型为Ael型;1例基因序列符合ABO*AW.37/ABO*B.01,表型为A_(weak)B型;1例在外显子6上发生287G>T杂合突变,在ISBT数据库中未检索到此突变,怀疑是发生在ABO*A1.02链上新的突变位点。结论血清学联合分子生物学检测可对正、反定型不符的样本做出进一步判断,从而保障临床患者输血安全、有效。本文所总结的A抗原表达减弱样本的血清学特点和基因序列分析结果可为A亚型的鉴定提供数据支持。 展开更多
关键词 弱A抗原 A亚型 基因位点突变 分子测序
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1种ABO等位基因新突变组合鉴定及蛋白结构分析
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作者 杨红梅 马思飞 +2 位作者 邹昕 钱程 徐立 《现代医药卫生》 2025年第8期1809-1813,共5页
目的分析1种ABO等位基因新突变组合标本的血清学和分子生物学特征,结合蛋白三维结构模型探究其遗传分子机制。方法2023年10月该实验室采用常规血清学方法对1例无偿献血的先证者及家系成员进行ABO血型鉴定,使用Sanger测序进行ABO基因分型... 目的分析1种ABO等位基因新突变组合标本的血清学和分子生物学特征,结合蛋白三维结构模型探究其遗传分子机制。方法2023年10月该实验室采用常规血清学方法对1例无偿献血的先证者及家系成员进行ABO血型鉴定,使用Sanger测序进行ABO基因分型,采用PacBio三代长读单分子实时测序分析ABO全基因包括侧翼调控区域,使用DynaMut构建野生型和突变型糖基转移酶(GTA)三维分子模型,通过PROVEAN和PolyPhen2预测突变对酶功能及蛋白稳定性的影响。结果先证者和父亲血清学结果均为AweakB,基因分型结果为Ax24/B101;ABO基因检测结果与ABO*A1.01序列对比:2个样本均存在297A>G、467C>T、526C>G、657C>T、703G>A、796C>A、803G>C、838C>T和903G>A突变,在ISBT数据库中暂未检索到此种突变组合基因型;三代测序为ABO*A3.new/ABO*B.01,导致多肽链p.Leu280Phe(L280F)替换。GTA三维分子建模提示L280F突变导致蛋白结构中氢键和水介导氢键数量减少,相应弱氢键、弱水介导氢键数量增加和原子间相互作用发生变化影响蛋白结构的稳定性。结论在ABO第7外显子发现1种新的等位基因突变组合——467C>T、838C>T,该错义突变导致氨基酸替换影响酶活性改变,从而出现A抗原弱表达现象,且能稳定遗传。 展开更多
关键词 ABO基因 抗原弱表达 基因测序 3D分子模型
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微孔板法筛查RhCE抗原关键参数及RHCE基因多态性分析
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作者 杨红梅 陈敏洁 +3 位作者 邹昕 马思飞 熊玉琪 邹书英 《交通医学》 2025年第1期13-17,共5页
目的:研究适合微孔板法检测RhCE抗原的最优条件,分析常州地区献血人群RHCE基因型及表型特征。方法:选取2558例无偿献血者血标本,以试管法为标准,凝集试验为原理,研究微孔板法不同抗体容量、红细胞浓度及振荡频率、时间对反应结果的影响... 目的:研究适合微孔板法检测RhCE抗原的最优条件,分析常州地区献血人群RHCE基因型及表型特征。方法:选取2558例无偿献血者血标本,以试管法为标准,凝集试验为原理,研究微孔板法不同抗体容量、红细胞浓度及振荡频率、时间对反应结果的影响,建立试验反应和关键参数。对RhCE抗原弱表达样本进行RHCE基因10个外显子测序。结果:选取待检红细胞浓度为4%、单克隆试剂抗体容量比例为1∶1的反应体系,按1100 r/min频率震荡120 s、450 r/min频率震荡900 s、1100r/min震荡60 s和30 r/min震荡180 s 4次,读取的结果与手工试管法一致率达99.96%。2558例中表型CCDee占43.47%,CcDEe占35.49%,ccDEE占8.37%,CcDee占8.21%,ccDEe占3.05%,CCDEe占0.71%,ccDee占0.39%,CcDEE占0.31%,未见CCDEE表型。10例RHCE抗原弱表达基因多态性为RHCE*01/*03和RHCE*04/*03,发现1例RHCE*04/*02*new。结论:RhCE抗原在献血人群中具有基因多态性特征,存在稀有基因型,建立微孔板法筛查RhCE抗原试验关键参数为大规模筛查献血人群中RHCE基因多态性提供试验方法。新核苷酸突变位点为RHCE变异型发生机制研究提供样本来源,为RHCE精准输血提供基础。 展开更多
关键词 微孔板法 关键参数 抗原弱表达 RhCE抗原筛查
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新生儿ABO血型抗原弱表达的基因分析 被引量:2
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作者 杨佳丽 赵鼎 +3 位作者 李巍 张笑盼 李志浩 田冬冬 《中国输血杂志》 2025年第1期85-90,96,共7页
目的对新生儿ABO血型抗原弱凝集和混合凝集的标本进行基因分析,探讨新生儿ABO亚型分子生物学特性。方法采用试管法和微柱凝胶法进行ABO血型的血清学鉴定,PCR法扩增其ABO基因第2~7外显子,扩增产物用Sanger测序法进行基因测序,判断基因型... 目的对新生儿ABO血型抗原弱凝集和混合凝集的标本进行基因分析,探讨新生儿ABO亚型分子生物学特性。方法采用试管法和微柱凝胶法进行ABO血型的血清学鉴定,PCR法扩增其ABO基因第2~7外显子,扩增产物用Sanger测序法进行基因测序,判断基因型。结果14例新生儿ABO血型血清学结果中A抗原减弱8例,B抗原减弱6例,有7例标本检出ABO亚型等位基因,基因型分别为A102/B101+c.538C>T、Aw26/B102、A205/O02、A205/B101(2例)、Aw26/O02、B(A)06/O01、B101/O01(3例)、A102/O01(2例)、A102/B101、B101/O02。此外,在对携带B(A)06等位基因患者的家系调查中发现另外3名家庭成员同样携带该等位基因。结论对于新生儿ABO血型鉴定中抗原减弱的标本,除了年龄因素有必要考虑ABO亚型的可能,借助基因检测可防止新生儿ABO亚型的漏检。 展开更多
关键词 新生儿 ABO血型 抗原弱表达 ABO亚型 基因测序
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罕见A抗原弱表达血型患者的血清学及基因突变特征临床研究
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作者 郭华 邝振展 +2 位作者 赵颖 袁翰阳 蔡德丰 《医师在线》 2025年第5期60-63,共4页
目的对1例A抗原弱表达血型患者的血清学特点及基因突变特征进行分析,探讨A抗原弱表达产生的原因。方法采用盐水法、微柱凝集试验和吸收放散试验等血清学检测鉴定患者的ABO血型;通过ABO基因外显子测序和单倍体分型分析等分子生物学检测,... 目的对1例A抗原弱表达血型患者的血清学特点及基因突变特征进行分析,探讨A抗原弱表达产生的原因。方法采用盐水法、微柱凝集试验和吸收放散试验等血清学检测鉴定患者的ABO血型;通过ABO基因外显子测序和单倍体分型分析等分子生物学检测,明确患者血型的基因型及突变情况;以“ABO血型检测方法”和“ABO血型A亚型”为关键词,对中国知网(CNKI)和科学引文索引(SCI)数据库中2005年~2024年发表的文献进行检索。结果患者ABO血型正定型提示O型血,反定型提示A型血,正反定型结果不符;吸收放散试验结果提示患者红细胞表面抗原可能为A型;ABO基因外显子测序结果显示,患者为杂合子,携带261G/del、467C>T和664G>A突变;单倍体分型分析结果显示,c.664G>A和c.467C>T突变位于同一染色体(ABO^(*)A1.02)上,261G/del突变位于另一同源染色体(O.01.01)上。因此,该患者血型基因为ABO^(*)A1.02(携带突变664G>A)/O.01.01杂合子。文献检索共检索到文献75篇,排除25篇,最终保留文献50篇,结合病例学习和文献学习发现,c.664G>A突变可能导致糖基转移酶A(GTA)活性降低,与A抗原弱表达相关。结论患者血型基因为罕见的ABO^(*)A1.02(突变)/O.01.01杂合导致的A亚型,突变位点c.664G>A位于等位基因ABO^(*)A1.02上,是导致A抗原弱表达的原因。当血清学方法不能准确鉴定患者血型时,应采用分子生物学方法,以了解血型基因型,确保输血安全。 展开更多
关键词 血型 A抗原 c.664G>A A抗原弱表达 突变
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急性白血病ABO抗原减弱患者与抗原正常患者的对比研究 被引量:11
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作者 邵明 吕先萍 +6 位作者 汤平 杨乾坤 朱伟涛 宋婕 孔永奎 王静 孙玲 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期1307-1313,共7页
目的:对比急性白血病ABO抗原减弱患者与抗原正常患者的差异,初步探索ABO抗原减弱现象在急性白血病中的临床意义。方法:对110例(AML 68例;ALL 42例)初治急性白血病患者及68例正常对照者进行ABO血型抗原凝集强度的检测,然后对比AL患者ABO... 目的:对比急性白血病ABO抗原减弱患者与抗原正常患者的差异,初步探索ABO抗原减弱现象在急性白血病中的临床意义。方法:对110例(AML 68例;ALL 42例)初治急性白血病患者及68例正常对照者进行ABO血型抗原凝集强度的检测,然后对比AL患者ABO抗原减弱组与抗原正常组在一般资料、临床特征、实验室检查、白血病危险度分级及ABO基因启动子甲基化水平等因素之间的差别。结果:110例急性白血病患者中有9例出现ABO抗原减弱,均为AML患者。ALL组和健康对照组ABO血型均无抗原减弱现象。ABO抗原减弱组与抗原表达正常(ALL)组在ABO血型分布、年龄、肝脾淋巴结肿大、血小板计数、骨髓原幼细胞比例、免疫表型、LDH、危险度分级等方面无明显统计学差异(P>0.05)。抗原减弱组男性比例明显高于抗原正常组(77.8%vs 30%),白细胞计数和血红蛋白平含量均明显低于抗原正常组(32.26×10~9/L vs 82.69×10~9/L)(64.00 g/L vs 85.94 g/L),ABO基因启动子甲基化程度明显高于抗原正常组(18.91%vs 10.76%)(P<0.05)。结论:ABO抗原减弱患者以AML男性患者最多见,ABO血型抗原减弱患者ABO基因启动子甲基化水平明显高于抗原正常患者。 展开更多
关键词 急性白血病 ABO血型 抗原减弱 正常ABO抗原
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一例罕见A^(el)08的血清学鉴定及基因测序 被引量:8
7
作者 丁琴丽 凌止发 +2 位作者 赖蜜 邹丽萍 邱芳 《中国输血杂志》 CAS 北大核心 2017年第2期197-198,共2页
目的通过对本实验室1例正反定型不符的骨科患者标本进行血型鉴定,探讨ABO亚型鉴定的重要意义。方法应用常规试验以及吸收放散试验等血清学方法和ABO基因直接测序进行鉴定。结果患者红细胞上含有弱A抗原,血清中检出了不规则抗-A_1,ABO血... 目的通过对本实验室1例正反定型不符的骨科患者标本进行血型鉴定,探讨ABO亚型鉴定的重要意义。方法应用常规试验以及吸收放散试验等血清学方法和ABO基因直接测序进行鉴定。结果患者红细胞上含有弱A抗原,血清中检出了不规则抗-A_1,ABO血型为A^(el)亚型,其基因型为Ael08/O02。结论 A亚型最主要的血清学特征是红细胞抗原数量的减少,红细胞与试剂血清表现为弱凝集或者不凝集,易误定为O型,给患者输血带来风险。在日常工作中重视ABO亚型的存在,能够减少临床输血反应,保证临床输血安全。 展开更多
关键词 A^el亚型 弱抗原 不规则抗体 基因直接测序 输血安全
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对乙型肝炎表面抗原弱阳性结果进行确认试验的应用研究 被引量:13
8
作者 王文武 曹树正 +1 位作者 杨杰 张真路 《检验医学》 CAS 北大核心 2010年第4期301-303,共3页
目的评估抗体中和确认试验在乙型肝炎表面抗原(HBsAg)低值弱阳性标本中的应用。方法将由微粒子酶免疫发光法(MEIA)检测的HBsAg结果(S/CO)在1.0-10.0之间的111份弱阳性血清标本进行抗体中和确认试验,并进行乙型肝炎病毒(HBV)酶... 目的评估抗体中和确认试验在乙型肝炎表面抗原(HBsAg)低值弱阳性标本中的应用。方法将由微粒子酶免疫发光法(MEIA)检测的HBsAg结果(S/CO)在1.0-10.0之间的111份弱阳性血清标本进行抗体中和确认试验,并进行乙型肝炎病毒(HBV)酶联免疫吸附试验(ELISA),对比各试验结果间的差异。结果抗体中和确认试验阳性92例(82.9%),ELISA检测阳性47例(42.3%),2项试验检测结果间差异有统计学意义(P=0.033)。结论对HBsAg低值弱阳性标本,ELISA检测漏检率很高,敏感性和特异性均不佳;抗体中和确认试验可做为HBsAg弱阳性标本进一步确认的手段。 展开更多
关键词 乙型肝炎表面抗原 弱阳性 抗体中和确认试验 酶联免疫吸附试验
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中和确认试验在电化学发光免疫法检测乙型肝炎表面抗原弱反应性中的价值探讨 被引量:9
9
作者 胡尧 刘维薇 黄志基 《检验医学》 CAS 2013年第3期218-220,共3页
目的对电化学发光免疫法(ECLIA)检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)弱反应性的标本进行中和确认试验,并对确认结果进行分析。方法筛选ECLIA检测HBsAg弱反应性(COI值在1.00~50.00之间)的100例标本进行中和确认试验,并对确认结果进行分析。结果... 目的对电化学发光免疫法(ECLIA)检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)弱反应性的标本进行中和确认试验,并对确认结果进行分析。方法筛选ECLIA检测HBsAg弱反应性(COI值在1.00~50.00之间)的100例标本进行中和确认试验,并对确认结果进行分析。结果 100例HBsAg弱反应性标本经确认试验确认阳性87例(87.0%),阴性10例(10.0%),不确定3例(3.0%)。受试者工作特征(ROC)曲线分析结果显示,当ECLIA检测HBsAg的COI值为1.97时,特异性可达100.0%,敏感性为83.9%。结论中和确认试验可作为HBsAg弱反应性标本进一步确认的手段;ECLIA对弱反应性HBsAg检测敏感性高,特异性好;当ECLIA检测HBsAg的COI值>2.00时,一般可以排除假阳性的可能,无需进一步做确认试验。 展开更多
关键词 中和确认试验 乙型肝炎表面抗原 弱反应性 电化学发光免疫法
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确认试验在乙型肝炎表面抗原弱阳性标本中的临床应用 被引量:7
10
作者 刘孙琴 张雄 +1 位作者 董明国 程静 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期2152-2153,共2页
目的探讨确认试验在乙型肝炎表面抗原(HBsAg)弱阳性标本中的临床应用。方法对酶联免疫吸附试验(ELISA)检测的HBsAg结果在0.875~2.857的血清标本进行抗体中和确认试验,并进行微粒子酶免疫发光(MEIA)试验,对比各试验结果间的差异。... 目的探讨确认试验在乙型肝炎表面抗原(HBsAg)弱阳性标本中的临床应用。方法对酶联免疫吸附试验(ELISA)检测的HBsAg结果在0.875~2.857的血清标本进行抗体中和确认试验,并进行微粒子酶免疫发光(MEIA)试验,对比各试验结果间的差异。结果 ELISA检测阳性75份阳性率83.3%,抗体中和试验确认试验阳性76份阳性率84.4%,两项试验检测结果间差异有统计学意义(P〈0.01)。结论 ELISA试验检测HBsAg结果为弱阳性的标本,应进行确认试验,排除假阳性,保证样本结果的真实性,对减少医疗纠纷、防止医源性感染具有重要意义。 展开更多
关键词 抗体中和确认试验 酶联免疫吸附试验 乙型肝炎表面抗原 弱阳性
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RHD1227A型弱D的D抗原表位分析 被引量:3
11
作者 吴筱莹 何颖军 +1 位作者 徐红先 邵超鹏 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第24期2977-2980,共4页
目的分析携带RHD1227A等位基因的Rh血型弱D型个体的红细胞D抗原表位。方法采用常规血清学方法检测Rh血型D、C、c、E和e抗原表型,间接抗人球蛋白试验(IAT)确认D抗原,序列特异性引物-聚合酶链反应(PCR-SSP)测定RHD基因,并检测RHD杂合型。... 目的分析携带RHD1227A等位基因的Rh血型弱D型个体的红细胞D抗原表位。方法采用常规血清学方法检测Rh血型D、C、c、E和e抗原表型,间接抗人球蛋白试验(IAT)确认D抗原,序列特异性引物-聚合酶链反应(PCR-SSP)测定RHD基因,并检测RHD杂合型。对确认的弱D型,使用12种抗-D抗原不同表位的单克隆抗体,分析红细胞D抗原表位。结果血清学筛选和PCR-SSP检测鉴定出3例携带RHD1227A等位基因的弱D型样本,Rh小因子均为C+c+E-e+,RHD合子型鉴定均为RHD+/RHD-杂合型,提示3例个体基因型为CDe/cde。3例个体红细胞D抗原表位分析显示均具有基本完整D抗原表位,与Rh(D)阳性对照样本相同。结论发现3例RHD1227A型弱D型;不管RHD1227A等位基因表达DEL型或弱D型,其D抗原表位近似,均表达基本完整D抗原,提示该等位基因不同量的表达可能与其它调节因素有关。 展开更多
关键词 RH血型 D抗原 RHD基因 DEL 弱D型
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酸放散方法对弱D抗原的筛选研究 被引量:1
12
作者 童军 杨文冲 +3 位作者 刘颖 李永红 王天才 李勇 《中国实验诊断学》 2006年第9期1022-1023,共2页
目的目的确定用盐水抗D检测为D阴性的红细胞标本中是否存在Del型红细胞标本。方法将待检红细胞样本与人血清抗D抗体混合吸收。采用酸放散方法将致敏在红细胞上的抗D抗体放散下来,用微柱凝胶抗人球蛋白试剂卡及试管法检测放散液中是否存... 目的目的确定用盐水抗D检测为D阴性的红细胞标本中是否存在Del型红细胞标本。方法将待检红细胞样本与人血清抗D抗体混合吸收。采用酸放散方法将致敏在红细胞上的抗D抗体放散下来,用微柱凝胶抗人球蛋白试剂卡及试管法检测放散液中是否存在抗体。结果51份由盐水抗D确定为D阴性的红细胞样本中有3人用传统试管法抗人球蛋白实验检测为弱凝集;经酸放散实验后,检测放散液,此3人放散液中均存在较强的抗D抗体,以此确定此3人红细胞抗原为Del型。结论酸放散实验在临床输血中可做为确定红细胞上是否存在弱D抗原的敏感方法。 展开更多
关键词 酸放散 弱D抗原 筛选
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3例弱D表型献血者的RhD抗原表位和分子机制研究 被引量:3
13
作者 叶璐夷 谢莉 +1 位作者 贺云蕾 朱自严 《临床输血与检验》 CAS 2013年第2期97-100,共4页
目的研究3例RhD抗原表型为弱D型54的献血者的RhD抗原表位和分子机制。方法采用常规试剂对3例弱D型54样本进行Rh分型,并采用D-screen分析样本的RhD抗原表位。对RHD基因全部外显子测序并分析RHD基因杂合性。使用Robetta服务器进行模型构... 目的研究3例RhD抗原表型为弱D型54的献血者的RhD抗原表位和分子机制。方法采用常规试剂对3例弱D型54样本进行Rh分型,并采用D-screen分析样本的RhD抗原表位。对RHD基因全部外显子测序并分析RHD基因杂合性。使用Robetta服务器进行模型构建。结果 2例样本仅检出365C>T突变,1例样本检出365C>T杂合突变和1 227G>A杂合突变。经D-screen中全部抗体检测的2例样本表现出与部分D表型中DVII相同的D抗原表位分布,另1例未经D-screen全部抗体检测的样本与DVII的D抗原表位分布类似。同源建模分析显示弱D型54的胞内S122L突变也可能影响D抗原胞外区的蛋白结构。结论首次在中国人中报道了弱D型54,并首次分析了该表型的D抗原表位组成。弱D型54具有部分D表型的特征,可能引起同种免疫。 展开更多
关键词 弱D型54 RhD抗原表位 部分D
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乙型肝炎病毒表面抗原弱反应性样本的确认与分析 被引量:2
14
作者 刘香萍 汪小娟 李碧云 《检验医学与临床》 CAS 2009年第22期1899-1900,共2页
目的对酶联免疫吸附试验(ELISA)定性的乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)弱反应性样本进行确认及分析。方法收集经ELISA检测HBsAg的S/CO值为0.7~3.0的样本共613例,以中和试验确认,同时进行微粒子酶免疫方法(MEIA)检测,不确定病例继续随访。... 目的对酶联免疫吸附试验(ELISA)定性的乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)弱反应性样本进行确认及分析。方法收集经ELISA检测HBsAg的S/CO值为0.7~3.0的样本共613例,以中和试验确认,同时进行微粒子酶免疫方法(MEIA)检测,不确定病例继续随访。结果经确认共41例与ELISA判定结果不符,假阳性率4.9%,假阴性率10.7%;其中S/CO值0.9~1.2范围产生的假阴性率或假阳性率最高。中和试验和MEIA法检测结果基本一致,仅4例不符。结论ELISA检测HBsAg呈弱反应性,尤其是"灰区"结果应予以确认,中和试验和MEIA都是有效的方法,个别病例还需参考病史长期随访。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒表面抗原 中和试验 弱反应性/弱阳性 微粒子酶免疫方法
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乙肝表面抗原检测确认试验方法的建立 被引量:2
15
作者 刘荣静 尤芳芳 +2 位作者 习浩 吴晓蔓 邓小燕 《中国热带医学》 CAS 2011年第7期815-817,共3页
目的探讨建立适合国产ELISA试剂检测乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)阳性标本的确认试验方法。方法制备特异性抗-HBs(混合人血清抗-HBs),利用其可与临床样本中不同浓度的HBsAg发生中和反应来确定适合于实验的特异性抗-HBs浓度。根据临床需... 目的探讨建立适合国产ELISA试剂检测乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)阳性标本的确认试验方法。方法制备特异性抗-HBs(混合人血清抗-HBs),利用其可与临床样本中不同浓度的HBsAg发生中和反应来确定适合于实验的特异性抗-HBs浓度。根据临床需要确定最适反应时间。根据所测含不同浓度HBsAg临床标本的抑制率范围,选择最适抑制率阳性阈值。方法建立后,对临床标本进行检测,并与现有确认试剂盒比较,以检验实验方法的可靠性。结果试验方法所需特异性混合人血清抗-HBs浓度为2000IU/L,抑制率为50%,反应30min,对141例临床血清样本用确认试剂全部得到确认,对30份HBsAg阳性标本用本法与丽珠确认试剂作比对试验,二者结果一致,30份HBsAg阳性者均被确认。结论研究建立确认试验方法获得预期效果,适用于对HBsAg阳性标本的确认。 展开更多
关键词 乙肝炎病毒 HBSAG 确认试验 酶联免疫吸附测定法 弱反应性
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探讨ELISA方法中HBsAg弱阳性标本复查方式及其意义 被引量:5
16
作者 刘晓敏 郑炘 曾秋耀 《中国现代医生》 2010年第31期84-85,137,共3页
目的探讨酶联免疫吸附试验(ELISA)方法中乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)弱阳性标本复查方式,确保结果的准确可靠。方法用ELISA法筛查出144例如下的标本:①S/CO值0.8~0.99,14例;②S/CO值在1.0~1.99,60例;③S/CO值在2.0~4.99,38例;④S/C... 目的探讨酶联免疫吸附试验(ELISA)方法中乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)弱阳性标本复查方式,确保结果的准确可靠。方法用ELISA法筛查出144例如下的标本:①S/CO值0.8~0.99,14例;②S/CO值在1.0~1.99,60例;③S/CO值在2.0~4.99,38例;④S/CO值在5.0~15,32例,以上标本均进行Elecsys HBsAg定量试验和HBsAg确证试验,对结果进一步确证。结果 144例标本中,三种方法都阳性的标本有62例,Elecsys HBsAg定量试验阳性62例,HBsAg确证试验阳性64例,ELISA与Elecsys HBsAg定量试验,ELISA与HBsAg确证试验比较,均有显著性差异(P<0.05),Elecsys HBsAg定量试验与HBsAg确证试验比较,结果没有显著性差异(P>0.05)。结论 ELISA试验做为临床乙肝的筛查方法容易出现假阳性,弱阳性标本可以用Elecsys HBsAg定量试验进行快速复查。 展开更多
关键词 弱阳性 乙肝表面抗原 酶联免疫吸附试验 HBsAg定量试验 HBsAg确证试验
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Rh血型D抗原弱表现型基因分型和序列分析 被引量:2
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作者 邵超鹏 苏宇清 杨渝珍 《华中医学杂志》 CAS 2000年第6期293-295,共3页
目的 探讨 Rh血型 D抗原弱表现型 D抗原数目和 (或 ) D抗原表位数减少形成的分子基础。方法 常规 PCR技术检测 3名 D抗原弱表现型非血缘关系个体 D基因的第 4内含子 ,多重 PCR技术分析第 3、第 6和第 9外显子 ,并分别对 3名个体的 D... 目的 探讨 Rh血型 D抗原弱表现型 D抗原数目和 (或 ) D抗原表位数减少形成的分子基础。方法 常规 PCR技术检测 3名 D抗原弱表现型非血缘关系个体 D基因的第 4内含子 ,多重 PCR技术分析第 3、第 6和第 9外显子 ,并分别对 3名个体的 D基因部分序列进行分析。结果  3名 D抗原弱表现型个体 D基因第 4内含子 ,第 3、第 6和第 9外显子检测结果与正常 D基因完全一致 ,部分序列分析未发现基因突变和 D/CE基因交换。结论  D抗原数目和 (或 ) D抗原表位数的减少造成其血清学弱表现型可能与 展开更多
关键词 D基因 D抗原 RH血型 基因分型 序列分析
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弱D25变异型血型抗原表位分析及输血策略探讨 被引量:10
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作者 王贞 贾双双 +3 位作者 陈景旺 张润青 罗广平 姬艳丽 《中国输血杂志》 CAS 2018年第3期234-237,共4页
目的对1例输注阳性血液的D变异型患者进行Rh血型血清学及分子生物学鉴定,并对其进行不规则抗体检测,探讨该D变异型的输血策略。方法采集患者标本,用2种不同的单克隆抗-D试剂鉴定D抗原,并用试剂盒检测D变异体抗原表位,Rh CE抗原分型,红... 目的对1例输注阳性血液的D变异型患者进行Rh血型血清学及分子生物学鉴定,并对其进行不规则抗体检测,探讨该D变异型的输血策略。方法采集患者标本,用2种不同的单克隆抗-D试剂鉴定D抗原,并用试剂盒检测D变异体抗原表位,Rh CE抗原分型,红细胞直接抗球蛋白试验,不规则抗体筛查;采用多重链接酶依赖的探针扩增(MLPA)方法检测RHD及RHCE基因型,对于MLPA检测不到的RHD突变型等位基因,对RHD基因全部10个外显子进行PCR扩增及产物直接测序分析。结果该患者初步D抗原鉴定结果显示为D抗原弱表达,且直接抗球蛋白试验阴性;D抗原表位检测结果显示其红细胞与D抗原ep D5.4、ep D2.1和ep D3.1表位特异性单克隆抗体产生弱凝集反应,与其余表位抗体均无凝集反应,大量输注D阳性血液后的168 d及232 d抗体筛查结果均为阴性;Rh CE抗原分型为cc Ee,MLPA结果显示其基因型为RHD/d,RHCE基因MLPA基因分型结果与血清学表型一致;RHD基因外显子直接测序发现其第3外显子携带纯合的c.341G〉A(p.Arg114Gln)错义突变。结论患者为弱D25变异型,对弱D25型的D抗原进行表位分析的显示其部分抗原表位缺失。该患者大量输注阳性血液后未产生抗-D,为制定该血型患者的临床输血策略提供数据。 展开更多
关键词 RH血型 D变异型 弱D25型 抗原表位
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1例新的弱D型的鉴定 被引量:12
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作者 吴筱莹 庄乃保 +2 位作者 徐红先 何颖军 邵超鹏 《临床输血与检验》 CAS 2012年第2期103-106,109,共5页
目的分析1例新的Rh血型弱D型个体的RHD等位基因及其红细胞D抗原表位。方法采用常规血清学方法检测Rh血型D、C、c、E和e抗原表型,间接抗人球蛋白试验(IAT)确认D抗原,并分析D抗原表位;序列特异性引物-聚合酶链反应(PCR-SSP)测定RHD基因,... 目的分析1例新的Rh血型弱D型个体的RHD等位基因及其红细胞D抗原表位。方法采用常规血清学方法检测Rh血型D、C、c、E和e抗原表型,间接抗人球蛋白试验(IAT)确认D抗原,并分析D抗原表位;序列特异性引物-聚合酶链反应(PCR-SSP)测定RHD基因,然后分析RHD编码区全长序列,并检测RHD杂合型。结果血清学显示该个例为D抗原弱表现型,Rh因子为D+C+c+E-e+,PCR-SSP检测RHD基因显示与正常Rh(D)阳性对照相同。RHD编码区序列分析发现第9外显子存在1 212C>A碱基突变,其余外显子序列则与正常RHD基因一致(GenBank EF103573),RHD合子型鉴定为RHD+/RHD-杂合型,提示该个体基因型为CDe/cde。红细胞D抗原表位分析显示其具有基本完整D抗原表位。结论该个例为RHD1 212C>A碱基突变形成弱D72型。 展开更多
关键词 RH血型 D抗原 RHD基因 碱基突变 基因型 弱D型
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弱D72血型的血清学特征及分子生物学分析 被引量:8
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作者 姬艳丽 梁倩妮 +6 位作者 骆宏 王贞 温机智 张润青 魏玲 贾双双 罗广平 《中国输血杂志》 北大核心 2017年第5期493-497,共5页
目的了解广州地区人群中弱D72血型的血清学特征及分子遗传背景。方法从广州血液中心献血者人群中收集了62人份D变异型标本,采用多重连接依赖的探针扩增(MLPA)技术做RHD及RHCE基因分型;对于MLPA检测不到的RHD突变型等位基因,对其10个外... 目的了解广州地区人群中弱D72血型的血清学特征及分子遗传背景。方法从广州血液中心献血者人群中收集了62人份D变异型标本,采用多重连接依赖的探针扩增(MLPA)技术做RHD及RHCE基因分型;对于MLPA检测不到的RHD突变型等位基因,对其10个外显子做直接测序分析,并采用D抗原表位分析试剂盒(DScreen)及其他7种单克隆抗-D做D抗原表位血清学检测。结果在62例D变异型标本中,共发现26例弱D表型,其中弱D72突变型等位基因5例[占8.1%(5/62)],4例为RHD*weak D type 72/RHD*01N.01(RHD基因缺失)和Ccee,1例为RHD*weak D type 72/RHD*DVI.3和CCeee。取1例RHD*weak D type 72/RHD*01N.01的红细胞标本做D抗原表位血清学检测:其与D-Screen试剂盒的9种单克隆抗-D均呈阳性反应,反应强度为1+~2+,与其余7种单克隆抗-D也均呈阳性反应,反应强度为w+~1+。结论血型血清学分析初步提示弱D72血型D抗原表位完整,但该血型个体在免疫刺激下是否不会产生抗-D仍需进一步临床证据证实。 展开更多
关键词 弱D72血型 D变异型 MLPA技术 D抗原表位 单克隆抗-D
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